【摘要】：目的:探討microRNA-497(miR-497)對(duì)高糖和胰島素誘導(dǎo)的腎小球系膜細(xì)胞焦亡的調(diào)控作用。方法:高糖和胰島素處理人腎小球系膜細(xì)胞(HRMC),在不同時(shí)間運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞焦亡,實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)HRMC細(xì)胞中miR-497表達(dá)水平;轉(zhuǎn)染不同濃度miR-497 mimic,檢測(cè)細(xì)胞焦亡通路關(guān)鍵基因mRNA表達(dá)水平,運(yùn)用Western印記檢測(cè)NLRP1蛋白的表達(dá)水平;運(yùn)用生物信息學(xué)和螢光素酶報(bào)告基因技術(shù)預(yù)測(cè)并驗(yàn)證miR-497對(duì)炎性小體NLRP1基因的靶向結(jié)合作用;miR-497 mimic和pc DNA-NLRP1分別單獨(dú)轉(zhuǎn)染或共轉(zhuǎn)染后檢測(cè)細(xì)胞增殖。結(jié)果:高糖和胰島素處理48 h以上HRMC細(xì)胞焦亡水平顯著增加(P0.05),miR-497表達(dá)水平顯著降低(P0.05);miR-497 mimic轉(zhuǎn)染顯著抑制HRMC細(xì)胞焦亡,和焦亡通路關(guān)鍵基因IL-1β、TNFα和caspase-1表達(dá)水平下降(P0.05);miR-497可直接靶向作用于NLRP1基因并抑制NLRP1蛋白的表達(dá);NLRP1過(guò)表達(dá)可消除miR-497對(duì)細(xì)胞焦亡的抑制作用。結(jié)論:miR-497 mimic抑制高糖和胰島素誘導(dǎo)的腎小球系膜細(xì)胞焦亡。
[Abstract]:Objective: To investigate the regulatory effect of microRNA-497 (miR-497) on the death of glomerular mesangial cells induced by high glucose and insulin. Methods: high glucose and insulin were used to treat human glomerular mesangial cells (HRMC). The expression of miR-497 in HRMC cells was detected by flow cytometry at different time. The expression of miR-497 in HRMC cells was detected by real-time quantitative PCR, and miR was transfected with different concentrations of miR. -497 mimic was used to detect the expression level of key gene mRNA in the cell focal pathway, and to detect the expression level of NLRP1 protein by Western imprint. The target binding effect of miR-497 on the NLRP1 gene of inflammatory corpuscle was predicted and verified by bioinformatics and luciferase reporter gene technique, and miR-497 mimic and PC DNA-NLRP1 were transfected or co transfected separately. Results: the results showed that the level of HRMC cells with high glucose and insulin treatment more than 48 h increased significantly (P0.05), and the expression level of miR-497 decreased significantly (P0.05); miR-497 mimic transfection significantly inhibited the death of HRMC cells, and the key genes of IL-1 beta, TNF A and caspase-1 decreased (P0.05). The expression of the NLRP1 gene and the inhibition of the expression of NLRP1 protein; NLRP1 overexpression can eliminate the inhibitory effect of miR-497 on the apoptosis of cells. Conclusion: miR-497 mimic inhibits the death of glomerular mesangial cells induced by high glucose and insulin.
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院腎內(nèi)科;第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)員旅三營(yíng)九連;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81400699) 陜西省自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(2014JZ007)
【分類(lèi)號(hào)】：R692

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳文標(biāo);黃建溶;戴勇;;膜性腎病差異性表達(dá)microRNA的靶基因功能分析[J];暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2014年04期

2 紀(jì)家濤;許傳亮;葉華茂;周鐵;湯元杰;孫穎浩;;前列腺癌細(xì)胞激素非依賴性轉(zhuǎn)化過(guò)程中microRNA的差異化表達(dá)[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2013年01期

3 王禮平;陽(yáng)東榮;單玉喜;薛波新;孫承文;;表達(dá)生存素相關(guān)microRNA-494基因腺病毒載體的構(gòu)建[J];江蘇醫(yī)藥;2012年11期

4 李羿;趙洪雯;申兵冰;吳雄飛;;microRNA與腎間質(zhì)纖維化的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年24期

5 姚俊強(qiáng);李燕通;;microRNA與男性生殖[J];中國(guó)醫(yī)藥指南;2012年05期

6 康延杰;王春陽(yáng);倪少濱;;microRNA在膀胱尿路上皮癌中的研究進(jìn)展[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2012年15期

7 袁新科;肖平;凌光輝;;microRNA在腎臟疾病中的研究進(jìn)展[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2011年01期

8 王海峰;楊宏;胡禮炳;霍倩;雷永虹;秦?fù)P;李俊;畢城偉;;上調(diào)microRNA-101沉默EZH2基因表達(dá)對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞系增殖和凋亡的影響[J];昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2014年09期

9 張葉飛;黃江波;;microRNA與膀胱移行細(xì)胞癌關(guān)系研究進(jìn)展[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)藥雜志;2011年06期

