發(fā)布時(shí)間：2018-03-08 19:38

  本文選題：慢性腎病　切入點(diǎn)：動(dòng)靜脈瘺　出處：《山西醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:1.通過構(gòu)建小鼠慢性腎臟病(CKD)模型和動(dòng)靜脈瘺(AVF)模型,探究CKD是否通過NLRP3炎癥體信號(hào)通路介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)促使血管新生內(nèi)膜增生(NH)。2.明確NLPP3基因敲除對(duì)CKD小鼠血管新生內(nèi)膜增生具有減緩作用,并探究NLRP3抑制劑格列本脲是否對(duì)CKD相關(guān)的血管新生內(nèi)膜增生具有治療作用。方法:1.實(shí)驗(yàn)分組:取健康雄性C57小鼠24只,隨機(jī)分成CKD+AVF手術(shù)組、CKD偽手術(shù)組、格列本脲組及藥物對(duì)照組;NLRP3基因敲除雄性C57小鼠6只為NLRP3基因敲除組。采用5/6腎切除術(shù)構(gòu)建小鼠CKD模型,CKD術(shù)后1周留取小鼠血液標(biāo)本。采用小鼠右側(cè)頸總動(dòng)脈與頸內(nèi)靜脈端端吻合術(shù)構(gòu)建小鼠AVF模型,術(shù)后3周留取小鼠血管標(biāo)本。2.采用苦味酸法測(cè)定小鼠血肌酐(SCr)水平,脲酶法測(cè)定血尿素氮(BUN)含量,生化法測(cè)定血管組織Caspase-1活性。3.HE染色觀察血管組織病理變化,測(cè)量并分析各組小鼠新生血管內(nèi)膜增生情況。4.免疫熒光雙標(biāo)記法分析各組血管組織NLRP3、α-SMA及NLRP3下游信號(hào)分子IL-1β與IL-18在血管新生內(nèi)膜的表達(dá)水平。5.RT-PCR法分析各組血管組織NRLP3 m RNA的表達(dá)。結(jié)果:1.與CKD偽手術(shù)組相比,CKD+AVF手術(shù)組、格列本脲組、藥物對(duì)照組及NLRP3基因敲除組小鼠血清SCr與BUN水平顯著增高(p0.05)。2.血管組織HE染色示,與CKD偽手術(shù)組相比,CKD+AVF手術(shù)組小鼠血管內(nèi)膜明顯增厚,血管平滑肌細(xì)胞增生并向內(nèi)膜遷移(p0.05),而格列本脲組及NLRP3基因敲除組血管內(nèi)膜厚度無明顯變化(p0.05)。3.與CKD偽手術(shù)組相比,CKD+AVF手術(shù)組小鼠血管組織NLRP3 m RNA表達(dá)量明顯增高,Caspase-1活性顯著升高,血管平滑肌細(xì)胞NLRP3、IL-1β及IL-18蛋白含量也顯著增高;而格列本脲治療組、NLRP3基因敲除組NLRP3 m RNA的表達(dá)量、Caspase-1活性及血管平滑肌細(xì)胞NLRP3、IL-1β、IL-18蛋白的含量等指標(biāo)與CKD偽手術(shù)組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。4.上述各項(xiàng)指標(biāo)在CKD+AVF手術(shù)組與藥物對(duì)照組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論:1.CKD產(chǎn)生的尿毒癥毒素可誘導(dǎo)動(dòng)靜脈瘺處血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)多種炎癥細(xì)胞因子,如Caspase-1、IL-1β、IL-18,誘發(fā)血管平滑肌細(xì)胞增生并向血管內(nèi)膜遷移,造成動(dòng)靜脈瘺處管腔狹窄。2.NLRP3基因敲除可顯著抑制NLRP3炎癥體信號(hào)通路下游Caspase-1、IL-1β、IL-18等炎癥因子的產(chǎn)生,對(duì)CKD相關(guān)的血管新生內(nèi)膜增生具有抑制作用。3.格列本脲抑制NLRP3炎癥體信號(hào)通路激活、降低下游炎癥因子Caspase-1、IL-1β和IL-18的表達(dá),進(jìn)而阻止血管平滑肌細(xì)胞增生并向血管內(nèi)膜遷移有關(guān),對(duì)CKD相關(guān)的動(dòng)靜脈瘺管腔狹窄的形成具有抑制作用。
[Abstract]:Objective: through the construction of 1. mice with chronic kidney disease (CKD) model and arteriovenous fistula (AVF) model, to explore whether CKD inflammation through NLRP3 body inflammation mediated signaling pathway promotes neointimal hyperplasia (NH).2. specific NLPP3 gene knockout has protective effect on neointimal hyperplasia in CKD mice and explore the NLRP3 vessels. The inhibitor glibenclamide is neointimal hyperplasia of CKD related with therapeutic effect. Methods: 1. experimental groups: 24 healthy male C57 mice were randomly divided into CKD+AVF operation group, CKD sham group, glibenclamide group and drug control group; NLRP3 gene knockout of 6 male C57 mice with NLRP3 gene knockout group. Construction of a CKD model by 5/6 nephrectomy, the mice blood specimens CKD 1 weeks after operation. The right carotid artery and internal jugular vein in mice anastomosis construct mouse AVF model, the mice blood vessel standard left after 3 weeks The.2. method for the determination of mice with picric acid (SCr) level of serum creatinine, blood urea nitrogen determination method of urease (BUN) content, determination of staining to observe the pathological changes of vascular tissue Caspase-1 activity.3.HE vascular tissue biochemical method, analysis of mice neointimal hyperplasia.4. immunofluorescence double labeling analysis of vascular tissue were NLRP3 and alpha -SMA measurement. NLRP3 and the downstream signal molecule IL-1 beta and IL-18 expression level in.5.RT-PCR analysis of expression of vascular neointimal tissue were NRLP3 m RNA. Results: 1. CKD compared with the sham operation group, CKD+AVF group, lattice glyburide group, drug control group and NLRP3 knockout mice serum SCr and BUN levels increased significantly (P0.05).2. vascular tissue HE staining showed that CKD compared with the sham operation group, CKD+AVF group of mice with vascular intima was obviously thickened, vascular smooth muscle cell proliferation and migration to intima and glibenclamide (P0.05). Urea group and NLRP3 knockout group intimal thickness had no significant change (P0.05) CKD.3. compared with the sham operation group, significantly increased the expression of RNA NLRP3 m CKD+AVF group of mice with vascular tissue, the activity of Caspase-1 was significantly increased in vascular smooth muscle cells NLRP3, IL-1 beta and IL-18 protein content was significantly increased; and glibenclamide the treatment group, the expression of NLRP3 in group M RNA NLRP3 NLRP3 Caspase-1, gene knockout, activity of vascular smooth muscle cell and IL-1 beta protein content, index of IL-18 and CKD in sham group had no statistical difference (P0.05) there was no significant difference in the above indexes between.4. CKD+AVF surgery group and drug control group (P0.05). Conclusion: 1.CKD can induce the generation of uremic toxins arteriovenous fistula vascular smooth muscle cell factor expression, inflammatory cells such as Caspase-1, IL-1 beta, IL-18, induced vascular smooth muscle cell proliferation and intimal Migration caused by arteriovenous fistula stenosis at the.2.NLRP3 gene knockout could significantly inhibit NLRP3 body inflammatory signaling pathways downstream of Caspase-1, IL-1 beta, IL-18 and other inflammatory factors, neointimal hyperplasia of CKD can inhibit the.3. glibenclamide inhibition of NLRP3 signal pathway activation of inflammation, reduce inflammatory cytokines Caspase-1 expression. IL-1 beta and IL-18, and inhibit the proliferation of vascular smooth muscle cells and intimal migration related to CKD related arteriovenous fistula can inhibit the formation of luminal stenosis.

