【摘要】：為了研究馬兜鈴酸(AA)模擬的腎小管上皮細(xì)胞系HK-2細(xì)胞急性腎損傷(AKI)過程中,miRNA-21(miR-21)和腎損傷分子-1(KIM-1)之間的調(diào)控關(guān)系,以及探討miR-21對AA引起的AKI的影響,試驗(yàn)選用HK-2細(xì)胞,采用不同濃度的30,60,120μmol/L AA處理24 h后,提取各組細(xì)胞總RNA,經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量檢測KIM-1 mRNA和miR-21的轉(zhuǎn)錄水平。為了確認(rèn)miR-21是否對KIM-1具有轉(zhuǎn)錄后調(diào)控作用,通過將miR-21模擬物轉(zhuǎn)染進(jìn)入HK-2細(xì)胞,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測KIM-1的mRNA轉(zhuǎn)錄水平,同時(shí)檢測miR-21模擬物的表達(dá),探討miR-21對AA引起的急性腎損傷細(xì)胞是否具有保護(hù)作用。結(jié)果表明:與未處理的對照組相比,AA對HK-2細(xì)胞處理后可以促進(jìn)KIM-1 mRNA和miR-21的過表達(dá)(P0.05)。而高濃度的AA(120μmol/L)則促進(jìn)KIM-1 mRNA表達(dá)明顯下降,而miR-21仍上調(diào)表達(dá)。miR-21模擬物的過表達(dá),明顯下調(diào)了KIM-1 mRNA的表達(dá)水平。低濃度的AA處理HK-2細(xì)胞后,miR-21和KIM-1表達(dá)均上調(diào)。當(dāng)AA濃度達(dá)到一定程度后,上調(diào)的miR-21開始抑制KIM-1 mRNA的表達(dá),最終通過負(fù)反饋調(diào)節(jié)產(chǎn)出作用。說明高濃度AA通過調(diào)控miR-21表達(dá)來抑制KIM-1 mRNA的表達(dá)水平,從而對AKI起到保護(hù)作用。
[Abstract]:To investigate the regulatory relationship between miRNA-21 (miR-21) and renal injury molecule-1 (KIM-1) during acute renal injury of HK-2 cells simulated by aristolochic acid (AA). To explore the effect of miR-21 on AKI induced by AA, HK-2 cells were used in the experiment. After 24 h treatment with different concentrations of 30c60120 渭 mol/L AA, the total RNA, of each group was extracted. The transcription levels of KIM-1 mRNA and miR-21 were measured by real-time fluorescence quantitative analysis after reverse transcription. In order to confirm whether miR-21 has posttranscriptional regulation on KIM-1, the mRNA transcription level of KIM-1 was detected by real-time fluorescent quantitative PCR, and the expression of miR-21 mimics was detected by transfection of miR-21 mimics into HK-2 cells. To investigate the protective effect of miR-21 on acute renal injury induced by AA. The results showed that AA could promote the overexpression of KIM-1 mRNA and miR-21 in HK-2 cells compared with untreated control group (P0.05). However, high concentration of AA (120 渭 mol/L) significantly decreased the expression of KIM-1 mRNA, while miR-21 still up-regulated the expression of miR-21 mimics, which significantly down-regulated the expression of KIM-1 mRNA. After HK-2 cells were treated with low concentration of AA, the expression of miR-21 and KIM-1 were up-regulated. When the concentration of AA reached a certain level, the up-regulated miR-21 began to inhibit the expression of KIM-1 mRNA, and finally regulated the output by negative feedback. It suggested that high concentration of AA could inhibit the expression of KIM-1 mRNA by regulating the expression of miR-21, thus it could protect AKI.
【作者單位】： 西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院;
【分類號】：S852.3

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本文編號：2428471