本文選題：胰島素　切入點：良性前列腺增生　出處：《山西醫(yī)科大學》2016年博士論文

【摘要】：良性前列腺增生癥(benign prostatic hyperplasia,BPH)作為泌尿外科最常見的疾病,已成為發(fā)病率逐年快速攀升的十大老年慢性疾病之一。而以糖尿病為代表的“代謝綜合征”亦是嚴重危害人類健康的重大慢性疾病。雖近年國內(nèi)外已有兩者關聯(lián)性的相關臨床研究,但兩者發(fā)病機制的相關性仍有待進一步探索。本研究旨在就糖尿病對良性前列腺增生組織形態(tài)及生物學特性的影響及其機制進行探討。分為以下兩個部分：第一部分糖尿病大鼠良性前列腺增生模型的建立及前列腺組織中雙氫睪酮(DHT)結合容量、5α還原酶活性檢測實驗一糖尿病大鼠良性前列腺增生動物模型的建立及各組血糖、胰島素抵抗指數(shù)、前列腺濕重/體重值、組織病理學的比較目的：通過建立1型(胰島素絕對缺乏)糖尿病及2型(胰島素抵抗)糖尿病大鼠模型并誘導其發(fā)生BPH,通過比較各組間血糖水平、胰島素抵抗指數(shù)、前列腺濕重/體重值,從糖尿病通用評估指標以及器官形態(tài)學角度觀察糖尿病對前列腺組織的影響。方法：常規(guī)飼養(yǎng)6-8周性成熟雄性Wistar大鼠,隨機分為正常組、單純良性前列腺增生組(單純BPH組)、鏈脲佐菌素(STZ)誘導的1型糖尿病合并良性前列腺增生組(STZ+BPH組)；同時使用6-8周齡自發(fā)型非肥胖型2型糖尿病Wistar大鼠(GK rat)并隨機分為前列腺增生組(GK+BPH組)、前列腺增生鹽酸吡格列酮血糖干預組(GK+BPH+PH組)。檢測各組大鼠體重、前列腺濕重、空腹血糖水平及ELISA法檢測各組大鼠空腹血清胰島素；前列腺組織石蠟包埋切片,HE染色觀察前列腺增生情況。結果：(1)與正常組相比,單純BPH組、STZ+BPH組、GK+BPH組、GK+BPH+PH組前列腺濕重/體重值明顯增加,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；(2)與單純BPH組相比,GK+BPH組、GK+BPH+PH組前列腺濕重/體重值明顯增加,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；(3)與單純BPH組相比,STZ+BPH組前列腺濕重/體重值變化無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)；(4)與GK+BPH組相比,GK+BPH+PH組前列腺濕重/體重值明顯減小,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；(5)與正常組相比,GK+BPH組、GK+BPH+PH組胰島素抵抗指數(shù)明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),單純BPH組、STZ+BPH組胰島素抵抗指數(shù)差異不明顯,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)；(6)與GK+BPH組相比,GK+BPH+PH組胰島素抵抗指數(shù)下降,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；(7)血清空腹胰島水平與前列腺濕重/體重值呈正相關；(8)與正常大鼠前列腺組織相比,單純BPH組大鼠前列腺腺腔擴張,腺上皮細胞成簇或乳頭狀增生,腺體周圍有淋巴細胞浸潤；(9)1型糖尿病合并BPH大鼠前列腺組織學改變類似于單純BPH組大鼠前列腺；(10)與單純BPH組大鼠相比,2型糖尿病合并BPH前列腺腺腔擴張明顯增大,腺上皮增生明顯加重,間質(zhì)增生明顯,其中可見大量炎細胞浸潤；(11)2型糖尿病合并BPH鹽酸吡格列酮血糖干預組大鼠前列腺組織學改變明顯較2型糖尿病合并BPH組大鼠減輕,但上述改變較單純BPH組大鼠仍明顯加重。結論：2型糖尿病伴高胰島素血癥BPH大鼠模型中可見其前列腺濕重／體重值明顯高于正常組及單純BPH組,且應用胰島素增敏劑干預后前列腺濕重／體重值較未干預組明顯減�。谎蹇崭挂葝u素水平與前列腺濕重/體重值呈正相關；1型糖尿病胰島素絕對缺乏伴BPH大鼠模型中,其前列腺濕重/體重值與單純BPH組差異無統(tǒng)計學意義。