高糖減弱腎組織干細(xì)胞條件培養(yǎng)液對缺氧損傷腎小管上皮細(xì)胞的修復(fù)作用
本文選題:腎 + 干細(xì)胞; 參考:《北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年01期
【摘要】:目的:評估高糖對腎組織干細(xì)胞(kidney stem cells,KSC)條件培養(yǎng)液修復(fù)缺氧損傷腎小管上皮細(xì)胞(renal tubular epithelium cells,RTEC)作用的影響。方法:分離腎乳頭處的KSC,分別用正常糖濃度(簡稱"正糖",5.6 mmol/L)和高糖(30 mmol/L)培養(yǎng)基對KSC進(jìn)行預(yù)處理后制備KSC條件培養(yǎng)液。建立大鼠RTEC缺氧/復(fù)氧模型,比較高糖與正糖刺激后KSC條件培養(yǎng)液對缺氧/復(fù)氧RTEC修復(fù)作用的差異。結(jié)果:(1)缺氧4 h/復(fù)氧2 h為RTEC缺氧/復(fù)氧模型的最佳時間。(2)缺氧后,RTEC早期凋亡率和晚期凋亡率均升高,采用KSC條件培養(yǎng)液干預(yù)12 h和24 h后,與缺氧/復(fù)氧對照組相比,正糖缺氧/復(fù)氧組和高糖缺氧/復(fù)氧組RTEC的凋亡率均明顯降低(P0.01)。正糖組和高糖組比較,干預(yù)24 h后,正糖組RTEC的總體凋亡率顯著低于高糖組(P=0.02)。(3)缺氧后,RTEC上清液的乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase,LDH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平明顯升高(P0.01),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平明顯降低(P0.01)。采用KSC條件培養(yǎng)液干預(yù)12 h和24 h后,與缺氧/復(fù)氧對照組相比,正糖缺氧/復(fù)氧組和高糖缺氧/復(fù)氧組的LDH和MDA水平均顯著降低(P0.01),SOD水平均顯著升高(P0.01)。正糖組和高糖組比較,高糖組的LDH和MDA水平要顯著高于正糖組(P0.05),SOD水平要顯著低于正糖組(P0.01)。結(jié)論:KSC條件培養(yǎng)液對缺氧損傷的RTEC有修復(fù)作用,這種作用主要是通過減少氧化應(yīng)激、抑制細(xì)胞凋亡來實(shí)現(xiàn)的,而經(jīng)高糖預(yù)處理的KSC條件培養(yǎng)液的抗氧化應(yīng)激、抗凋亡作用減弱。
[Abstract]:Aim: to evaluate the effect of high glucose on the repair of renal tubular epithelial cells (RTC) with renal stem cell stem cells (KSC) conditioned medium. Methods: KSCs were isolated from the renal papilla. The conditioned medium of KSC was pretreated with normal glucose concentration (5. 6 mmol / L) and high glucose concentration (30 mmol / L), respectively. A rat model of hypoxia / reoxygenation of RTEC was established to compare the effects of KSC conditioned medium stimulated by high glucose and normal glucose on the repair of hypoxia / reoxygenation RTEC. Results 1) hypoxia for 4 h / reoxygenation was the best time for RTEC hypoxia / reoxygenation model. After hypoxia, the early apoptosis rate and late apoptosis rate of RTEC were increased. After 12 h and 24 h intervention with KSC conditioned medium, compared with hypoxia / reoxygenation control group. The apoptosis rate of RTEC in hypoxia / reoxygenation group and high glucose hypoxia / reoxygenation group was significantly decreased. Compared with high glucose group, the total apoptotic rate of RTEC in normal glucose group was significantly lower than that in high glucose group after 24 h.) after hypoxia, the levels of lactic dehydrogenase (LDHs) and malondialdehyde (MDA) in supernatant were significantly increased, and superoxide dismutase (SOD) level was significantly decreased. Compared with hypoxia / reoxygenation control group, the levels of LDH and MDA in hypoxia / reoxygenation group and high glucose hypoxia / reoxygenation group were significantly lower than those in hypoxia / reoxygenation control group after 12 and 24 h intervention with KSC conditioned medium, and the levels of LDH and MDA in hypoxia / reoxygenation group were significantly higher than those in hypoxia / reoxygenation group. The levels of LDH and MDA in the high glucose group were significantly higher than those in the normal sugar group and the high glucose group. The level of LDH and MDA in the high glucose group was significantly lower than that in the normal sugar group. Conclusion the RTEC induced by hypoxia can be repaired by the solution of 1: KSC, which is mainly achieved by reducing oxidative stress and inhibiting cell apoptosis. However, the antioxidant stress of KSC conditioned medium pretreated with high glucose is weakened and the anti-apoptotic effect is weakened.
【作者單位】: 中國人民解放軍總醫(yī)院南樓臨床部腎臟病科腎臟疾病國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國人民解放軍總醫(yī)院南樓臨床部內(nèi)分泌科;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(30772296、81170312) 北京市自然科學(xué)基金(7122163)資助~~
【分類號】:R587.2;R692.9
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本文編號:1990934
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