本文選題：下尿路 + 女性��； 參考：《第二軍醫(yī)大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：一、研究背景壓力性尿失禁(Stress Urinary Incontinence, SUI)是一種困擾著中老年女性的多發(fā)病,其特點(diǎn)為在腹壓突然增加時(shí)發(fā)生尿液經(jīng)尿道外口不自主地漏出。目前,陰道分娩被認(rèn)為是SUI最重要的病理生理學(xué)機(jī)制之一。臨床隨訪及動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn),陰道分娩過(guò)程中胎兒會(huì)對(duì)盆底肌肉、神經(jīng)及結(jié)締組織造成不同程度的損傷,并影響著產(chǎn)后SUI的發(fā)生。長(zhǎng)期臨床隨訪研究表明,在產(chǎn)后5-7年出現(xiàn)SUI的女性中,陰部神經(jīng)動(dòng)作電位潛伏期明顯延長(zhǎng),這意味著尿道外括約肌(External Urethral Sphincter, EUS)的神經(jīng)支配仍處于不完全恢復(fù)狀態(tài)。這一結(jié)果也進(jìn)一步得到了我們的前期研究的證實(shí),即當(dāng)雙重?fù)p傷SUI大鼠模型的EUS功能和尿道阻力已經(jīng)恢復(fù)至正常范圍時(shí),形態(tài)學(xué)研究仍可觀察到EUS的神經(jīng)支配處于異常狀態(tài)。上述結(jié)果均強(qiáng)調(diào)出了陰道分娩過(guò)程中與控尿相關(guān)神經(jīng)損傷的重要性,這也提示恢復(fù)這些神經(jīng)的功能可能將成為臨床治療的核心內(nèi)容。在促進(jìn)神經(jīng)的生長(zhǎng)、存活及損傷后的再生修復(fù)過(guò)程中,腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(Brain-derived Neruotrophic Factor, BDNF)發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用。此外,它還是一種參與下尿路神經(jīng)調(diào)控的重要神經(jīng)調(diào)制,它與多種下尿路功能障礙性疾病的病理生理學(xué)過(guò)程相關(guān),包括:膀胱過(guò)度活動(dòng)癥、SUI、間質(zhì)性膀胱炎/膀胱疼痛綜合征及神經(jīng)源性膀胱等。不僅如此,動(dòng)物模型研究也表明陰部神經(jīng)的損傷后修復(fù)需要BDNF的參與。因此,在本研究中我們選擇了 BDNF為切入點(diǎn)探索它對(duì)SUI大鼠模型控尿功能的影響。二、研究目的本研究旨為探索BDNF對(duì)雙重?fù)p傷SUI大鼠模型控尿功能的影響。其結(jié)果將進(jìn)一步解釋神經(jīng)源性異常在臨床SUI發(fā)生機(jī)制中的重要地位,并為開(kāi)發(fā)新的臨床治療方法提供理論依據(jù),同時(shí)也將為預(yù)防SUI的發(fā)生提供一種全新的思路。本研究包括以下3部分:第一部分:研究局部應(yīng)用外源性BDNF對(duì)SUI大鼠模型的陰部神經(jīng)進(jìn)行局部治療對(duì)其控尿功能及神經(jīng)恢復(fù)的影響。第二部分:探索短期單次陰部神經(jīng)運(yùn)動(dòng)支電刺激對(duì)大鼠陰部神經(jīng)核團(tuán)BDNF表達(dá)及其下尿路功能的影響。第三部分:探索長(zhǎng)時(shí)程周期性陰部神經(jīng)電刺激對(duì)BDNF表達(dá)及SUI大鼠模型控尿功能及神經(jīng)恢復(fù)的影響。三、研究設(shè)計(jì)第一部分:將93只雌性、年齡相近的SD大鼠隨機(jī)分為以下3組:SUI模型+BDNF治療組、SUI模型+生理鹽水治療組、假損傷模型+生理鹽水治療組。SUI模型的建立包括雙側(cè)陰部神經(jīng)損傷(Pudendal Nerve Crush, PNC)和持續(xù)4小時(shí)的陰道擴(kuò)張(Vaginal Distension, VD)。BDNF和生理鹽水的給予采用的是植入式mini-osmotic泵對(duì)雙側(cè)損傷的神經(jīng)進(jìn)行歷時(shí)2周或3周的局部治療。假損傷組除不進(jìn)行PNC和VD外,其余操作均與模型組相同。