本文選題：高壓氧　切入點(diǎn)：缺血再灌注損傷　出處：《遵義醫(yī)學(xué)院》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的：通過構(gòu)建同系大鼠腎移植缺血再灌注損傷(ischemia-reperfusion injury，IRI)模型，觀察吲哚胺2,3-雙加氧酶（indoleamine2,3-dioxygenase，IDO）基因和白細(xì)胞介素-8(interleukin-8，IL-8)在移植腎組織和血中的表達(dá)變化以及高壓氧(hyperbaric oxygenation，HBO)治療對(duì)其表達(dá)的影響，，進(jìn)一步探討腎IRI的發(fā)生機(jī)制以及HBO對(duì)腎IRI的治療機(jī)制。 方法：SPF級(jí)雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、腎移植組以及腎移植+HBO治療組(HBO治療組)，每組又分為1h、3h和5h組。腎移植組單純行腎移植手術(shù)，HBO治療組將腎移植后的大鼠分別于再灌注后0h、2h和4h置于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)氧艙內(nèi)行HBO治療1h，假手術(shù)組僅切除右腎，不做腎移植手術(shù)。腎移植后1h、3h和5h時(shí)，腎移植組和HBO治療組取移植腎組織和血標(biāo)本，假手術(shù)組則于相應(yīng)時(shí)點(diǎn)取左腎組織和血標(biāo)本。采用HE染色觀察腎組織的病理改變，采用免疫組織化學(xué)法、激光共聚焦掃描熒光顯微鏡(laser scanning confocalfluorescence microscope，LCFM)以及實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real time PCR)檢測(cè)IDOmRNA和蛋白的表達(dá)，采用生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)檢測(cè)血中IL-8的含量，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清肌酐(serum creatinine，SCr)含量。 結(jié)果： 1.腎組織病理變化：假手術(shù)組腎組織結(jié)構(gòu)正常。腎移植組在1h時(shí)，可見腎間質(zhì)血管輕度擴(kuò)張充血，腎小球伴輕度增大，系膜細(xì)胞輕度增生，腎小管上皮細(xì)胞輕度腫脹并管腔輕度擴(kuò)張；在3h時(shí)，可見腎小管上皮細(xì)胞腫脹，呈顆粒樣變性；在5h時(shí)，可見腎小球體積增大，伴少量中性粒細(xì)胞浸潤，腎小管管腔擴(kuò)張，可見蛋白管型和紅細(xì)胞管型，上皮細(xì)胞明顯腫脹，呈顆粒樣變性。HBO治療組：在1h和3h時(shí)，鏡下改變與腎移植組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)無顯著差別；在5h時(shí)仍見腎小球體積增大，但僅有極少量中性粒細(xì)胞浸潤，腎小管上皮細(xì)胞腫脹和小管擴(kuò)張減輕，蛋白和紅細(xì)胞管型減少。 2.腎功能改變：在1h、3h和5h各時(shí)間點(diǎn)，與假手術(shù)組比較，腎移植組和HBO治療組SCr值均顯著增高（P0.05）；與腎移植組比較，HBO治療組SCr值在1h、3h時(shí)無明顯差異（P0.05），但在5h時(shí)SCr值則明顯降低（P0.05）。在同一組內(nèi)，假手術(shù)組在1h、3h、5h組SCr值無明顯差異（P0.05），腎移植組在1h、3h、5h組SCr值隨時(shí)間延長，逐步顯著增高（P0.05）；HBO治療組3h和5h組與1h組比較SCr值顯著增高（P0.05），3h組和5h組之間SCr值則無明顯差異（P0.05）。 3.血清中炎癥因子IL-8的變化：在1h、3h及5h各時(shí)間點(diǎn)與假手術(shù)組比較，腎移植組IL-8水平顯著增高(P0.05)；HBO治療組在1h、3h時(shí)IL-8水平仍顯著高于假手術(shù)組(P0.05)，但在5h時(shí)IL-8水平則無明顯差異(P0.05)；HBO治療組與腎移植組比較，在1h時(shí)IL-8水平無明顯差異，而在3h、5h時(shí)IL-8水平則顯著低于單純腎移植組(P0.05)。 4.腎組織IDO基因的表達(dá)變化 (1)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腎組織IDO表達(dá)：結(jié)果顯示IDO主要表達(dá)于腎小管，腎小球無表達(dá)，并對(duì)各組IDO表達(dá)進(jìn)行相對(duì)定量分析(積分光密度)。在1h時(shí)三組IDO表達(dá)的積分光密度值無顯著差異；在3h時(shí)腎移植組IDO積分光密度值與假手術(shù)組也無顯著差異，在5h時(shí)則明顯增高(P0.05)；HBO治療組IDO積分光密度值在3h、5h時(shí)明顯低于腎移植組(P0.05)。 (2)激光共聚焦掃描熒光顯微鏡檢測(cè)腎組織IDO表達(dá)：發(fā)現(xiàn)綠色熒光蛋白(green fluorescentprotein，GFP)-IDO光點(diǎn)主要分布于腎小管上皮細(xì)胞。 (3)腎組織IDOmRNA的表達(dá)變化：在1h時(shí)間點(diǎn)，三組IDOmRNA表達(dá)水平無顯著差異；與假手術(shù)組相比，腎移植組IDOmRNA表達(dá)水平在3h時(shí)無顯著差異，而在5h時(shí)則明顯增高(P0.05)；HBO治療組IDOmRNA表達(dá)水平在3h、5h時(shí)明顯低于腎移植組(P0.05)，但與假手術(shù)組無顯著差異。 結(jié)論： 1.腎移植再灌注后早期便出現(xiàn)了明顯的炎癥反應(yīng)，炎癥因子IL-8的大量產(chǎn)生可加重腎缺血再灌注損傷。 2.腎移植后隨著再灌注時(shí)間的延長，腎組織IDO的過表達(dá)可能是腎臟缺血再灌注損傷加重的重要機(jī)制之一。 3.高壓氧治療在移植腎缺血再灌注后明顯抑制了腎組織IDO的表達(dá)及炎癥因子的產(chǎn)生，保護(hù)了腎功能。對(duì)腎組織IDO基因表達(dá)的抑制作用是高壓氧防治腎缺血再灌注損傷的又一重要分子機(jī)制。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R699.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1635127