【摘要】：第一部分抗CD25單抗誘導治療對腎移植早期患者外周血調節(jié)性T細胞及其亞群的影響目的本部分擬研究腎移植早期患者接受抗CD-25單克隆抗體誘導治療后對其外周血調節(jié)性T細胞(Treg)及其亞群的影響。方法自2012至2013年間,10名腎移植患者根據是否接受巴利昔單抗誘導治療,被分為誘導組和非誘導組,分別在腎移植術前兩小時、術后1周、術后2周采集外周血液樣本,使用流式細胞儀分析其調節(jié)性T細胞及其亞群的比例。結果與非誘導組相比,巴利昔單抗誘導組外周血中CD25+T細胞和CD25+Foxp3+雙標記T細胞均出現明顯的下降,并在術后兩周內保持較低水平�；罨蚑reg與分泌細胞因子型Treg亞群也在術后1周內出現了短暫的下降。抑制性轉錄因子FOXP3并沒有在接受誘導治療后受到顯著影響。結論在腎移植早期階段,抗CD25單克隆抗體下調外周血調節(jié)性T細胞及其活化亞群的比例,但其免疫抑制功能未受到明顯影響。第二部分體外分離培養(yǎng)調節(jié)性T細胞后,抗CD25單抗對其生存和功能的影響目的本部分擬在體外分離培養(yǎng)健康志愿者外周血PBMC調節(jié)性T細胞,研究抗CD25單抗對其生存和免疫抑制功能的影響。方法分離健康志愿者外周血PBMC,采用流式分選方法分選CD4+CD25+CD 127-調節(jié)性T細胞,加入刺激因子與之共培養(yǎng)擴增,使用抗CD25單克隆抗體處理后,使用AnnexinV/PI雙染法檢測其凋亡情況,使用ELISA方法檢測其IL-10, TGF-β等細胞因子的分泌情況。結果與對照組相比,抗CD25單抗處理組在細胞凋亡、細胞因子分泌等方面未出現明顯差異。結論在體外實驗中,使用抗CD25單克隆抗體后,調節(jié)性T細胞的生存及其免疫抑制因子的分泌功能并未受到明顯影響。
[Abstract]:Effect of anti CD25 monoclonal antibody induction therapy on peripheral blood regulatory T cells and its subsets in patients with renal transplantation objective to study the effect of anti CD-25 monoclonal antibody induction therapy on peripheral blood of early renal transplantation patients Effects of regulatory T cell (Treg) and its subsets. Methods from 2012 to 2013, 10 renal transplant patients were divided into two groups according to whether they received bariximab induction therapy or not. Peripheral blood samples were collected two hours before renal transplantation, one week after transplantation and two weeks after renal transplantation. The proportion of regulatory T cells and their subsets was analyzed by flow cytometry. Results compared with the control group, the levels of CD25 T cells and CD25 Foxp3 double labeled T cells in the peripheral blood of the Balicicab induced group were significantly lower than those in the non-induction group, and remained at a low level within two weeks after operation. The subsets of activated Treg and secreting cytokine type Treg also decreased 1 week after operation. Inhibitory transcription factor FOXP3 was not significantly affected after induction therapy. Conclusion in the early stage of renal transplantation, monoclonal antibodies against CD25 down-regulate the proportion of peripheral blood regulatory T cells and their activated subsets, but their immunosuppressive function is not significantly affected. The second part: effects of anti CD25 monoclonal antibody on survival and function of regulatory T cells isolated and cultured in vitro objective to isolate and culture PBMC regulatory T cells from peripheral blood of healthy volunteers in vitro. To study the effect of anti CD25 monoclonal antibody on its survival and immunosuppressive function. Methods Peripheral blood PBMC, was isolated from healthy volunteers and CD4 CD25 CD 127-regulatory T cells were separated by flow sorting method, and co-cultured and amplified by adding stimulating factor. After treated with anti-CD25 monoclonal antibody, the apoptosis of CD4 CD25 CD 127-regulatory T cells was detected by AnnexinV/PI double staining method. ELISA method was used to detect the secretion of IL-10, TGF- 尾 and other cytokines. Results there was no significant difference in apoptosis and cytokine secretion between anti CD25 McAb group and control group. Conclusion in vitro, the survival of regulatory T cells and the secretion of immunosuppressive factors were not significantly affected by the use of monoclonal antibodies against CD25.
【學位授予單位】：復旦大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R699.2

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