本文選題：尿源干細(xì)胞 + 細(xì)胞療法�。� 參考：《第二軍醫(yī)大學(xué)》2014年博士論文

【摘要】：背景： 慢性腎病是一種可以導(dǎo)致尿毒癥和心血管系統(tǒng)并發(fā)癥的常見疾病，且發(fā)病率一直處于上升趨勢。全世界慢性腎病患者約占總?cè)丝诘?3%，使之成為一個重大的公共衛(wèi)生問題。我國慢性腎病的流行病學(xué)也不容樂觀，慢性腎病患者約占總?cè)丝诘?0.25%左右，且發(fā)病率逐年升高。慢性腎病為進(jìn)展性疾病，可發(fā)展至終末期腎病，給患者身體上及心理上造成巨大的創(chuàng)傷。與此同時，隨之而來的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)也十分沉重。2007年，僅美國的終末期腎病支出就高達(dá)230多億，占其全部醫(yī)療支出的5.8%。目前對于終末期腎病的治療手段仍十分有限，主要依賴透析和腎移植。透析成本高昂、并發(fā)癥多、且降低患者的生活質(zhì)量。此外，透析僅僅替代腎臟的濾過功能，而不能替代其內(nèi)分泌等功能。另一方面，供體的短缺嚴(yán)重制約了腎移植的開展，，且免疫排斥和免疫抑制藥物對患者造成的影響也難以解決。因此，臨床上需要新的治療慢性腎病的手段。 細(xì)胞療法近年來逐漸受到重視，尤其在干細(xì)胞方面，由于其強(qiáng)大的自我更新和多向分化能力，在各個研究領(lǐng)域均取得了長足的進(jìn)展。尿源干細(xì)胞是一種新的干細(xì)胞來源，屬于間充質(zhì)干細(xì)胞，可從新鮮尿液中獲取，其獲取手段無創(chuàng)，可反復(fù)收集從而得到大量的起始細(xì)胞。間充質(zhì)干細(xì)胞對腎功能有改善作用，而尿源干細(xì)胞最可能的來源是腎臟，組織來源上的優(yōu)勢使之可能對腎功能具備更明顯的改善作用。 研究目的： 研究尿源干細(xì)胞是否對慢性腎病具有治療作用，并初探其機(jī)制。 研究方法： 1.從健康供體新鮮尿液中提取尿源干細(xì)胞，通過自我更新能力、多向分化能力、表面標(biāo)志物情況對尿源干細(xì)胞進(jìn)行鑒定和確認(rèn)。 2.向裸小鼠腎臟中注射尿源干細(xì)胞，在注射細(xì)胞1周、2周、3周、4周后處死小鼠、收集腎臟，觀察尿源干細(xì)胞的分布情況，并通過觀察其表面標(biāo)志物的表達(dá)情況初探其分化為腎臟細(xì)胞的可能性。 3.實(shí)驗(yàn)動物分為3組，第一組為年齡匹配的正常對照，第二組為接受注射尿源干細(xì)胞的慢性腎病大鼠模型，第三組為注射磷酸鹽緩沖液的慢性腎病大鼠模型，通過對其血清肌酐、腎小球?yàn)V過率的隨訪判斷尿源干細(xì)胞對腎功能的改善作用，并對3組腎臟進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)的評估。 結(jié)果： 1.新鮮尿液中獲得的細(xì)胞克隆可自我更新，能夠分化成為脂肪細(xì)胞和骨細(xì)胞。尿源干細(xì)胞表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞的表面標(biāo)志物：CD24、CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD146等；不表達(dá)造血細(xì)胞表面抗原：CD31、CD34、CD45等。 2.尿源干細(xì)胞可以在腎臟組織內(nèi)存活，在有限的隨訪時間內(nèi)，顯微鏡下未發(fā)現(xiàn)與腎臟組織結(jié)構(gòu)的融合，且尿源干細(xì)胞始終表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞的表面抗原，分化的可能性較小。 3.尿源干細(xì)胞對腎功能具有改善作用，相較于注射磷酸鹽緩沖液的對照組，注射尿源干細(xì)胞的動物模型血清肌酐降低、腎小球?yàn)V過率升高。尿源干細(xì)胞對腎臟的組織學(xué)形態(tài)有改善作用，相較于注射磷酸鹽緩沖液的對照組，注射尿源干細(xì)胞的動物模型健康腎單元的數(shù)量增加、一型膠原和三型膠原數(shù)量減少、腎臟間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤減輕。 結(jié)論： 尿源干細(xì)胞可能對慢性腎病患者的腎功能有改善作用，可能成為無創(chuàng)的、自體的治療慢性腎病的新的細(xì)胞來源，其作用機(jī)制和優(yōu)化的治療手段仍需要進(jìn)一步的研究。
[Abstract]:Background :

Chronic kidney disease is a common disease that can lead to uremia and cardiovascular system complications . The incidence of chronic kidney disease in the world is increasing . The epidemiology of chronic kidney disease in China is about 10 . 25 % of the total population .

Cell therapy has been paid more and more attention in recent years , especially in stem cells , due to its strong self - renewal and multi - directional differentiation ability , it has made great progress in various research fields . The urine source stem cells are a new source of stem cells , which can be obtained from fresh urine , and can be collected repeatedly to obtain a large number of initial cells .

Purpose of study :

To study whether urine source stem cells have therapeutic effect on chronic kidney disease and explore its mechanism .

Study method :

1 . The urine source stem cells are extracted from fresh urine of healthy donors , and the urine source stem cells are identified and confirmed by self - updating capability , multi - directional differentiation ability and surface markers .

2 . To inject urine source stem cells into the kidney of nude mice . After 1 week , 2 weeks , 3 weeks and 4 weeks of injection , mice were sacrificed , the kidney was collected , the distribution of urine source stem cells was observed , and the possibility of differentiation into kidney cells was investigated by observing the expression of their surface markers .

3 . The experimental animals were divided into three groups , the first group is the normal control group matched with age , the second group is the rat model of chronic kidney disease receiving the injection urine source stem cell , the third group is the rat model of chronic kidney disease injected with phosphate buffer solution , and the function of improving the renal function of the urine source stem cell is judged by the follow - up of serum creatinine and glomerular filtration rate , and the three groups of kidneys are evaluated .

Results :

1 . The cell clones obtained in fresh urine can be self - updated to differentiate into adipocytes and osteocytes . Surface markers of mesenchymal stem cells expressed by urine derived stem cells : CD24 , CD29 , CD44 , CD73 , CD90 , CD105 , CD146 , etc . ;
Do not express hematopoietic cell surface antigen : CD31 , CD34 , CD45 , etc .

2 . The urine source stem cells can survive in the renal tissue , and in a limited follow - up time , there is no fusion with the kidney tissue structure under the microscope , and the urine source stem cells always express the surface antigen of the mesenchymal stem cells , and the possibility of differentiation is small .

3 . Urine derived stem cells have an improved effect on renal function . Compared with the control group injected with phosphate buffer solution , the serum creatinine of the animal model injected with urine source stem cells is decreased , and the glomerular filtration rate is increased . The number of healthy kidney cells in the animal model of the injected urine source stem cells is increased compared with the control group injected with phosphate buffer solution , the number of the type I collagen and the type III collagen is reduced , and the infiltration of the renal interstitial inflammatory cell is reduced .

Conclusion :

Urine derived stem cells may improve the renal function of patients with chronic kidney disease , and may be non - invasive , autologous therapy for chronic kidney disease . The mechanism of action and optimization of treatment still need further research .
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R692;R-332

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1941930