本文選題：膀胱癌　切入點(diǎn)：γ-突觸核蛋白(γ-synuclein　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景：膀胱癌是威脅人類健康最常見的泌尿系惡性腫瘤,大約90%以上的膀胱癌為尿路上皮癌。門診初診為膀胱癌的患者中約75%為非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌,經(jīng)典的經(jīng)尿道電切手術(shù)具有較好的療效,然而這部分患者中50～70%將會(huì)復(fù)發(fā),并且復(fù)發(fā)腫瘤中約10～15%將會(huì)進(jìn)展為肌層浸潤(rùn)性膀胱癌。因此,膀胱癌患者需終生嚴(yán)密隨訪。膀胱鏡檢查及尿脫落細(xì)胞學(xué)(VUC)仍是膀胱癌診斷和隨訪的金標(biāo)準(zhǔn),但膀胱鏡檢查作為一項(xiàng)侵入性操作,給患者造成很大痛苦,不易被患者所接受；VUC敏感性較低,針對(duì)低級(jí)別腫瘤的敏感性不到40%,且易產(chǎn)生假陰性的結(jié)果。己獲美國(guó)食品藥品管理局(FDA)批準(zhǔn)的膀胱腫瘤抗原(BTA)、核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)、纖維蛋白降解產(chǎn)物(FDP)等與VUC相比,具有更高的靈敏度,但因特異度較差在臨床上并未能普及。因此,迫切需要尋找高敏感度及高特異度的膀胱癌腫瘤標(biāo)志物用于膀胱癌的早期診斷及術(shù)后復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)。神經(jīng)突觸核蛋白(synucleins)家族是一類高度保守的可溶性小分子蛋白質(zhì),主要表達(dá)于神經(jīng)細(xì)胞,該家族成員包括synuclein-α(SNCA)、synuclein-β(SNCB)和synuclein-γ(SNCG),它們的氨基酸序列和結(jié)構(gòu)具有很高的一致性。目前,他們的生物學(xué)功能還不十分明確。已有研究表明SNCA和SNCB主要與神經(jīng)退行性疾病,如阿爾茨海默氏癥和帕金森氏癥相關(guān),而SNCG則主要與腫瘤相關(guān)。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)SNCG在多種惡性腫瘤尤其是晚期腫瘤中異常高表達(dá),它能提高腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移的能力,還能干擾化療藥物所導(dǎo)致的的細(xì)胞凋亡等等。目前,SNCG與乳腺癌、卵巢癌、肝癌、肺癌、胃癌、食道癌、胰腺癌、膀胱癌等多種腫瘤的關(guān)系逐步得到廣泛關(guān)注,使得SNCG有望成為新的腫瘤標(biāo)志物和治療的靶點(diǎn)。研究目的：初步探討SNCG在膀胱癌診斷及預(yù)后監(jiān)測(cè)中的臨床意義及其生物學(xué)機(jī)制,為SNCG在膀胱癌中的進(jìn)一步研究及臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。研究方法：1、回顧性收集具有完整臨床及隨訪資料的膀胱癌手術(shù)標(biāo)本301例、癌旁組織98例,免疫組化檢測(cè)其中SNCG蛋白表達(dá)情況,并分析SNCG表達(dá)與膀胱癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系；2、ELISA法檢測(cè)58例膀胱癌患者血清及尿液SNCG蛋白濃度,比較其表達(dá)差異；3、Western blot檢測(cè)17例膀胱癌患者尿液SNCG濃度,同時(shí)檢測(cè)對(duì)應(yīng)癌組織中SNCG短鏈、SNCG長(zhǎng)鏈濃度及對(duì)照組β肌動(dòng)蛋白的濃度；4、收集95例新診斷膀胱癌病人術(shù)前及術(shù)后尿液(出院前、術(shù)后1個(gè)月、3個(gè)月和6個(gè)月,終點(diǎn)：腫瘤復(fù)發(fā)),ELISA法檢測(cè)其SNCG濃度,動(dòng)態(tài)觀察尿液SNCG濃度變化,并分析其與膀胱癌臨床病理特征之間的關(guān)系；5、RT-PCR、Western blot檢測(cè)膀胱癌細(xì)胞系EJ、T24、5637和UMUC-3中SNCG的表達(dá),篩選SNCG表達(dá)最高的細(xì)胞株備用；6、設(shè)計(jì)并合成siRNA序列,轉(zhuǎn)染膀胱癌細(xì)胞系5637并篩選出有效序列；7、CCK-8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SNCG表達(dá)抑制后對(duì)膀胱癌細(xì)胞系5637增殖能力的影響；8、Transwell小室模型實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SNCG表達(dá)抑制后對(duì)膀胱癌細(xì)胞系5637侵襲能力的影響。