本文關(guān)鍵詞： 缺血再灌注損傷 炎癥因子 PKCβ抑制劑 巨噬細(xì)胞　出處：《遵義醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:通過(guò)建立不同大鼠腎缺血再灌注損傷模型,分析PKCβ抑制劑對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷后M1及M2型巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物及介質(zhì)在腎組織的表達(dá)情況,為進(jìn)一步研究PKCβ抑制劑減輕腎缺血再灌注損傷的機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。方法:構(gòu)建不同的大鼠腎缺血再灌注損傷模型,按處理不同分為腎缺血再灌注損傷非灌洗組(A組)、腎缺血再灌注損傷預(yù)灌洗組(B組)、PKCβ抑制劑治療組(C組)、假手術(shù)組(D組)。A、B、D組術(shù)前一天予以生理鹽水1ml/只灌胃,C組術(shù)前一天予以PKCβ抑制劑1ml/只灌胃。第二日將A、B、C組打開腹腔充分暴露雙側(cè)腎臟后去掉右側(cè)腎臟,A、C組左側(cè)腎臟予以血管夾鉗夾左側(cè)腎動(dòng)脈阻斷腎臟血供60min后再恢復(fù)血流灌注24h;B組于缺血前予生理鹽水對(duì)左側(cè)腎臟進(jìn)行灌洗沖盡殘留血細(xì)胞后以同樣的方法缺血60min后再恢復(fù)血液灌注24h;D組僅行開腹、關(guān)腹手術(shù)。24h后處死大鼠分別取左側(cè)腎臟標(biāo)本進(jìn)行以下檢測(cè):1.免疫組織化學(xué)法分別檢測(cè)各組誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)和白介素-12(IL-12)表達(dá)以分析M1型巨噬細(xì)胞在腎臟的浸潤(rùn)情況;2.免疫熒光染色法分別檢測(cè)各組巨噬細(xì)胞細(xì)胞標(biāo)記物(CD197/CD163)表達(dá)以分析M1及M2型巨噬細(xì)胞在腎臟的浸潤(rùn)情況;3.熒光定量PCR法檢測(cè)各組樹突狀細(xì)胞相關(guān)性C型植物血凝素-1(Dectin-1)、1-型精氨酸酶(Arg-1)mRNA表達(dá)分析M2型巨噬細(xì)胞在腎臟的浸潤(rùn)情況。結(jié)果:1.免疫組織化學(xué)法顯示iNOS主要表達(dá)于髓質(zhì)外帶近端腎小管上皮細(xì)胞胞漿及包膜上,而IL-12主要表達(dá)于腎髓質(zhì)的腎小管間質(zhì)中,部分表達(dá)于腎小球系膜細(xì)胞及腎小管上皮細(xì)胞胞漿中。iNOS、IL-12在D組表達(dá)很少,在A、B組顯著增加,并且A、B組表達(dá)較C組明顯增高(P0.01);A組表達(dá)高于B組(P0.01);iNOS在C組表達(dá)較D組明顯增高(P0.01),但是IL-12在C組與D組表達(dá)無(wú)差異(P0.05)。2.免疫熒光染色顯示CD197、CD163主要表達(dá)在腎小管腎間質(zhì)中,CD197在D組表達(dá)較少,A組表達(dá)顯著增高,并且A組表達(dá)較B、C組增高(P0.01);B組與C組比較二者無(wú)明顯差異(P0.05);D組表達(dá)較A、B、C組降低(P0.01)。CD163在C組表達(dá)較A、B、D組顯著增高(P0.01);A、B、D組相互比較均無(wú)明顯差異(P0.05)。3.熒光定量PCR顯示Dectin-1及Arg-1 mRNA在D組表達(dá)很少,C組表達(dá)明顯增高,C組表達(dá)較A、B、D組明顯增高(P0.05),A、B、D組相互比較均無(wú)明顯差異(P0.05)。結(jié)論:1.缺血前預(yù)灌洗可減少腎缺血再灌注損傷后M1型巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn);2.PKCβ抑制劑可減少腎缺血再灌注損傷后M1型巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)、增加抗炎型M2型巨噬細(xì)胞的表達(dá)來(lái)促進(jìn)組織修復(fù),減輕炎癥反應(yīng),但具體機(jī)制暫不清楚,需后續(xù)研究進(jìn)一步證實(shí)。
[Abstract]:Objective: to study the expression of PKC 尾 inhibitor on the surface markers and mediators of M1 and M2 macrophages after renal ischemia-reperfusion injury in different rats. To provide a theoretical basis for further study on the mechanism of PKC 尾 inhibitor in alleviating renal ischemia-reperfusion injury. Methods: different renal ischemia-reperfusion injury models were established in rats. According to the treatment, the rats were divided into two groups: group A (non-lavage group), group B (prelavage group), group C (PKC 尾 inhibitor treatment group), group D (sham operation group), group D (group D): 1 ml of normal saline before operation / group C (intragastric instillation of normal saline only). One day before operation, PKC 尾 inhibitor 1ml / g was perfused into the stomach. On 2nd, the patients in group A were given intraperitoneal full exposure of the bilateral kidneys, and the left kidneys were removed from the right kidney. The left kidneys in the group A were removed by clamp clamp and the left renal artery was clamped to block the renal blood supply for 60 minutes before resuming the blood supply. In group B, the left kidney was washed with saline for 24 h before ischemia, and the residual blood cells were washed out in the same way. After 60 minutes of ischemia, the rats in group D were restored to hemoperfusion for 24 hours. Group D only underwent laparotomy. 