【摘要】：目的:體外培養(yǎng)人主動脈平滑肌細胞,明確尿毒癥血清可激活NLRP3炎癥體信號通路介導VSMCs增殖,并探索NLRP3抑制劑對VSMCs增殖的抑制作用。方法:收集尿毒癥患者及健康人血清,以10%的血清濃度作用于VSMCs,將實驗分為4組:尿毒癥血清組(U)、健康血清組(N)、尿毒癥血清+格列苯脲組(U+Gli)、健康血清+格列本脲組(N+Gli)。1.VSMCs培養(yǎng)與處理:人主動脈平滑肌細胞(HASMCs)購于美國ATCC公司,用10%尿毒癥血清刺激,以健康血清作對照;進一步嘗試格列本脲對VSMCs增殖的抑制作用。2.VSMCs NLRP3 m RNA表達水平檢測:RT-PCR方法檢測NLRP3 m RNA表達量。3.VSMCs NLRP3、Caspase-1活性檢測:Western Blots法檢測NLRP3、Caspase-1 p20蛋白表達量。4.VSMCs增殖活性檢測:使用ELISA檢測試劑盒測定溴脫氧尿苷(Brdu)攝取量,通過分析Brdu攝取量來判斷VSMCs的增殖活性。結果:與健康血清組比較,尿毒癥血清組VSMCs NLRP3 m RNA表達量增多,NLRP3與Caspase-1 p20蛋白表達量也升高,細胞培養(yǎng)上清液中Brdu含量增多,兩組對照分析,差別有統(tǒng)計學意義(P0.05)。而格列本脲處理前后,尿毒癥血清組和健康血清組相比較,NLRP3 m RNA、NLRP3蛋白、Caspase-1 p20蛋白表達量均減少,Brdu攝取量也隨之減少,差別具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:尿毒癥血清通過激活NLRP3炎癥復合體信號通路,可以促進人主動脈平滑肌細胞增殖,而格列苯脲可通過抑制NLRP3炎癥體活化進而抑制血管平滑肌細胞的增殖。
[Abstract]:Aim: to culture human aortic smooth muscle cells in vitro, to confirm that uremic serum can activate NLRP3 inflammatory body signal pathway mediated VSMCs proliferation, and to explore the inhibitory effect of NLRP3 inhibitor on VSMCs proliferation. Methods: the serum of uremic patients and healthy people was collected and treated with 10% serum concentration of VSMCs,. The experiment was divided into four groups: uremic serum group (U), healthy serum group (N), uremic serum glibenclamide group (U Gli), healthy serum glibenclamide group (N Gli). 1.VSMCs culture and treatment: human aortic smooth muscle cell (HASMCs) was purchased from ATCC Company of the United States and stimulated with 10% uremic serum. Healthy serum was used as control. The inhibitory effect of glibenclamide on the proliferation of VSMCs was further tried. 2. The expression of NLRP3 m RNA was detected by RT-PCR method. 3. The expression of NLRP3,Caspase-1 p20 protein was detected by: Western Blots assay. 4. The (Brdu) uptake of bromodeoxyuridine was measured by ELISA detection kit, and the proliferation activity of VSMCs was judged by analyzing Brdu uptake. Results: compared with the healthy serum group, the expression of VSMCs NLRP3 m RNA, the expression of NLRP3 and Caspase-1 p20 protein and the content of Brdu in the culture medium of uremic serum group were also increased, and the difference between the two groups was statistically significant (P 0.05). Before and after glibenclamide treatment, compared with the healthy serum group, the expression of NLRP3 m RNA,NLRP3 protein and Caspase-1 p20 protein decreased, and the Brdu uptake also decreased, the difference was statistically significant (P 0.05). Conclusion: uremic serum can promote the proliferation of human aortic smooth muscle cells by activating NLRP3 inflammatory complex signal pathway, while glibenclamide can inhibit the proliferation of vascular smooth muscle cells by inhibiting the activation of NLRP3 inflammation.
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R692.5

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10 侯軍;李建民;王東;王國榮;傅艷紅;劉艷香;;血液透析治療尿毒癥期間心血管并發(fā)癥的處理體會(摘要)[A];'96全國急診醫(yī)學和重癥搶救護理學術會議論文匯編[C];1996年

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6 副主任醫(yī)師 谷峰;尿毒癥的“蛛絲馬跡”[N];大眾衛(wèi)生報;2002年

7 云南保山市第二人民醫(yī)院 王健;尿毒癥治愈的可能有多大？[N];健康報;2007年

8 ;腎炎與尿毒癥的防治[N];中國老年報;2001年

9 樓觀;尿毒癥患者的福音[N];上海中醫(yī)藥報;2005年

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本文編號：2505330