10 許潑實(shí);;microRNA與前列腺癌的發(fā)生和轉(zhuǎn)移[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2011年05期

相關(guān)會(huì)議論文 前8條

1 ;Comparasion of Inhibitory Effects on Survivin Gene Expression in Prostate Cancer by Vector-based microRNA and siRNA[A];2008年全國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要[C];2008年

2 王家祥;胡倩;劉秋亮;樊玉霞;楊少波;董瑞;秦攀;張大;張謙;楊合英;;腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞株與正常胚腎細(xì)胞株microRNA表達(dá)譜的差異[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)小兒外科學(xué)術(shù)會(huì)論文集[C];2010年

3 劉玉林;胡雙綱;平萍;龔東明;曹小蓉;劉勇;王益鑫;黃翼然;李錚;;正常和不育男性睪丸microRNA表達(dá)譜研究[A];第十五屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

4 許文偉;薛耀明;;microRNA對(duì)糖尿病腎病時(shí)腎臟不同細(xì)胞的作用及影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

5 呂林莉;Yuhan Cao;Ming Zhen;Dan Liu;Bi-Cheng Liu;Min Xu;Hong Liu;Ri-Ning Tang;;EVALUATION OF THE ISOLATION AND QUANTIFICATION OF MICRORNA FROM URINARY EXOSOME FOR BIOMARKER DISCOVERY[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)腎臟生理專(zhuān)業(yè)委員會(huì)第二屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2013年

6 尤小寒;章慧娣;蘇震;黃朝興;薛向陽(yáng);;與大鼠腎間質(zhì)纖維化相關(guān)microRNA的初步研究[A];2012年浙江省腎臟病學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2012年

7 紀(jì)家濤;許傳亮;葉華茂;周鐵;湯元杰;任善成;孫穎浩;;前列腺癌細(xì)胞LNCaP激素非依賴性轉(zhuǎn)變過(guò)程中microRNA的變化研究[A];第十五屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

8 Jiang-guo Zhu;Xi-bin Chen;Hui-chan He;Wei-de Zhong;;MicroRNA—23b downregulates peroxiredoxinⅢ in human prostate cancer[A];2013年貴州省泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 周陽(yáng);包含microRNA的微囊泡介導(dǎo)腎小管間質(zhì)纖維化的機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2014年

2 謝京;尿路上皮癌轉(zhuǎn)移的臨床特征及相關(guān)microRNA的初步研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

3 劉小春;絕經(jīng)后壓力性尿失禁婦女尿道旁陰道前壁組織microRNA表達(dá)譜及其靶標(biāo)分析[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

4 紀(jì)家濤;前列腺癌細(xì)胞LNCaP激素非依賴性轉(zhuǎn)變過(guò)程中microRNA的變化研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2008年

5 胡峻琿;人腎癌干細(xì)胞的分離、鑒定及其特異性microRNA的篩選和功能研究[D];華中科技大學(xué);2014年

6 陳智勇;腎透明細(xì)胞癌循環(huán)microRNA表達(dá)變化的研究[D];中南大學(xué);2010年

7 熊明霞;microRNA在腎間質(zhì)纖維化中作用的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

8 陳愛(ài)榮;1、葉酸代謝酶相關(guān)亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性與2型糖尿病及代謝綜合征易感性的關(guān)聯(lián)研究 2、膀胱癌石蠟包埋組織microRNA檢測(cè)及臨床意義的初步探討[D];蘭州大學(xué);2010年

9 張海梁;前列腺癌患者血清microRNA表達(dá)特點(diǎn)及miR-21在前列腺癌細(xì)胞中的功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

10 陳璋輝;前列腺癌相關(guān)融合基因TMPRSS2-ERG及循環(huán)microRNA的研究[D];浙江大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前9條

1 任一;microRNA在膀胱癌中的研究進(jìn)展[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

2 袁新科;microRNA302c在腹膜間皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化中的作用及分子機(jī)制[D];中南大學(xué);2011年

3 唐偉偉;不同性別腎缺血再灌注損傷模型小鼠MicroRNA的表達(dá)譜分析[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

4 劉陽(yáng);microRNA-149*對(duì)膀胱癌T24細(xì)胞體外增殖、凋亡及侵襲的影響[D];南華大學(xué);2012年

5 徐向東;Exosomes源性microRNA-29c誘導(dǎo)膀胱癌細(xì)胞凋亡的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

6 胡倩;腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞株與正常胚腎細(xì)胞株microRNA表達(dá)譜的差異[D];鄭州大學(xué);2010年

7 王乾了;IgA腎病患者外周血B淋巴細(xì)胞microRNA差異表達(dá)及臨床意義研究[D];川北醫(yī)學(xué)院;2014年

8 成鵬;microRNA-141、microRNA-205、icroRNA-429在膀胱癌侵襲轉(zhuǎn)移中的初步研究[D];中南大學(xué);2013年

9 孟嬌;腎臟特異性microRNA的鑒定及功能研究[D];南京大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：2167803