自制免疫磁珠在前列腺腫瘤組織干細胞提取中的應(yīng)用
本文選題:腫瘤干細胞 切入點:免疫磁化分離 出處:《中國組織工程研究》2016年01期
【摘要】:背景:有效分離干細胞是前列腺癌發(fā)生發(fā)展研究的基礎(chǔ),目前的主流方法是免疫磁珠分選。目的:應(yīng)用自制的免疫磁珠分選前列腺腫瘤組織中的CD133~+/CD44~+細胞,并進一步培養(yǎng)和傳代進行免疫學(xué)鑒定,以確定免疫磁珠分選效果。方法:應(yīng)用獨創(chuàng)的磁珠制備免疫磁珠,分選腫瘤組織中細胞膜表達CD133和CD44的細胞。觀察分選細胞無血清培養(yǎng)成球情況,及傳代后其在形態(tài)學(xué)、增殖能力方面與標準腫瘤細胞株的差異,并用免疫熒光法檢測其特異性抗體的表達。結(jié)果與結(jié)論:制備的免疫磁珠粒徑小、分選效果佳。分選的細胞成球效果好,培養(yǎng)傳代后的細胞依舊明顯表達CD133和CD44抗原。分選的細胞非誘導(dǎo)培養(yǎng)后可見多種形態(tài),生長旺盛。轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)培養(yǎng)后細胞形態(tài)較單一且生長緩慢。兩組細胞與標準腫瘤細胞株培養(yǎng)后的增殖情況差異均有顯著性意義(P0.05)。結(jié)果表明應(yīng)用自制免疫磁珠從腫瘤細胞中分選的CD133~+/CD44~+細胞經(jīng)過初步形態(tài)及功能鑒定具有干細胞的特性,可為前列腺癌干細胞的提取及進一步培養(yǎng)研究奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Background: the effective isolation of stem cells is the basis of prostate cancer development, and the main method is immunomagnetic bead sorting. Objective: to separate CD133- / CD44~ cells from prostate cancer tissue by self-made immunomagnetic beads. In order to determine the separation effect of immunomagnetic beads, the immunomagnetic beads were prepared by using the original magnetic beads. The cell membrane expressing CD133 and CD44 in tumor tissue was selected. The granulation of the cells without serum was observed, and the morphological and proliferative abilities of the cells were compared with those of the standard tumor cell line after passage. Results and conclusion: the prepared immunomagnetic beads have small particle size and good sorting effect. The cultured cells still expressed CD133 and CD44 antigens. After induction of transforming growth factor 尾 (TGF- 尾), the cell morphology was simpler and slower. There were significant differences in proliferation between the two groups and standard tumor cell lines. The results showed that self-made immunity was used. The CD133- / CD44~ cells separated by magnetic beads from tumor cells were identified as stem cells by preliminary morphology and function. It can lay a foundation for the extraction and further culture of prostate cancer stem cells.
【作者單位】: 天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院藥學(xué)部;天津市兒童醫(yī)院檢驗科;天津大學(xué)藥物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院泌尿外科天津市泌尿外科研究所;
【基金】:天津市衛(wèi)生和計劃生育委員會科技基金(2014KZ093)~~
【分類號】:R737.25
【共引文獻】
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,本文編號:1668168
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