對(duì)上述的一部分大鼠將進(jìn)行漏尿點(diǎn)壓(Leak Point Pressure, LPP )與 EUS 肌電圖(Electromyography, EMG )的同步測(cè)定,完畢后收取EUS組織進(jìn)行神經(jīng)肌肉接頭的熒光染色形態(tài)學(xué)分析;另一部分動(dòng)物將分別于4天、8天和12天時(shí)通過(guò)定量PCR和免疫熒光的手段檢測(cè)BDNF和βⅡ微管蛋白的表達(dá)。組間差異分析將采用雙因素的方差分析合并Holm-Sidak事后多重比較,P0.05定義為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。第二部分:將46只雌性成年大鼠隨機(jī)分為2組:雙重?fù)p傷SUI大鼠模型組(n=23)和對(duì)照損傷假手術(shù)組(n=23),并即刻予以為期1小時(shí)的單側(cè)陰部神經(jīng)運(yùn)動(dòng)支電刺激(左側(cè)神經(jīng)電刺激,右側(cè)無(wú)電刺激)。完畢后,對(duì)一部分大鼠予以膀胱和肛門(mén)外括約肌的功能學(xué)測(cè)定;另一部分大鼠在接受電刺激治療后,于2天和1周時(shí),進(jìn)行雙側(cè)陰部神經(jīng)核團(tuán)內(nèi)BDNF和βⅡ微管蛋白的定量檢測(cè)。組間統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用的是兩因素的方差分析合并Student-Newman-Keuls事后多重比較。對(duì)于BDNF和βⅡ微管蛋白的定量數(shù)據(jù)相對(duì)量的比較采用的是單樣本t檢驗(yàn),P0.05表明有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。第三部分:將60只年齡、體重相仿的雌性SD大鼠隨機(jī)分為兩組:SUI模型組(n=34只)和對(duì)照損傷假手術(shù)組(n=26只),模型建立后立即予以雙側(cè)陰部神經(jīng)電極植入。隨后,將其中一部分大鼠隨機(jī)分為3組:SUI+雙側(cè)電刺激組、SUI+無(wú)電刺激組、假損傷+無(wú)電刺激組。兩周后,對(duì)各組的大鼠進(jìn)行膀胱功能與控尿功能的檢測(cè)。另一部分大鼠在雙側(cè)電極植入后即刻開(kāi)始對(duì)左側(cè)陰部神經(jīng)進(jìn)行歷時(shí)1小時(shí)的單側(cè)電刺激,而右側(cè)不予以電刺激作為對(duì)照,在2天、1周和2周時(shí),用定量PCR法檢分析陰部神經(jīng)核團(tuán)內(nèi)BDNF和βⅡ微管蛋白的基因表達(dá)量。對(duì)左右側(cè)Onuf's核團(tuán)內(nèi)BDNF與βⅡ微管蛋白mRNA表達(dá)的比較采用的是單樣本的t檢驗(yàn)。對(duì)雙側(cè)陰部神經(jīng)電刺激后的膀胱及控尿功能檢測(cè)指標(biāo)的組間比較采用的是雙因素的方差分析合并Student-Newman-Keuls事后多重比較的方法,P0.05代表有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。四、研究結(jié)果第一部分:局部予以BDNF治療不但可有助于大鼠控尿功能的早期恢復(fù),還可改善EUS和神經(jīng)肌肉接頭的組織學(xué)形態(tài)。不僅如此,BDNF局部治療可提高陰部神經(jīng)核團(tuán)內(nèi)BDNF與βⅡ微管蛋白mRNA的表達(dá)量。第二部分:短期單次陰部神經(jīng)運(yùn)動(dòng)支電刺激可顯著改善模型鼠的膀胱和肛門(mén)外括約肌功能,在給予電刺激的左側(cè)陰部神經(jīng)核團(tuán)內(nèi)BDNF與βⅡ微管蛋白mRNA的表達(dá)均較右側(cè)有顯著的提高。第三部分:長(zhǎng)時(shí)程周期性陰部神經(jīng)電刺激可顯著提升Onuf s核團(tuán)內(nèi)BDNF與βⅡ微管蛋白mRNA的表達(dá)量,并有助于模型鼠控尿功能的早期恢復(fù)。此外,雙側(cè)陰部神經(jīng)電刺激還有助于改善大鼠的膀胱和尿道功能。五、研究結(jié)論本課題通過(guò)局部運(yùn)用外源性BDNF治療及短期、長(zhǎng)期陰部神經(jīng)電刺激療法三部分表明BDNF對(duì)SUI大鼠模型的控尿功能起著重要的作用,這主要體現(xiàn)在它促進(jìn)了陰部神經(jīng)、LPP及EUS EMG的早期恢復(fù)。因此,調(diào)節(jié)BDNF的表達(dá)可為臨床SUI的治療及預(yù)防提供一條全新的思路,本研究結(jié)果也為這一臨床轉(zhuǎn)化研究提供了有力的證據(jù)支撐。
[Abstract]:涓，

本文編號(hào)：1876429