24 hours after abdominal closure operation, the rats were sacrificed for the following detection: 1. Immunohistochemical method was used to detect the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and interleukin-12 IL-12 (IL-12) in order to analyze the infiltration of M1 macrophages in the kidney. Immunofluorescence staining method was used to detect the expression of macrophage marker CD197 / CD163 in order to analyze the infiltration of M1 and M2 macrophages in the kidney. Fluorescence quantitative PCR method was used to detect the dendritic cell associated C type plant in each group. Expression of procoagulin-1 Dectin-1- argininase (Arg-1N) mRNA in the kidney the infiltration of M2 macrophage in kidney was analyzed. Results 1. Immunohistochemistry showed that iNOS was mainly expressed in the cytoplasm and capsule of proximal tubular epithelial cells of medullary outer band. However, IL-12 was mainly expressed in the tubulointerstitial of renal medulla, partly in glomerular Mesangial cells and tubule epithelial cells. The expression of iNOSIL-12 in the cytoplasm of glomerular Mesangial cells and renal tubular epithelial cells was very small in group D, but increased significantly in group A and B. Moreover, the expression of IL-12 in group A was significantly higher than that in group C (P 0.01). The expression of IL-12 in group C was significantly higher than that in group D, but there was no difference in the expression of IL-12 between group C and group D. Immunofluorescence staining showed that CD197 CD163 was mainly expressed in renal tubulointerstitium. The expression of CD197 in group D was significantly higher than that in group A. Moreover, there was no significant difference between group A and group C in the expression of P0.01C and group C. There was no significant difference between group A and group C in the expression of P0.01C. CD163 in group A was significantly higher than that in group A (P 0.01). There was no significant difference between group A and group C in the expression of P0.05U. 3. Fluorescence quantitative PCR showed Dectin-1 and Arg-1. The expression of mRNA in group D was less than that in group C. The expression of mRNA in group C was significantly higher than that in group A (P 0.05). Conclusion: 1. Pre-lavage before ischemia can reduce the infiltration of M1 macrophages after renal ischemia-reperfusion injury. PKC 尾 inhibitor can reduce the infiltration of M1 macrophages after renal ischemia reperfusion injury. The expression of anti-inflammatory M2 macrophages was increased to promote tissue repair and alleviate inflammatory reaction, but the specific mechanism was not clear, which needed to be further confirmed by further research.
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R692

