【摘要】：精子發(fā)生是一個高度復(fù)雜的過程,包括有絲分裂、減數(shù)分裂和精子生成三個部分。精子生成是產(chǎn)生精子獨(dú)有的特異性形狀的重要步驟,它包括頂體形成、染色體濃縮、核塑形和鞭毛形成,最終產(chǎn)生高度特異的精子。精子的發(fā)育分化缺陷就能導(dǎo)致各種畸形精子癥(如巨頭精子癥和圓頭精子癥)。精子的功能即結(jié)合卵細(xì)胞并將遺傳物質(zhì)傳遞給下一代,而畸形精子癥通常與臨床男性不育密切相關(guān)�；诒緦嶒炇仪捌诘墓ぷ骰A(chǔ),通過睪丸組織基因表達(dá)芯片經(jīng)行分析,篩選出一系列睪丸上調(diào)基因和睪丸下調(diào)基因,這些基因可能與精子發(fā)生及授精密切相關(guān)。根據(jù)人類基因組命名委員會的命名原則,我們將其中的一個基因命名為Spata46(spermatogenesis associated 46)并進(jìn)行深入探討。利用RT-PCR、RT-q PCR技術(shù),我們發(fā)現(xiàn)Spata46基因在小鼠和人中均呈睪丸特異性表達(dá),并在小鼠睪丸中呈年齡依賴性。通過免疫熒光技術(shù),發(fā)現(xiàn)SPATA46特異定位于長形精子和成熟精子的頭部,而細(xì)胞實驗證明SPATA46為核膜蛋白。上述結(jié)果表明,SPATA46定位于精子頂體帽區(qū)域的核膜上。通過基因敲出小鼠模型,我們發(fā)現(xiàn)Spata46~(-/-)雄性小鼠生育力下降,并且表現(xiàn)為畸形精子癥。進(jìn)一步通過睪丸組織的透射電鏡,我們發(fā)現(xiàn)Spata46~(-/-)精細(xì)胞的核膜斷裂。最后通過體外授精實驗,我們發(fā)現(xiàn)Spata46~(-/-)精子聚集于卵周隙,并且入卵精子數(shù)明顯下降,說明SPATA46參與調(diào)控精卵融合。綜上所述,SPATA46是一個新的膜蛋白,特異表達(dá)于睪丸,參與調(diào)控精細(xì)胞的核塑形及精卵融合。
[Abstract]:Spermatogenesis is a highly complex process, including mitosis, meiotic and spermatogenesis. Spermatogenesis is an important step in producing specific shapes of spermatozoa, which includes acrosome formation, chromosome concentration, nuclear shaping and flagellum formation, and finally produces highly specific spermatozoa. Defects in sperm development and differentiation can lead to a variety of abnormal spermatozoa (such as giant spermatozoa and round-headed spermatozoa). The function of spermatozoa is to bind eggs and transmit genetic material to the next generation, and abnormal spermatozoa is usually closely related to clinical male sterility. Based on the previous work in our laboratory, a series of testicular upregulation genes and testicular down-regulated genes were screened by gene expression chip analysis in testicular tissue, which may be closely related to spermatogenesis and indoctrination. According to the naming principles of the Human Genome Nomenclature Committee, one of the genes was named Spata46 (spermatogenesis associated 46 and discussed in depth. By RT-PCR,RT-q PCR, we found that Spata46 gene was specifically expressed in mice and humans, and was age-dependent in mouse testes. By immunofluorescence technique, it was found that SPATA46 was specifically located in the head of long sperm and mature sperm, and SPATA46 was proved to be a nuclear membrane protein. These results suggest that SPATA46 is located on the nuclear membrane of the sperm top cap region. By typing the mouse model, we found that the fertility of Spata46~ (- / -) male mice decreased and showed abnormal spermatozoa. Further through the transmission electron microscope of testicular tissue, we found that the nuclear membrane of Spata46~ (- / -) spermatocytes was broken. Finally, through in vitro indoctrination experiment, we found that Spata46~ (- / -) sperm gathered in the perioocyte space, and the number of sperm entering eggs decreased significantly, which indicated that SPATA46 was involved in the regulation of sperm and egg fusion. In conclusion, SPATA46 is a new membrane protein, which is specifically expressed in the testes and is involved in the regulation of spermatocyte nucleoplasmosis and sperm-egg fusion.
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R698.2

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本文編號：2503488