膀胱出口梗阻后大鼠逼尿肌細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形態(tài)及GRP78表達的研究
本文選題:膀胱出口部分梗阻 切入點:膀胱重構(gòu) 出處:《山西醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的觀察膀胱出口梗阻后膀胱重構(gòu)中,逼尿肌平滑肌細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形態(tài)及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標志性蛋白——葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)的表達情況,探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在膀胱重構(gòu)機制中可能的作用。 方法雄性Wistar大鼠40只,隨機分為假手術(shù)組10只,梗阻2周組15只,梗阻4周組15只,采用經(jīng)會陰途徑球部尿道部分結(jié)扎的方法建立膀胱出口部分梗阻模型。采用透射電子顯微鏡觀察逼尿肌平滑肌細胞的超微結(jié)構(gòu),通過免疫組化和real-time PCR分別檢測逼尿肌中GRP78蛋白及mRXA表達變化。 結(jié)果 假手術(shù)組、梗阻2周組和梗阻4周組大鼠膀胱逼尿肌細胞GRP78蛋白陽性表達率為(3.37±0.38)%、(51.22±0.27)%、(27.02±1.85)%,梗阻2周組大鼠膀胱逼尿肌中GRP78陽性表達明顯增多,與假手術(shù)組相比有明顯差異(P0.01),梗阻4周組大鼠逼尿肌中GRP78陽性表達增多,與假手術(shù)組相比有明顯差異(P0.01),但比梗阻2周組表達量減少(P0.01)。各組GRP78mRNA表達量分別為(22.21±1.58)、(30.62±2.49)、(24.52±2.24),梗阻2周組大鼠膀胱逼尿肌細胞GRP78mRNA表達較假手術(shù)組明顯增加(P0.01);與梗阻2周組相比,梗阻4周組大鼠膀胱逼尿肌細胞GRP78mRNA表達量下降,有顯著性統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01),梗阻4周組與假手術(shù)組相比無統(tǒng)計學(xué)差異。 結(jié)論 采用會陰途徑球部尿道部分結(jié)扎方法能成功建立雄性大鼠膀胱出口梗阻動物模型。在梗阻后膀胱重構(gòu)過程中,逼尿肌平滑肌細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形態(tài)有明顯損傷性變化,GRP78蛋白及mRNA表達水平明顯增加,提示內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與膀胱重構(gòu)的進展。
[Abstract]:Objective to observe the morphology of endoplasmic reticulum (ER) and the expression of endoplasmic reticulum (ER) in detrusor smooth muscle cells (SMCs) after bladder outlet obstruction, and to investigate the role of endoplasmic reticulum stress (ER) in bladder remodeling. Methods 40 male Wistar rats were randomly divided into sham operation group (n = 10), obstruction group (n = 15) and obstruction group (n = 15). The model of bladder outlet obstruction was established by transperineal partial ligation of the bulbar urethra. The ultrastructure of detrusor smooth muscle cells was observed by transmission electron microscope. The changes of GRP78 protein and mRXA expression in detrusor muscle were detected by immunohistochemistry and real-time PCR, respectively. Results. In the sham operation group, the positive expression rate of GRP78 protein in the bladder detrusor muscle cells was 3.37 鹵0.38 in the obstruction 2 weeks group and 4 weeks in the obstruction group. The positive expression rate of GRP78 was significantly increased in the bladder detrusor muscle of the rats in the obstruction 2 weeks group (51.22 鹵0.27) and the bladder detrusor muscle in the obstruction 2 weeks group (27.02 鹵1.85). Compared with the sham operation group, there was a significant difference in the expression of GRP78 in the detrusor muscle of rats in the 4-week obstructive group, and the positive expression of GRP78 in the detrusor muscle was increased. Compared with the sham operation group, there was a significant difference between the two groups (P 0.01), but the expression of GRP78mRNA was decreased than that of the obstruction group at 2 weeks. The expression of GRP78mRNA in each group was 22.21 鹵1.58, 30.62 鹵2.49 and 24.52 鹵2.240.The GRP78mRNA expression of bladder detrusor cells in the obstruction group was significantly higher than that in the sham operation group, which was significantly higher than that in the sham operation group, and was significantly higher than that in the obstruction group at 2 weeks. The expression of GRP78mRNA in bladder detrusor cells in the 4-week group was significantly lower than that in the sham operation group (P 0.01), but there was no significant difference between the 4 week group and the sham operation group. Conclusion. The animal model of bladder outlet obstruction in male rats can be successfully established by partial urethral ligation via the perineal approach. The changes of endoplasmic reticulum in detrusor smooth muscle cells showed that the expression of GRP78 protein and mRNA increased significantly, suggesting that endoplasmic reticulum stress was involved in bladder remodeling.
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R694.2
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本文編號:1575974
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