本文選題：血管活性腸肽 + 前列腺癌　； 參考：《青島大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：目的通過細胞培養(yǎng)、動物實驗等實驗方法,利用CCK-8、PCR、Westernblot、Transwell小室等技術(shù)手段,探討血管活性腸肽(VIP)在前列腺癌PC-3、DU145中增殖、血管生成、上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用機制。方法用濃度分別為0、25、50、100μmol/L的VIP處理PC-3、DU145前列腺癌細胞,CCK-8法檢測24、48、72h時PC-3細胞增殖能力的變化,PCR、Westernblot檢測PC-3細胞Cyclin D1、bcl-2、MMP-9 m RNA和蛋白的表達;構(gòu)建經(jīng)100nmol/l VIP處理的裸鼠PC-3模型,測量移植瘤的體積和VEGF m RNA及微血管密度的變化;劃痕實驗和Transwell小室檢測DU145細胞運動、遷移,PCR、Westernblot檢測DU145細胞中上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化的指標(biāo)E-cadherin、Vimentin、Snail m RNA和蛋白的變化。結(jié)果經(jīng)不同濃度VIP處理的PC-3細胞的增殖活力具有顯著差異,VIP的濃度越大,PC-3細胞的增殖活力越強,且具有時間差依賴性,異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均0.05);隨著VIP濃度的增大,Cyclin D1、bcl-2、MMP-9 m RNA及蛋白的表達增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。第8天及第15天經(jīng)100nmol/l VIP處理的實驗組PC-3裸鼠腫瘤中的體積、VEGFm RNA含量及MVD的數(shù)量要大于同期未經(jīng)VIP處理的對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。隨著VIP濃度的增大,劃痕實驗提示DU145運動能力增強,Transwell遷移、侵襲實驗顯示穿越小室的細胞個數(shù)也增多,E-cadherin m RNA和蛋白表達下降,Vimentin、Snail m RNA和蛋白表達增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論VIP通過CyclinD1促進細胞增殖、bcl-2減少細胞凋亡在激素非依賴性前列腺癌細胞的發(fā)生發(fā)展過程中起到促進腫瘤增生的作用;通過促使血管增生進而發(fā)揮其促使激素非依賴性前列腺癌細胞增殖的作用;通過促使細胞外基質(zhì)的降解和上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化來促進激素非依賴性前列腺癌細胞擴散和轉(zhuǎn)移的能力。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of angiogenesis, angiogenesis and epithelial-mesenchymal transformation in prostate cancer PC-3DU145 by means of cell culture and animal experiments. Methods PC-3DU145 prostate cancer cell line (PC-3DU145) was treated with VIP at the concentration of 0.25 渭 mol/L for 72 h. The proliferation of PC-3 cells was detected by Western blot. The expression of MMP-9 m RNA and protein in PC-3 cell line Cyclin D1bcl-2 was detected by Western blot, and the PC-3 model of nude mice treated with 100nmol/l VIP was established. The volume, VEGF m RNA and microvessel density of transplanted tumor were measured, and the movement of DU145 cells was detected by scratch test and Transwell chamber, and the changes of E-cadherin Vimentinnsnail RNA and protein in DU145 cells were detected by Western blot. Results the proliferative activity of PC-3 cells treated with different concentrations of VIP was significantly different. The larger the concentration of PC-3 was, the stronger the proliferative activity of PC-3 cells was, and the proliferation activity was time-dependent. With the increase of VIP concentration, the expression of MMP-9 m RNA and protein increased with the increase of VIP concentration, and the difference was statistically significant (P 0.05). On the 8th and 15th day, the volume of VEGFm RNA and the quantity of MVD in the PC-3 nude mice treated with 100nmol/l VIP were higher than those in the control group without VIP treatment at the same time, and the difference was statistically significant (P 0.05). With the increase of VIP concentration, the scratching test indicated that the mobility of DU145 increased and the number of cells passing through the cell increased, and the expression of E-cadherin m RNA and protein decreased. The difference was statistically significant (P 0.05). Conclusion VIP can promote the proliferation of human prostate cancer cells through CyclinD1 and decrease the apoptosis of BCL 2 cells during the development of steroid-independent prostate cancer cells. The proliferation of steroid independent prostate cancer cells was induced by angiogenesis. By promoting the degradation of extracellular matrix and epithelial-mesenchymal transformation, the ability of hormone independent prostate cancer cell proliferation and metastasis is promoted.
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.25

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本文編號：1877363