【摘要】：背景:維生素D是指一組在調(diào)節(jié)人體內(nèi)鈣和磷的穩(wěn)態(tài)方面具有明顯作用的脂溶性類固醇。在人體中,維生素D主要以維生素D3(膽鈣化醇)和維生素D2(麥角鈣化醇)兩種形式存在。維生素D在肝臟經(jīng)歷了第一次羥基化并產(chǎn)生了 25羥基維生素 D(25 hydroxyvitamin D,25(OH)D),25(OH)D 是維生素 D 的主要循環(huán)形式,是評估體內(nèi)維生素D水平的最佳指標(biāo)。接著,25(OH)D被運(yùn)送到腎臟,經(jīng)歷另一步羥化過程,轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂猩飳W(xué)活性的1α,25二羥基維生素D(1α,25-dihydroxycholecalciferol,1,25(OH)2D)。近年來,維生素D缺乏已成為全球性的健康問題,對維生素D與男性生殖系統(tǒng)的研究也逐漸成為熱點(diǎn)。此前有研究分析了血清維生素D水平與男性生殖功能的關(guān)系,但尚無統(tǒng)一結(jié)論。目的:本研究旨在綜合探討血清及精漿維生素D水平與男性生殖功能的關(guān)系,為研究維生素D對男性生殖的具體作用機(jī)制提供研究方向。并在體外以維生素D的活性物質(zhì)—1,25(OH)2D處理精子,研究其對精子的具體作用機(jī)制。方法:臨床試驗(yàn):根據(jù)納排標(biāo)準(zhǔn)納入來我科男科門診檢查的不育患者及正常體檢者,通過電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(Electrochemiluminescence immunoassay,ECLIA)檢測25(OH)D水平,并評估血清和精漿25(OH)D與精液質(zhì)量,精子運(yùn)動(dòng)學(xué)參數(shù),循環(huán)抑制素B(Inhibin B,INHB),抗苗勒管激素(Anti-Mullerian Hormone,AMH),及精漿生化指標(biāo)之間的關(guān)系。體外實(shí)驗(yàn):用密度梯度離心法獲取精子,在不含或者含不同濃度1,25(OH)2D的培養(yǎng)液中進(jìn)行孵育,檢測精子的運(yùn)動(dòng)參數(shù),爬高能力及相關(guān)指標(biāo)的變化。結(jié)果:臨床試驗(yàn):血清25(OH)D與精液量,精漿果糖濃度,總果糖量和總鋅量呈正相關(guān)。精漿25(OH)D水平與血清25(OH)D水平無關(guān),而與精液量和精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)呈正相關(guān)。體外實(shí)驗(yàn):使用維生素D的活性形式1,25(OH)2D孵育精子,精子的運(yùn)動(dòng)學(xué)參數(shù)顯著增加,尤其是在用0.1nmol/L 1,25(OH)2D處理30分鐘時(shí),增加最為顯著。在這種孵育條件下,精子的爬高高度伴隨三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP)的增加而提升。精子胞內(nèi)的環(huán)磷酸腺苷(Cyclic adenosine monophosphate,cAMP)的濃度升高,蛋白激酶 A(Protein kinase A,PKA)的活性增加,同時(shí)PKA抑制劑(H89)阻礙了 1,25(OH)2D對ATP的促進(jìn)作用。精子胞內(nèi)鈣離子和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)的濃度都有增加,磷脂酶 C(Phospholipase C,PLC)抑制劑 U-73122 阻礙了 1,25(OH)2D對胞內(nèi)鈣離子及NADH的促進(jìn)作用,而線粒體鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)體(Mitochondrial calcium uniporter,MCU)抑制劑(Ru360)沒有阻礙 1,25(OH)2D 對 NADH 及 ATP的促進(jìn)作用。結(jié)論:1.精漿中的維生素D可能參與了精子運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)。2.1,25(OH)2D可通過促進(jìn)cAMP/PKA通路及細(xì)胞內(nèi)鈣離子的增加來促進(jìn)ATP合成,從而增強(qiáng)精子活力。
【圖文】：

（ａ）：不同季節(jié)納入的患者血清２５（ＯＨ）Ｄ水平的比較；（ｂ）：不同季節(jié)納入的患者Ｈ）Ｄ水平的比較。四季的劃分基于：春季（３月至５月），夏季（６月至８月），至１１月）和冬季（１２月至２月）。不同季節(jié)２５（ＯＨ）Ｄ水平的比較由Ｋｒｕｓｋａｌ－Ｗａ合ｄｕｎｎ’ｓ邋ｐｏｓｔ邋ｈｏｃ邋ｔｅｓｔ分析，Ｐ邋＜邋０．０５被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著差異。逡逑清和精漿２５（ＯＨ）Ｄ水平整體均呈夏季最高，冬季最低，血清２５（ＯＨ）Ｄ節(jié)之間不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Ｐ邋＝邋０．２８２１）：夏季２７．４８邋（第２５和第７５百分３邋－邋４１．６７）邋ｎｇ邋／邋ｍｌ，秋季邋２６．３４邋（第邋２５邋和第邋７５邋百分位數(shù)：２１．０２邋－邋３１．８５４６逡逑

0？邐Ｉ邐Ｉ邐Ｉ逡逑０邐２０邐４０邐６０逡逑Ｓｅｒｕｍ邋２５（ＯＨ）Ｄ（ｎｇ／ｍｌ）逡逑ｂ邋１５．逡逑ｒ＝０．２７１，Ｐ＝０．０００１，ｎ＝１９２逡逑且邋１０－邐？逡逑ｊ５逡逑０＂邐ｉｉｉ＊逡逑０邐５邐１０邐１５邐２０逡逑Ｓｅｍｉｎａｌ邋ｐｌａｓｍａ邋２５（ＯＨ）Ｄ（ｎｇ／ｍｌ）逡逑Ｃ邋２00ｒ＝－０．１７４，Ｐ＝０．０１５９ｎ＝１９２逡逑
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R698.2

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本文編號：2607628