本文選題：糖尿病腎病　切入點：db/db小鼠　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學院》2015年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：研究背景：糖尿病腎病(diabetic kidney disease, DKD),是糖尿病最嚴重的并發(fā)癥之一,隨著糖尿病發(fā)病率不斷升高,DKD越來越成為終末期腎病的一個重要病因。目前認為DKD是多因素疾病,受代謝、炎癥、內(nèi)皮功能等多方面影響。內(nèi)臟脂肪素(visfatin, VF)是近些年新發(fā)現(xiàn)的一種脂肪細胞因子,又稱前B細胞集落增強因子(pre-B-cell colony enhancing factor, PBEF)和尼克酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(nicotinamide phosphoribos yltransferase, Nampt)。VF的生物學功能復雜,與脂質(zhì)和能量代謝、炎癥反應密切相關。目前研究已表明,在2型糖尿病、代謝綜合征及多種急慢性炎性疾病患者中,血漿VF水平增加,提示VF可能在DKD發(fā)病機制中具有重要作用,對VF生理功能的深入研究可能為DKD的治療提供新方向。研究目的：觀察DKD動物模型db/db小鼠的代謝狀況,評價腎臟損害及VF等脂肪因子在db/db小鼠腎臟的表達,通過抑制炎癥反應來了解倍半萜內(nèi)酯(parthenolide, PTN)是否可以影響VF的表達,以探討VF與DKD的關系及其在DKD發(fā)病機制中的可能作用。研究方法：選用瘦素受體缺陷的2型糖尿病db/db小鼠及其雜合子db/m小鼠,在8周齡時獲取基礎數(shù)據(jù),包括測量體重,留取血尿及腎組織,同時將小鼠分為對照組db/m組,實驗組db/db組,以及干預組db/db+PTN組。在小鼠8周齡、12周齡、16周齡、20周齡時分批處死,留取血、24小時尿、腎組織。測定血中代謝指標,包括血糖、血脂、胰島素、胰島素抵抗指數(shù)(homeostasis model assessment-insulin resistance, HOMA-IR);脂肪因子VF、抵抗素、視黃醇結(jié)合蛋白4(retinol binding protein 4, RBP4);腎臟損害指標,包括血肌酐、尿白蛋白、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-glucosaminidase, NAG)、尿鈉排泄分數(shù)等；通過免疫組織化學染色方法觀察腎組織VF,免疫印跡觀察腎組織VF、抵抗素的表達情況。實驗結(jié)果：1、與同周齡db/m+NS組小鼠比較,DKD動物模型db/db小鼠的體重、血糖、血總膽固醇(total cholesterol, TC)、HOMA-IR、血抵抗素在各個時間點(8、12、16、20周齡)顯著高于對照(p0.05)；血甘油三酯(triglyceride,TG)在8周齡尤其明顯(p0.05)；血胰島素在8、12、16周齡顯著高于對照(p0.05)；血VF在各個時間點均高于對照,并在8周齡和12周齡有統(tǒng)計學差異(p0.05)；血RBP4在16、20周齡高于對照,并在20周齡有統(tǒng)計學差異(p0.05)。經(jīng)PTN干預后,與同周齡db/db+NS小鼠比較,db/db+PTN組小鼠的體重、血糖、TG、血VF無明顯變化；TC在12周齡明顯下降(p0.05)；血胰島素水平在12、16、20周齡有下降趨勢；HOMA-IR在12、16周齡有下降趨勢,并在16周齡有統(tǒng)計學差異(p0.05)；血抵抗素水平在各個時間點(8、12、16、20周齡)有下降趨勢；血RBP4在16、20周齡較有下降的趨勢,并在20周齡有統(tǒng)計學差異(p0.05)。2、與同周齡db/m+NS組小鼠比較,db/db小鼠的尿量在各個時間點(8、12、16、20周齡)有增加的趨勢；尿白蛋白濃度及24小時尿白蛋白水平在各個時間點(8、12、16、20周齡)均有不同程度的增加,并在8、16、20周齡有統(tǒng)計學差異(p0.05)；血肌酐無明顯變化；尿NAG、尿鈉排泄分數(shù)在16、20周齡有增加的趨勢。經(jīng)PTN干預后,與同周齡db/db+NS小鼠比較,db/db+PTN組小鼠的尿量、血肌酐、NAG無明顯變化；尿白蛋白濃度及24小時尿白蛋白水平在12周齡有下降趨勢；尿鈉排泄分數(shù)在16、20周齡有下降趨勢。3、VF在各組小鼠的腎小球及小管間質(zhì)中均有分布,主要分布在近端小管上皮細胞的胞漿內(nèi),其表達不隨周齡增長而改變。db/db組小鼠與同周齡db/m組小鼠相比腎臟VF表達增加(免疫組化陽性染色面積率：8w:2.216±1.036 vs 8.968±5.493 vs, p0.05；12w:4.138±3.001 vs 8.333±3.097；16w:2.122±1.106 vs 6.377± 2.459,p0.05；20w 2.419±2.871 vs 4.502±1.386.免疫印跡相對光密度值：8w:1.000±0.150 vs 1.221±0.045,p0.05；12w:1.107±0.126 vs 1.239± 0.066:16w:0.973±0.072 vs 1.157±0.06l,p0.05；20w:1.097±0.185 vs 1.157 ±0.339).經(jīng)PTN干預后,db/db+PTN組小鼠腎臟VF表達與同周齡db/db+NS組小鼠相比無明顯變化(免疫組化陽性染色面積率：8w:8.968±5.493 vs 8.765±4.983: 12w:8.333±3.097 vs 8.279±4.100:16w:6.377±2.459 vs 6.923±2.176；20w 4.502±1.386 vs 4.071±1.261.免疫印跡相對光密度值：8w:1.221±0.045 vs 1.240±0.085；12w:1.239±0.066 vs 1.398±0.308；16w:1.157±0.061 vs 1.164 ±0.188；20w:1.157±0.339 vs 1.166±0.254).4、抵抗素在各組小鼠腎臟中均有表達,其表達隨周齡增長而增加,16周齡db/db組小鼠與同周齡db/m組小鼠相比腎臟抵抗素表達增加(免疫印跡相對光密度值：8w:1.000±0.053 vs 0.991±0.032；16w:1.168±0.049 vs 1.072±0.058,p 0.05),經(jīng)PTN干預后,db/db+PTN組小鼠腎臟抵抗素水平在16周齡與同周齡的db/db+NS組小鼠相比減少(免疫印跡相對光密度值：8w:0.991±0.032 vs 1.025 ±0.114；16w:1.168±0.049 vs 1.072±0.058, p0.05)。實驗結(jié)論：1.db/db小鼠表現(xiàn)出明顯的肥胖、血糖升高、血脂升高、胰島素抵抗等糖尿病表現(xiàn),該模型同時伴有腎臟損害特征,PTN可能對血脂升高和胰島素抵抗有一定改善作用。2.db/db小鼠的血VF、抵抗素、RBP4等脂肪因子水平較對照組有不同程度的增加,PTN可能對升高的抵抗素和RBP4有一定改善作用。3,VF在小鼠腎臟中有表達,db/db/、鼠在不同時間點腎組織VF蛋白表達水平較對照組相比有不同程度的增加,PTN干預后腎組織VF蛋白表達水平無明顯下降。4,抵抗素在小鼠腎臟中有表達,其蛋白表達水平在db/db小鼠腎組織中增加,PTN干預后腎組織抵抗素蛋白表達水平下降。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R587.2;R692.9

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 Marek Waluga;Marek Hartleb;Grzegorz Boryczka;Micha，

本文編號：1617011