自噬相關(guān)基因在慢性非細菌性前列腺炎大鼠模型中的表達及意義
發(fā)布時間:2018-04-30 05:44
本文選題:自噬 + 慢性前列腺炎 ; 參考:《安徽醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文
【摘要】:目的通過探索自噬相關(guān)基因自噬微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(LC3)和Beclin-1在慢性非細菌性前列腺炎(CNP)大鼠模型中的異常表達及時序變化,探討自噬在慢性非細菌性前列腺炎中的可能作用。方法(1)取6只300 g左右的雄性SD大鼠,無菌條件下完整剪下前列腺組織,剪刀剪碎后放在玻璃勻漿器中勻漿,勻漿后于冷凍離心機離心,12 000 r/min,4℃,30 min,吸取上清液,BCA法稀釋蛋白提純液至40 g/L;(2)取3月齡雄性SD大鼠40只隨機分為正常對照組、2周CNP模型組、4周CNP模型組、6周CNP模型組,每組10只,CNP模型組采用前列腺抗原原位注射法,每只大鼠注射0.2ml前列腺蛋白提純液,對照組原位注射等量生理鹽水;(3)HE染色觀察各組前列腺組織炎性細胞浸潤情況;(4)采用免疫組化SABC法檢測各組前列腺組織中LC3、Beclin-1的表達情況;(5)采用Western blot法檢測各組前列腺組織中LC3-Ⅰ/Ⅱ的轉(zhuǎn)化水平和Beclin-1的表達情況;(6)運用SPSS 16.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析,計量資料采用(?)±s表示,多組間比較采用One-Way ANOVA分析,兩兩比較采用S NK-q檢驗,檢驗水準α=0.05。結(jié)果(1)成功提取前列腺蛋白提純液至濃度為40 g/L;(2)HE染色結(jié)果提示各模型組成功構(gòu)建大鼠慢性非細菌性前列腺炎,正常對照組未見明顯炎癥表現(xiàn)。6周模型組炎癥浸潤情況高于4周模型組和2周模型組;(3)免疫組化法檢測顯示各實驗組LC3、Beclin-1蛋白的表達均高于對照組并隨時間的推移表達量逐漸升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);(4)Western blot法檢測各模型組LC3-Ⅰ/Ⅱ的轉(zhuǎn)化水平均高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2周模型組和4周模型組LC3-Ⅰ/Ⅱ的轉(zhuǎn)化差異無統(tǒng)計學(xué)意義。6周模型組LC3-Ⅰ/Ⅱ的轉(zhuǎn)化水平高于2周模型組和4周模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論通過原位注射前列腺蛋白提純液能夠構(gòu)建出SD大鼠慢性非細菌性前列腺炎;自噬相關(guān)基因LC3和Beclin-1在慢性非細菌性前列腺炎大鼠模型的發(fā)病過程中高表達。
[Abstract]:Objective to explore the possible role of autophagy in chronic nonbacterial prostatitis by exploring the abnormal expression of autophagy microtubule-associated protein 1 (LC3) and Beclin-1 in chronic abacterial prostatitis in rats. Methods 1) six male SD rats (about 300g) were selected and the prostate tissue was cut off completely under sterile condition. The tissue was shredded by scissors and put into the homogenate of glass homogenate. The homogenate was centrifuged at 12 000 r / min 4 鈩,
本文編號:1823357
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