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前列腺癌中Sp1通過PKM2途徑促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝

發(fā)布時間:2018-10-14 09:52
【摘要】:目的:確定前列腺癌中Sp1通過PKM2途徑對前列腺癌細(xì)胞的增殖和代謝的作用。方法:前列腺癌細(xì)胞株DU145與PC3體外轉(zhuǎn)染Sp1 si RNA與陰性對照無意義核苷酸序列(NC組),采用葡萄糖檢測試劑盒與乳酸檢測試劑盒檢測轉(zhuǎn)染后有氧糖酵解變化;CCK-8實驗檢測轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞增殖;q RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染后PKM2表達(dá);Western Blotting檢測轉(zhuǎn)染后Sp1與PKM2表達(dá)。結(jié)果:DU145與PC3轉(zhuǎn)染Sp1 si RNA后與NC組比較,剩余葡萄糖顯著偏高,乳酸產(chǎn)生顯著下降;CCK8實驗表明抑制Sp1后能顯著抑制前列腺癌細(xì)胞的增殖能力;q RT-PCR實驗顯示抑制Sp1后明顯抑制PKM2的表達(dá);Western Blotting顯示轉(zhuǎn)染的Sp1 si RNA對Sp1具有較高的沉默效率,且PKM2的表達(dá)也降低。結(jié)論:Sp1在前列腺癌細(xì)胞株DU145與PC3中可通過直接作用于PKM2促進(jìn)細(xì)胞代謝。
[Abstract]:Aim: to determine the effect of Sp1 on the proliferation and metabolism of prostate cancer cells through PKM2 pathway. Methods: prostate cancer cell line DU145 and PC3 were transfected with Sp1 si RNA and negative control nucleotide sequence in vitro (NC group), glucose detection kit and lactic acid assay kit were used to detect the changes of aerobic glycolysis after transfection; CCK-8 test was used to detect the changes of aerobic glycolysis after transfection. The cell proliferation after transfection and the expression of PKM2 and PKM2 after transfection were detected by Q RT-PCR and; Western Blotting respectively. Results: after transfection of Sp1 si RNA with DU145 and PC3, the residual glucose was significantly higher than that in NC group. CCK8 assay showed that inhibition of Sp1 could significantly inhibit the proliferation of prostate cancer cells, and Q RT-PCR assay showed that Sp1 inhibited the expression of PKM2 significantly,; Western Blotting showed that the transfected Sp1 si RNA had a higher silencing efficiency to Sp1. The expression of PKM2 was also decreased. Conclusion: Sp1 can promote cell metabolism by directly acting on PKM2 in prostate cancer cell line DU145 and PC3.
【作者單位】: 東南大學(xué)附屬徐州市中心醫(yī)院泌尿外科;東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院泌尿外科;東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院外科中心實驗室;
【基金】:國家自然基金(81370849、81300472、81272557、81202034) 臨床醫(yī)學(xué)科技專項——新型臨床診療技術(shù)攻關(guān)基金(BL2013032) 教育部博士點基金(20120092120071) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK2012336、BK2012647) 南京市科技發(fā)展基金(201201053) 江蘇六大人才高峰基金(WSW-067) 江蘇省普通高校研究生科研創(chuàng)新計劃基金(CXZZ13_0133) 中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費專項基金資助項目
【分類號】:R737.25

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2270104

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