發(fā)布時(shí)間：2018-06-08 22:35

  本文選題：草酸脫羧酶 + 草酸氧化酶��； 參考：《華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年05期

【摘要】：目的構(gòu)建表達(dá)重組草酸降解酶的乳酸菌,并探討對高草酸尿癥大鼠的治療作用。方法將草酸脫羧酶(oxalate decarboxylase,ODC)和草酸氧化酶(oxalate oxidase,OxO)基因與表達(dá)質(zhì)粒pMG36e重組,通過電轉(zhuǎn)化將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入乳酸菌MG1363中。在含100mmol/L草酸的培養(yǎng)液中培養(yǎng)48h,測量其生長情況及培養(yǎng)液中草酸含量變化。以含5%草酸食物喂養(yǎng)SD大鼠,并同時(shí)進(jìn)行重組乳酸菌灌胃治療,1周后收集大鼠24h尿液測量草酸含量。結(jié)果成功構(gòu)建重組pMG36e-ODC,pMG36e-OxO乳酸菌,兩者都可在含100mmol/L草酸的培養(yǎng)液中生長,20h左右開始進(jìn)入對數(shù)期,40h左右進(jìn)入穩(wěn)定期。其中pMG36e-ODC乳酸菌可明顯降低培養(yǎng)液內(nèi)草酸濃度,48h內(nèi)可降解30%,而培養(yǎng)pMG36e-OxO乳酸菌和正常乳酸菌后培養(yǎng)液中草酸含量無明顯變化,48h內(nèi)草酸含量水平下降了約15%。pMG36eODC乳酸菌喂養(yǎng)可顯著降低高草酸飲食大鼠尿液中草酸含量。結(jié)論重組ODC乳酸菌可有效降解草酸,并可通過降解食物中草酸緩解模型大鼠高草酸尿癥。
[Abstract]:Objective to construct lactic acid bacteria expressing recombinant oxalic acid degrading enzyme and to investigate the therapeutic effect of lactobacillus on rats with hyperoxaliduria. Methods the oxalate decarboxylaseODCand oxalate oxidase Oxo were recombined with the expression plasmid pMG36e, and the recombinant plasmid was transformed into the lactobacillus MG1363 by electroporation. The culture medium containing 100 mmol / L oxalic acid for 48 h was used to measure the growth and the content of oxalic acid in the medium. SD rats were fed with 5% oxalic acid and were treated with recombinant lactic acid bacteria for 1 week. The urine of rats was collected for 24 hours to measure oxalic acid content. Results Recombinant pMG36e-ODCG pMG36e-OxO lactic acid bacteria were successfully constructed. Both of them could grow in the medium containing 100 mmol / L oxalic acid for about 20 h and enter the logarithmic phase about 40 h into stable phase. Among them, pMG36e-ODC lactic acid bacteria could significantly reduce oxalic acid concentration in culture medium and degrade 30% within 48 h, while the oxalic acid content in culture medium did not change significantly after culture of pMG36e-OxO lactobacillus and normal lactic acid bacteria. Within 48 hours, oxalic acid content decreased about 15.pMG36eODC lactobacillus. It can significantly reduce the content of oxalic acid in urine of rats with high oxalic acid diet. Conclusion Recombinant ODC lactic acid bacteria can effectively degrade oxalic acid and alleviate hyperoxalic acid urination in model rats by degrading oxalic acid in food.
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院泌尿外科;湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;武漢市普愛醫(yī)院泌尿外科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81270788,No.81500534,No.81370805) 湖北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.2015CFB289,No.2012FFB02412,No.2013CFB174) 武漢市青年科技晨光計(jì)劃項(xiàng)目(No.2013072304010833,No.2015070404010199) 教育部高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金新教師基金(No.20130142120072)
【分類號】：R691.4

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本文編號：1997467