【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R692.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 韓萍萍;鄭若男;;Wnt信號(hào)通路及其與疾病的關(guān)系[J];生物技術(shù)通報(bào);2009年11期

2 王春梅,姜濤,周春燕;誘導(dǎo)心臟發(fā)生的早期信號(hào)通路[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2004年05期

3 解文博;葉玲;;p38絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路的部分研究方法[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2009年10期

4 黎增輝;廖愛軍;;JNK信號(hào)通路[J];國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志;2010年03期

5 李林;;Wnt信號(hào)通路及其與骨形成的關(guān)系[J];臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2010年20期

6 李鳳賀;辛世杰;楊棟;惠林萍;楊昱;張健;段志泉;;SHH信號(hào)通路在血小板源性生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞增殖中的作用研究[J];中國(guó)血管外科雜志(電子版);2010年04期

7 陳建勇;王聰;王娟;曹禮榮;;MAPK信號(hào)通路研究進(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)藥科學(xué);2011年08期

8 李寶新;李玉坤;;Wnt信號(hào)通路對(duì)骨調(diào)節(jié)研究新進(jìn)展[J];國(guó)際骨科學(xué)雜志;2008年03期

9 李佳殷;林麗珠;;JNK信號(hào)通路在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展[J];實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志;2012年18期

10 張玉婷;劉立新;;胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白在相關(guān)信號(hào)通路中的作用研究進(jìn)展[J];中華消化病與影像雜志(電子版);2012年05期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 程華;王文;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑[A];2011全國(guó)老年癡呆與衰老相關(guān)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議第三屆山東省神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師（學(xué)術(shù)）論壇論文匯編[C];2011年

2 蔣瑩;程華;張麗;艾厚喜;王文;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑[A];第一屆全國(guó)麻醉藥理專業(yè)委員會(huì)第二次學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

3 蔣瑩;程華;張麗;艾厚喜;王文;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑[A];中國(guó)成人醫(yī)藥教育論壇（4）[C];2011年

4 蔣瑩;程華;張麗;艾厚喜;王文;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)補(bǔ)益藥藥理專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)暨人參及補(bǔ)益藥學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)議論文集[C];2011年

5 李艷菲;艾厚喜;孫芳玲;張麗;蔣瑩;王文;;Wnt信號(hào)通路研究新進(jìn)展[A];2013年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十三屆中國(guó)藥師周論文集[C];2013年

