【摘要】：狼瘡腎炎是一種慢性自身免疫性疾病,表現(xiàn)為固有免疫與適應(yīng)性免疫紊亂。在患者腎小球與腎小管間質(zhì)中可見大量炎細(xì)胞浸潤,其中尤以活化的巨噬細(xì)胞最為多見。然而,目前關(guān)于巨噬細(xì)胞調(diào)控狼瘡腎炎進(jìn)展的作用與機(jī)制尚不清楚。在本研究中我們使用生物信息技術(shù)分析巨噬細(xì)胞中參與調(diào)控狼瘡腎炎發(fā)病機(jī)制的基因。首先,檢索GEO數(shù)據(jù)庫,獲得狼瘡腎炎患者血液中單個核細(xì)胞與狼瘡腎炎小鼠腎組織分離巨噬細(xì)胞基因芯片數(shù)據(jù)。使用維恩分析發(fā)現(xiàn)兩組數(shù)據(jù)有10個共有差異基因,其中8個基因為上調(diào),2個基因為下調(diào)。結(jié)合差異基因PPI網(wǎng)絡(luò)與GO分析結(jié)果,我們發(fā)現(xiàn)共有差異基因中CD38與CCL2可能參與狼瘡腎炎的調(diào)控。檢索RGD Disease Portals數(shù)據(jù)庫中狼瘡腎炎條目,發(fā)現(xiàn)以往研究已證實CCL2參與調(diào)控狼瘡腎炎的發(fā)生發(fā)展。我們選擇患者腎活檢標(biāo)本進(jìn)行免疫熒光染色,結(jié)果顯示CD38表達(dá)在狼瘡腎炎患者腎組織巨噬細(xì)胞中顯著上調(diào)。所以,以上結(jié)果說明CD38在狼瘡腎炎腎組織浸潤巨噬細(xì)胞中被大量激活,可能成為疾病治療的新靶點。生物信息技術(shù)為研究疾病進(jìn)展相關(guān)基因與發(fā)病機(jī)制提供新思路。CD38是一種具有ADP核糖基環(huán)化酶與環(huán)狀A(yù)DP核糖基水解酶活性的跨膜糖蛋白,參與調(diào)控多種細(xì)胞活動。然而,在感染性急性腎損傷狀態(tài)下巨噬細(xì)胞中CD38的激活對調(diào)控疾病的作用目前還不清楚。本研究發(fā)現(xiàn)在Raw 264.7細(xì)胞中,脂多糖(LPS)可上調(diào)巨噬細(xì)胞CD38的表達(dá),且呈時間與劑量依賴性。使用siRNA或CD38的抑制劑槲皮素(quercetin)發(fā)現(xiàn)單核細(xì)胞M1極化減少,機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)這一過程是通過抑制NF-κ B信號通路實現(xiàn)。體內(nèi)實驗結(jié)果顯示,LPS腹腔注射可引起嚴(yán)重腎功能減退及病理損傷。注射CD38抑制劑quercetin可降低血尿素氮。同時,從HE和PAS及熒光染色可見,抑制CD38表達(dá)可減輕LPS引起的腎小管損傷和腎小囊擴(kuò)張,并減少腎組織巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤以及腎組織前炎癥因子(RANTES,TNF-α和MCP-1)的表達(dá)。更進(jìn)一步,從腎及脾臟中提取的巨噬細(xì)胞結(jié)果顯示,LPS+quercetin組中M1標(biāo)記物iNOS,IL-6,IL-1β,and IL-12β表達(dá)明顯下調(diào),而且NF-κ B信號通路激活減弱。所以,以上結(jié)果表明巨噬細(xì)胞中CD38在LPS引起的急性腎損傷發(fā)病進(jìn)程中扮演重要角色,其過程通過調(diào)控NF-κ B信號通路激活實現(xiàn)。
【圖文】：

差異基因聚類富集分析和維恩圖。（Ａ，，Ｂ）人（Ａ）與小鼠（Ｂ）差異逡逑表達(dá)基因聚類分析熱圖。每行代表一個基因，每縱列代表一個樣本。紅色為上逡逑調(diào)模塊，藍(lán)色為下調(diào)模塊。（Ｃ，邋Ｄ）維恩圖：人和小鼠共有的上調(diào)（Ｃ）與下逡逑調(diào)（Ｄ）差異基因。逡逑

蛋白質(zhì)相互作用（ＰＰＩ）網(wǎng)絡(luò)。（Ａ，邋Ｂ）邋ＰＰＩ網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建了人（Ａ）與小鼠逡逑（Ｂ）維恩分析得出的差異基因。黃色節(jié)點代表差異維恩分析基因，綠色節(jié)點逡逑代表與其有相互作用關(guān)系的差異基因。逡逑
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R593.242

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Wenjie Wei;Richard Graeff;Jianbo Yue;;Roles and mechanisms of the CD38/cyclic adenosine diphosphate ribose/Ca~(2+) signaling pathway[J];World Journal of Biological Chemistry;2014年01期

本文編號：2596470