結(jié)果：1、SNCG在膀胱癌組織中呈高表達(dá),且與膀胱癌復(fù)發(fā)相關(guān)；Kaplan-Meier生存曲線示,SNCG陰性表達(dá)組的無(wú)病生存期(Disease Free Survival,DFS)和總生存期(Overall Surivival,OS)明顯高于SNCG陽(yáng)性表達(dá)組(分別為P=0.010,P=0.022),SNCG陰性組術(shù)后DFS和OS分別為(95.7±4.3)個(gè)月(95% CI,87.3～104.1個(gè)月)、(94.8±4.0)個(gè)月(95% CI,87.0～102.6個(gè)月),而SNCG陽(yáng)性組術(shù)后DFS和OS分別為(71.5±4.9)個(gè)月(95% CI,61.9～81.0個(gè)月)、(85.9±5.5)個(gè)月(95%CI,75.1～96.6個(gè)月)；COX多因素顯示SNCG是膀胱癌預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子(P=0.000)；2、尿液中SNCG蛋白水平明顯高于血清SNCG蛋白水平,且尿液SNCG水平與對(duì)應(yīng)癌組織SNCG水平高度一致；3、病人術(shù)前尿液SNCG濃度與腫瘤浸潤(rùn)深度密切相關(guān),同一病人術(shù)后尿液SNCG濃度較術(shù)前明顯下降,復(fù)發(fā)時(shí)尿液SNCG濃度再度上升；4、SNCG在膀胱癌細(xì)胞系5637中表達(dá)明顯高于EJ、T24、和UMUC-3;5、成功篩選SNCG表達(dá)被抑制的膀胱癌細(xì)胞系5637穩(wěn)定細(xì)胞株siSNCG-244;6、CCK-8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)顯示：抑制SNCG表達(dá)能降低5637細(xì)胞的增殖能力；7、Transwell小室實(shí)驗(yàn)提示：抑制SNCG表達(dá),膀胱癌細(xì)胞系5637遷移、侵襲能力減弱。結(jié)論：1、SNCG在膀胱癌組織中呈高表達(dá),且可作為膀胱癌預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子,提示SNCG可能與膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)；2、尿液中SNCG蛋白水平明顯高于血清SNCG蛋白水平,且與對(duì)應(yīng)癌組織中SNCG水平一致,提示膀胱癌細(xì)胞可以直接分泌到腫瘤周圍的尿液中,尿液SNCG有可能是膀胱癌檢測(cè)的理想標(biāo)志物；3、同一病人術(shù)后尿液SNCG濃度較術(shù)前明顯下降,復(fù)發(fā)時(shí)尿液SNCG濃度再度上升,提示尿液SNCG可作為膀胱癌復(fù)發(fā)的標(biāo)志物；4、抑制SNCG表達(dá)能改變膀胱癌5637細(xì)胞惡性表型,包括：抑制細(xì)胞的增殖能力和抑制細(xì)胞的遷移、侵襲能力；siRNA介導(dǎo)的SNCG基因表達(dá)下調(diào)能抑制其惡性表型,提示SNCG有望成為膀胱癌基因治療的靶點(diǎn)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.14

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 姜紅升;神經(jīng)突觸核蛋白-γ在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)和意義[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

，

本文編號(hào)：1616857