【摘要】：目的:探討小干擾RNA靶向沉默維生素D受體(VDR)對前列腺癌PC-3細胞生物學(xué)行為的影響。方法:構(gòu)建VDR-shRNA慢病毒載體,用RT-PCR和Western印跡法分別檢測VDR的mRNA和蛋白表達水平;通過細胞劃痕愈合實驗和Transwell小室檢測VDR被沉默后的PC-3細胞遷移能力和侵襲性的變化。結(jié)果:VDR-shRNA質(zhì)粒顯著干擾VDR表達,并成功篩選VDR-shRNA干擾穩(wěn)定的細胞株;細胞劃痕實驗結(jié)果顯示劃痕愈合率VDR干擾組為59%明顯低于空白對照組73.6%和LV3陰性對照組的77.8%,組間差異有顯著性(P0.05),空白對照組和LV3陰性對照組組間差異無顯著性(P0.05)。Transwell小室實驗顯示VDR干擾組透膜細胞數(shù)量明顯低于空白對照組和LV3陰性對照組約為50%,細胞組間差異有顯著性(P0.05),空白對照組和LV3陰性對照組組間差異無顯著性(P0.05)。VDR干擾組細胞的遷移和侵襲能力明顯低于對照組細胞。結(jié)論:VDR基因表達水平能影響前列腺癌細胞的遷移及侵襲能力,VDR低表達可致前列腺癌細胞遷移及侵襲能力下降。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of small interfering RNA targeting silencing vitamin D receptor (VDR) on the biological behavior of prostate cancer PC-3 cells. Methods: VDR-shRNA lentivirus vector was constructed and the expression levels of mRNA and protein in VDR were detected by RT-PCR and Western blotting respectively. The migration ability and invasiveness of PC-3 cells after VDR silencing were detected by cell scratch healing test and Transwell chamber. Results: VDR-shRNA plasmid significantly interfered with the expression of VDR and successfully screened the cell lines with stable VDR-shRNA interference. The results of cell scratch test showed that the rate of scratch healing in the VDR interference group was 59% significantly lower than that in the blank control group (73.6%) and the LV3 negative control group (77.8%). The difference between the two groups was significant (P0.05). There was no significant difference between the blank control group and the LV3 negative control group (P0.05). Transwell chamber test showed that the number of permeability cells in the VDR interference group was significantly lower than that in the blank control group and the LV3 negative control group was about 50%). There was significant difference between the two groups (P0.05), but there was no significant difference between the blank control group and the LV3 negative control group (P0.05). The migration and invasion ability of the). VDR interference group was significantly lower than that of the control group. Conclusion: the expression level of VDR gene can affect the migration and invasion ability of prostate cancer cells, and the low expression of VDR can decrease the migration and invasion ability of prostate cancer cells.
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科;
【基金】：基金項目:云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究[2017FE467(-042)]和[2014 FB031]~~
【分類號】：R737.25

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本文編號：2296542