本文選題：膀胱癌 + H19��； 參考：《南京醫(yī)科大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：背景和目的：膀胱癌是世界上第九大最常見的癌癥,在2012年,全世界有429,793新發(fā)病例,并且有165,068人死于此病。它在男性中發(fā)病率是女性的3倍多,并且在所有男性癌癥中排行第六位。膀胱癌有不同的病理組織學(xué)形態(tài)及臨床表現(xiàn),因此,給膀胱癌的治療控制帶來了一些障礙。已經(jīng)證實(shí)長鏈非編碼RNA19(H19)能夠促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移。然而,對(duì)于H19的成熟產(chǎn)物——miR-675如何促進(jìn)膀胱癌的細(xì)胞增殖,我們還知之甚少。本研究的目的是研究miR-675在膀胱癌組織中的表達(dá)及探討其對(duì)腫瘤細(xì)胞細(xì)胞增殖的影響及可能的作用機(jī)制,為臨床膀胱的治療提供新的靶點(diǎn)。方弦：采用qRT-PCR技術(shù),研究了miR-675在膀胱癌組織、鄰近正常組織、健康人膀胱組織及膀胱癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況。接著,我們構(gòu)建了使H19過表達(dá)的pcDNA-H19質(zhì)粒并設(shè)計(jì)了使H19敲除的H19-siRNA,轉(zhuǎn)染到253J細(xì)胞中,通過細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)和qRT-PCR方法研究了H19的表達(dá)對(duì)膀胱癌細(xì)胞增殖和miR-675表達(dá)的影響。針對(duì)miR-675做了進(jìn)一步的研究,我們分別將miR-675類似物、miR-675抑制劑和陰性對(duì)照轉(zhuǎn)染到253J細(xì)胞和RT4細(xì)胞中,通過細(xì)胞增殖檢測(cè)、細(xì)胞凋亡檢測(cè)和細(xì)胞周期檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)研究miR-675對(duì)膀胱癌253J細(xì)胞和RT4細(xì)胞增殖、凋亡以及周期等細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。最后,將miR-675類似物、miR-675抑制劑和陰性對(duì)照轉(zhuǎn)染到253J細(xì)胞后,通過western blotting方法,探討了miR-675對(duì)凋亡相關(guān)蛋白p53. Bcl-2和Bax以及周期相關(guān)蛋白cyclin D1的作用從而影響膀胱癌細(xì)胞增殖的作用機(jī)制。結(jié)果：(1)qRT-PCR結(jié)果顯示,在大多數(shù)膀胱癌組織中,miR-675的表達(dá)是顯著性上調(diào)的(p0.0001,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義),然而,在非膀胱癌患者的膀胱組織中沒有看到類似的現(xiàn)象。同時(shí),我們對(duì)膀胱癌患者進(jìn)行了分類統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),膀胱癌組織中miR-675的表達(dá)與癌癥分期(p0.0001)和分級(jí)(p0.0001)有關(guān),而與年齡及性別無關(guān)。此外,在一些膀胱癌細(xì)胞系(RT4、HT-1376、5637、253 J, TCCSUP、T24和J82)中也觀察到了miR-675的表達(dá)上調(diào)。(2)H19的異常表達(dá)導(dǎo)致miR-675的表達(dá)顯著性上調(diào),并且增加了253J細(xì)胞和RT4細(xì)胞的細(xì)胞增殖。此外,用H19-siRNA處理兩種細(xì)胞使miR-675的表達(dá)水平下降,并抑制了253J細(xì)胞的細(xì)胞增殖。(3)在將miR-675類似物或抑制劑轉(zhuǎn)染到253J細(xì)胞后,miR-675的表達(dá)顯著性上升或下降,更重要的是,miR-675過表達(dá)增強(qiáng)了253J細(xì)胞和RT4細(xì)胞的細(xì)胞增殖,然而,miR-675抑制劑在細(xì)胞增殖上起著明顯的抑制作用。(4)通過用miR-675類似物處理253J細(xì)胞RT4細(xì)胞時(shí)發(fā)現(xiàn),處于S期的細(xì)胞明顯增加,而處于G0/G1期的細(xì)胞明顯減少。并且,miR-675抑制劑顯著性促進(jìn)了膀胱癌細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。(5)miR-675顯著性減少了p53的表達(dá),也減少了p21的表達(dá),此外,miR-675增強(qiáng)了cyclin D1的表達(dá)。miR-675類似物明顯下調(diào)了Bax/Bcl-2的比率,而miR-675抑制劑明顯增強(qiáng)了Bax/Bcl-2的比率。結(jié)論：與正常對(duì)照相比,miR-675的表達(dá)在膀胱癌組織中是顯著增加的。H19正向調(diào)節(jié)miR-675的表達(dá),并且,miR-675的過表達(dá)增加了人膀胱癌細(xì)胞的細(xì)胞增殖。我們進(jìn)一步證實(shí)miR-675誘導(dǎo)了G1期阻滯并抑制了細(xì)胞凋亡,這可能是依靠它對(duì)p53表達(dá)的負(fù)向調(diào)節(jié)作用�？傊�,我們的結(jié)果表明miR-675在膀胱癌的分子病因?qū)W上起著重要的作用,并強(qiáng)調(diào)miR-675在膀胱癌治療上的潛在應(yīng)用價(jià)值。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.14

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 青云;英國科學(xué)家辨別出與膀胱癌有關(guān)的基因[J];中國處方藥;2004年08期

2 ;特殊激素可導(dǎo)致男性患膀胱癌幾率升高[J];中國社區(qū)醫(yī)師(綜合版);2007年11期

3 肖建利;張麗芳;劉巧莉;;白花蛇舌草治療膀胱癌1例[J];臨床合理用藥雜志;2009年08期

4 丁虹彬，，余雪軒;培養(yǎng)膀胱癌細(xì)胞的新方法[J];南京醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1994年01期

5 張曉峰;劉訓(xùn)勤;;一種新型膀胱癌快速診斷裝置[J];醫(yī)療衛(wèi)生裝備;2013年10期

6 孫宏志,凡杰,唐孝達(dá);自穩(wěn)定反義IGF1R基因片段對(duì)膀胱癌細(xì)胞的影響[J];中華泌尿外科雜志;2000年05期

7 章小平,楊紅枚,魯功成;膀胱癌穩(wěn)定表達(dá)多藥耐受相關(guān)蛋白亞克隆的生物學(xué)特征[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2000年03期

8 漆少廷,徐錫坤,王心如;膀胱癌的分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).泌尿系統(tǒng)分冊(cè);2000年04期

9 章小平,楊紅枚,魯功成;流式細(xì)胞儀在膀胱癌多藥耐受研究中的應(yīng)用[J];臨床泌尿外科雜志;2000年09期

10 楊莉,汪少娟,楊業(yè)金,陳忠,吳燕麗;抗腫瘤藥對(duì)膀胱癌細(xì)胞產(chǎn)生的免疫抑制因子作用的影響[J];藥物流行病學(xué)雜志;2000年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 張永春;谷江;孫發(fā);石家齊;;傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)在膀胱癌治療中的意義[A];2010年貴州省泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

2 潘春武;沈周俊;唐小瑩;王e

本文編號(hào)：1732626