因此,2型糖尿病大鼠高胰島素血癥可能是促進BPH進展的因素之一實驗二糖尿病伴前列腺增生大鼠前列腺組織中雙氫睪酮(DHT)結合容量及5α還原酶活性測定目的：檢測各組大鼠前列腺組織中DHT結合容量及5α還原酶活性,從生化演變及酶學角度探討糖尿病對BPH病理生理學進展的影響。方法：常規(guī)飼養(yǎng)6-8周性成熟雄性Wistar大鼠,隨機分為正常組、單純良性前列腺增生組(單純BPH組)、鏈脲佐菌素(STZ)誘導的1型糖尿病良性前列腺增生組(STZ+BPH組)；同時采用6-8周齡自發(fā)型2型非肥胖型糖尿病Wistar大鼠(GK rat)并隨即分為前列腺增生組(GK+BPH組)、前列腺增生鹽酸吡格列酮血糖干預組(GK+BPH+PH組)。乙醚抽提內(nèi)源性性激素后使用雙氫睪酮(DHT)與樣本結合,用ELISA檢測組織結合的DHT,計算各組DHT結合容量；乙醚抽提內(nèi)源性性激素后,在前列腺組織蛋白提取物中加入睪酮作為底物并以NADPH作為供氫體,反應后采用ELISA法測定DHT含量計算得出5α還原酶活性。結果：(1)與正常組大鼠相比,單純BPH組、GK+BPH組、GK+BP+HPH組、STZ+BPH組大鼠DHT結合容量明顯增高(P＜0.05)；(2)與單純BPH組大鼠相比,GK+BPH組、GK+BPH+PH組大鼠DHT結合容量增高(P＜0.05),而STZ+BPH組大鼠DHT結合容量差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；(3)與GK+BPH組大鼠相比,GK+BPH+PH組、STZ+BPH組大鼠DHT結合容量減低(P0.05)；(4)與GK+BPH+PH組相比,STZ+BPH組大鼠DHT結合容量減少(P0.05)；(5)與正常組相比,單純BPH組、GK+BPH組、GK+BPH+PH組、STZ+BPH組Ⅰ、Ⅱ型5α還原酶活性均增高(P0.05)；(6)與單純BPH組相比,GK+BPH組、GK+BPH+PH組、STZ+BPH組的Ⅰ型5α還原酶活性差異無統(tǒng)計學差異(P0.05),Ⅱ型5α還原酶活性增高(P0.05)；(7)與GK+BPH組相比,GK+BPH+PH組Ⅰ型5α還原酶活性差異無統(tǒng)計學差異(P0.05),Ⅱ型5α還原酶活性減低(P0.05),STZ+BPH組Ⅰ型、Ⅱ型5α還原酶活性差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)；(8)與GK+BPH+PH組相比,STZ+BPH組Ⅰ型5α還原酶活性差異無統(tǒng)計學差異(P0.05),Ⅱ型5α還原酶活性減低(P0.05)；(9)血清空腹胰島素水平與DHT結合容量及Ⅱ型5α還原酶活性呈正相關。結論：1型糖尿病BPH大鼠前列腺組織中DHT結合容量及Ⅰ、Ⅱ型5α還原酶活性高于正常組,與單純BPH組差異不明顯；2型糖尿病伴高胰島素血癥BPH大鼠前列腺組織中DHT結合容量及Ⅱ型5α還原酶活性高于正常組及單純BPH組,Ⅰ型5α還原酶活性高于正常組而與單純BPH組差異無統(tǒng)計學意義；大鼠空腹血清胰島素水平與DHT結合容量及Ⅱ型5α還原酶活性呈正相關。第二部分IL-17介導TGF-p/Smad信號通路在糖尿病伴良性前列腺增生癥大鼠前列腺組織纖維化中的作用目的：在1型糖尿病伴BPH大鼠(STZ+BPH)及2型糖尿病伴BPH大鼠(GK+BPH)模型中檢測前列腺組織中IL-17及a-SMA表達情況,從信號轉(zhuǎn)導通路研究角度闡述糖尿病對BPH組織形態(tài)學演變的影響,并探討其可能的機制。方法：常規(guī)飼養(yǎng)6-8周性成熟雄性Wistar大鼠,隨機分為正常組、單純良性前列腺增生組(單純BPH組)、鏈脲佐菌素(STZ)誘導的1型糖尿病大鼠合并良性前列腺增生組(STZ+BPH組)；同時采用6-8周齡自發(fā)型2型糖尿病非肥胖型雄性Wistar大鼠(GK rats)并隨即分為前列腺增生組(GK+BPH組)、前列腺增生鹽酸吡格列酮血糖干預組(GK+BPH+PH組)。自大鼠前列腺組織中提取RNA,采取熒光定量PCR法檢測前列腺中IL-17、α-SMA mRNA表達；western blotting檢測α-SMA蛋白表達。