【摘要】：目的探討長鏈非編碼RNA PTENP1在膀胱癌發(fā)生發(fā)展中的分子機制。方法通過逆轉(zhuǎn)錄實時定量PCR(q RT-PCR)分別檢測PTENP1,PTEN,miR-17在膀胱癌中的基礎(chǔ)表達(dá)并關(guān)聯(lián)分析。利用Western blot檢測膀胱癌細(xì)胞系T24與5637中超表達(dá)PTENP1后PTEN的表達(dá)變化。通過熒光素酶報告試驗驗證miR-17對PTENP1及PTEN的靶向作用。最后通過在膀胱癌細(xì)胞系T24和5637中共表達(dá)miR-17和PTENP1,建立穩(wěn)定共表達(dá)細(xì)胞系進行增殖和遷移實驗,探索長鏈非編碼RNA PTENP1在膀胱癌發(fā)生發(fā)展中的分子機制。結(jié)果 miR-17在膀胱癌中普遍呈現(xiàn)高表達(dá)趨勢,PTENP1在膀胱癌中呈現(xiàn)普遍低表達(dá)趨勢(P0.05)。與此同時miR-17和PTENP1的基礎(chǔ)表達(dá)為負(fù)相關(guān),PTENP1與PTEN的基礎(chǔ)表達(dá)為正相關(guān)。WB實驗發(fā)現(xiàn)于膀胱癌細(xì)胞系T24和5637中過表達(dá)PTENP1后可以在翻譯水平增加PTEN的表達(dá),熒光素酶報道實驗驗證了miR-17可同時靶向PTENP1及PTEN,在膀胱癌中miR-17具有促癌功能,同時在膀胱癌細(xì)胞中我們發(fā)現(xiàn)miR-17可以部分回復(fù)PTENP1的抑癌功能。結(jié)論長鏈非編碼RNA PTENP1在膀胱癌中發(fā)揮抑癌功能的分子機制可能是PTENP1結(jié)合miR-17作為競爭性內(nèi)源RNA競爭,從而降低miR-17對抑癌基因PTEN的表達(dá)抑制。
[Abstract]:Objective to investigate the molecular mechanism of long chain non-coding RNA PTENP1 in the carcinogenesis and development of bladder cancer. Methods the basic expression of PTENP1 and PTENN miR-17 in bladder cancer was detected by reverse transcriptase real time quantitative PCR (q RT-PCR. The changes of PTEN expression in bladder cancer cell lines T24 and 5637 after overexpression of PTENP1 were detected by Western blot. Luciferase report test was used to verify the targeting effect of miR-17 on PTENP1 and PTEN. Finally, miR-17 and PTENP1 were co-expressed in T24 and 5637 bladder cancer cell lines, and the stable co-expression cell lines were established to carry out proliferation and migration experiments to explore the molecular mechanism of long chain non-coding RNA PTENP1 in the development of bladder cancer. Results there was a high expression trend of miR-17 in bladder cancer and a general low expression trend of PTENP1 in bladder cancer (P0.05). At the same time, the basic expression of miR-17 and PTENP1 was negatively correlated with the basic expression of PTEN. WB assay showed that overexpression of PTENP1 in bladder cancer cell lines T24 and 5637 could increase the expression of PTEN at translation level. Luciferase reports have demonstrated that miR-17 can target both PTENP1 and PTEN in bladder cancer, and that miR-17 can promote cancer in bladder cancer. In bladder cancer cells, we found that miR-17 can partially restore the anti-tumor function of PTENP1. Conclusion the molecular mechanism of suppressor function of long chain noncoding RNA PTENP1 in bladder cancer may be that PTENP1 combined with miR-17 is a competitive endogenous RNA competition, thus reducing the inhibition of miR-17 on the expression of the tumor suppressor gene PTEN.
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬同濟醫(yī)院泌尿外科;澳門理工學(xué)院高等衛(wèi)生學(xué)校;
【基金】：澳門理工學(xué)院科研項目(RP/ESS-03/2015)
【分類號】：R737.14

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本文編號：2152739