6 李艷菲;艾厚喜;孫芳玲;張麗;蔣瑩;王文;;Wnt信號(hào)通路研究新進(jìn)展[A];2013年全國(guó)老年性癡呆與相關(guān)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

7 李艷菲;艾厚喜;孫芳玲;張麗;蔣瑩;王文;;Wnt信號(hào)通路研究新進(jìn)展[A];第三屆中國(guó)藥理學(xué)會(huì)補(bǔ)益藥藥理專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

8 季宇彬;胡哲清;鄒翔;;MAPK信號(hào)通路及其研究進(jìn)展[A];轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研討會(huì)論文集[C];2010年

9 程華;孫芳玲;艾厚喜;張麗;蔣瑩;王文;;Wnt信號(hào)通路與血管發(fā)生[A];全國(guó)第三次麻醉藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

10 李林;;利用小分子探針研究經(jīng)典Wnt信號(hào)通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十一次會(huì)員代表大會(huì)暨2014年全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集——專題報(bào)告七[C];2014年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前9條

1 劉海英;美發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞信號(hào)通路互動(dòng)機(jī)制[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

2 記者 劉海英;英發(fā)現(xiàn)細(xì)胞信號(hào)通路新“剎車”蛋白[N];科技日?qǐng)?bào);2012年

3 衣曉峰　陳英云 記者 李麗云;結(jié)腸癌發(fā)生中新的信號(hào)通路找到[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

4 王振嶺 印素萍;介入治顱內(nèi)巨大動(dòng)靜脈瘺[N];健康報(bào);2004年

5 王振嶺；印素萍;介入治療腦內(nèi)動(dòng)靜脈瘺[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

6 ;控制HbAlc具有成本效益[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

7 本報(bào)記者 白毅;“糖脂寧事件”再撞用藥“安全門”[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2009年

8 張誠(chéng);選擇有挑戰(zhàn)性的研究課題[N];科技日?qǐng)?bào);2005年

9 記者 許琦敏;減肥信號(hào)受控于腦中“通訊員”[N];文匯報(bào);2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王森;乙型肝炎病毒表面抗原抑制TLR2和TLR4信號(hào)通路的機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 尚果果;NRF2抗氧化應(yīng)激信號(hào)通路的活化在糖尿病腎病中的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 孫鼎琪;Akt信號(hào)通路在膀胱腫瘤的進(jìn)展及化療敏感性的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2015年

4 白秀峰;新基因Gsdma3對(duì)小鼠毛囊周期及Wnt/β-catenin信號(hào)通路作用的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 張俊波;PI3K/Akt信號(hào)通路調(diào)控胞內(nèi)布魯氏菌16M存活的分子機(jī)制研究[D];石河子大學(xué);2014年

6 成旭東;黃芪活性物質(zhì)篩選及基于PKC-ERK信號(hào)通路抑制肺癌的作用機(jī)理研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

7 路康;STAT3信號(hào)通路介導(dǎo)CLL和MCL發(fā)生組蛋白去乙酰化酶抑制劑耐藥的機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

8 趙睿;Wnt信號(hào)通路在臂叢神經(jīng)根性撕脫傷誘發(fā)的神經(jīng)病理性痛中的作用機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

9 劉海燕;Sonic hedgehog信號(hào)通路對(duì)正常角質(zhì)形成細(xì)胞增殖及凋亡的影響及其分子機(jī)制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

10 祁義軍;胃腸道間質(zhì)瘤中Shh信號(hào)通路作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李媛;尿毒癥毒素激活NLRP3炎癥體信號(hào)通路介導(dǎo)血管新生內(nèi)膜增生機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2017年

2 韓紹芳;小鼠主要嗅覺表皮組織內(nèi)AC3缺失對(duì)相關(guān)因子及信號(hào)通路的影響[D];河北大學(xué);2015年

3 李玉娟;Hedgehog信號(hào)通路在大鼠急性胰腺炎中的作用及其對(duì)TNF-α、IL-10的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 趙玲玲;FLCN與PAT1相互作用調(diào)控mTORC1信號(hào)通路的機(jī)理研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

5 努爾古麗·蘇里坦;mir-260和mir-240調(diào)控錢蟲壽命的研究[D];華中師范大學(xué);2015年

6 王瑜;晚期糖基化終末產(chǎn)物和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF信號(hào)通路的影響及其機(jī)制探討[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

7 楊瑩瑩;microRNA-203通過APC介導(dǎo)活化Wnt/β-catenin信號(hào)通路在佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠成纖維樣滑膜細(xì)胞中的調(diào)控作用及機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

8 徐貞貞;PM2.5對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞JAK/STAT信號(hào)通路的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

9 徐國(guó)棟;芪蛭皺肺顆粒調(diào)控肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路的研究[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué)(原名：甘肅中醫(yī)學(xué)院);2015年

10 陸兆雙;多聚左旋精氨酸促進(jìn)LPS誘導(dǎo)的NCI-H292細(xì)胞釋放炎癥因子IL-6、IL-8的信號(hào)通路研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1585271