結果：(1)前列腺組織中IL-17 mRNA熒光定量PCR結果示,與正常組相比,單純BPH組、GK+BPH組、GK+BPH+PH組、STZ+BPH組表達均增高,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；(2)前列腺組織中IL-17 mRNA熒光定量PCR結果示,與單純BPH組相比,GK+BPH組、GK+BPH+PH組、STZ+BPH組表達均增高,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；(3)前列腺組織中IL-17 mRNA熒光定量PCR結果示,與GK+BPH組相比,GK+BPH+PH組、STZ+BPH組表達均降低,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；(4)前列腺組織中IL-17 mRNA熒光定量PCR結果示,與GK+BPH+PH組相比,STZ+BPH組表達降低,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；(5)前列腺組織中a-SMA mRNA熒光定量PCR結果示,與正常組相比,單純BPH組、GK+BPH組、GK+BPH+PH組、STZ+BPH組表達均增高,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；(6)前列腺組織中a-SMA mRNA熒光定量PCR結果示,與單純BPH組相比,GK+BPH組、GK+BPH+PH組、STZ+BPH組表達均增高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；(7)前列腺組織中a-SMA mRNA熒光定量PCR結果示,與GK+BPH組相比,GK+BPH+PH組、STZ+BPH組表達均降低,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；(8)前列腺組織中a-SMA mRNA熒光定量PCR結果示,與GK+BPH+PH組相比,STZ+BPH組表達降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；(9)前列腺組織中a-SMA western blotting檢測,與正常組相比,單純BPH組、GK+BPH組、GK+BPH+PH組、STZ+BPH組表達均增高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；(10)前列腺組織中a-SMA western blotting檢測,與單純BPH組相比,GK+BPH組、GK+BPH+PH組、STZ+BPH組表達均增高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；(11)前列腺組織中a-SMA western blotting檢測,與GK+BPH組相比,GK+BPH+PH組、STZ+BPH組表達均降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；(12)前列腺組織中a-SMA western blotting檢測,與GK+BPH+PH組相比,STZ+BPH組表達降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；(13)大鼠血清空腹胰島素水平與其前列腺組織中IL-17及α-SMA mRNA、α-SMA蛋白表達水平呈正相關。結論：在大鼠前列腺組織中,單純BPH組大鼠其前列腺中IL-17及α-SMA mRNA、 α-SMA蛋白表達明顯較正常組大鼠升高,當2型糖尿病大鼠伴發(fā)BPH時,其前列腺中IL-17及α-SMA mRNA、α-SMA蛋白表達較單純BPH大鼠增高。因此推論,2型糖尿病伴BPH大鼠模型中,IL-17可通過TGF-β/Smad信號通路激活α-SMA蛋白表達,促進前列腺間質(zhì)纖維化。
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【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2;R697.3
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本文編號：1715375