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 鄭振群;;關(guān)于巨噬細(xì)胞的幾個(gè)問(wèn)題[J];山西醫(yī)藥雜志;1974年12期

2 ;豚鼠巨噬細(xì)胞經(jīng)P_(204)處理后的抗石英細(xì)胞毒作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)參考資料(衛(wèi)生學(xué)分冊(cè));1976年04期

3 鄧俠進(jìn);;巨噬細(xì)胞的抗癌作用[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1979年02期

4 陸天才;;疾病對(duì)肺巨噬細(xì)胞的影響[J];煤礦醫(yī)學(xué);1982年01期

5 郭瑞清;祝彼得;;一種分離巨噬細(xì)胞的簡(jiǎn)單方法[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1990年02期

6 謝志堅(jiān);巨噬細(xì)胞異質(zhì)性[J];醫(yī)學(xué)綜述;2001年06期

7 饒艷;運(yùn)動(dòng)及神經(jīng)內(nèi)分泌對(duì)巨噬細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)[J];體育與科學(xué);2002年05期

8 朱金元;;吸煙對(duì)肺巨噬細(xì)胞的影響[J];浙江醫(yī)學(xué)教育;2003年01期

9 張俊峰;過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體與單核/巨噬細(xì)胞系[J];醫(yī)學(xué)綜述;2004年03期

10 韋錦學(xué);顧軍;;巨噬細(xì)胞的激活誘導(dǎo)死亡[J];生命科學(xué);2006年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 史玉玲;王又明;豐美福;;巨噬細(xì)胞激活作用的研究[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第五次會(huì)議論文摘要匯編[C];1992年

2 吳國(guó)明;周輝;;巨噬細(xì)胞和創(chuàng)傷纖維化[A];2009年浙江省骨科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

3 李奇;王海杰;;透明質(zhì)酸對(duì)于淋巴結(jié)巨噬細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的影響[A];解剖學(xué)雜志——中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

4 劉革修;歐大明;劉軍花;黃紅林;廖端芳;;丙丁酚在體外能抑制巨噬細(xì)胞脂質(zhì)氧化介導(dǎo)的低密度脂蛋白氧化并調(diào)節(jié)氧化巨噬細(xì)胞的分泌功能[A];面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展（下冊(cè)）[C];1999年

5 葉金善;楊麗霞;郭瑞威;;環(huán)氧化酶-2/前列腺素E_2在血管緊張素Ⅱ刺激巨噬細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子中的作用[A];第十三次全國(guó)心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

6 秦帥;陳希;孔德明;;構(gòu)建由綠色熒光標(biāo)記巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因斑馬魚系[A];貴州省中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)分泌代謝學(xué)術(shù)會(huì)論文匯編[C];2012年

7 武劍華;徐惠綿;;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在胃癌中的相關(guān)研究[A];第9屆全國(guó)胃癌學(xué)術(shù)會(huì)議暨第二屆陽(yáng)光長(zhǎng)城腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2014年

8 何軍;;血凝素樣氧化型低密度脂蛋白受體升高巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11次心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

9 宋盛;周非凡;邢達(dá);;PDT誘導(dǎo)的凋亡細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞NO合成的影響[A];第七屆全國(guó)光生物學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2010年

10 張磊;朱建華;黃元偉;姚航平;;血管緊張素Ⅱ?qū)奘杉?xì)胞(THP-1重細(xì)胞)凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體表達(dá)的影響[A];浙江省免疫學(xué)會(huì)第五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2004年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 通訊員 李靜 記者 胡德榮;惡性腫瘤巨噬細(xì)胞未必皆“惡人”[N];健康報(bào);2014年

2 蘭克;以嘗試用巨噬細(xì)胞治癱瘓[N];科技日?qǐng)?bào);2000年

3 薛佳;免疫系統(tǒng)——人體的“衛(wèi)士”[N];保健時(shí)報(bào);2009年

4 記者 胡德榮;鐵泵蛋白“維穩(wěn)”鐵代謝作用首次闡明[N];健康報(bào);2011年

5 侯嘉 何新鄉(xiāng);硒的神奇功能[N];中國(guó)食品質(zhì)量報(bào);2003年

6 唐穎 倪兵 陳代杰;巨噬細(xì)胞泡沫化抑制劑研究快步進(jìn)行[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

7 劉元江;新發(fā)現(xiàn)解釋腫瘤為何易成“漏網(wǎng)之魚”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2007年

8 本報(bào)記者 侯嘉 通訊員 何新鄉(xiāng);今天你補(bǔ)硒了嗎[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

9 左志剛;升血小板藥使用注意[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

10 記者 許琦敏;“鐵泵”蛋白幫助回收鐵元素[N];文匯報(bào);2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 周赤燕;巨噬細(xì)胞MsrA對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的干預(yù)研究[D];武漢大學(xué);2013年

2 章桂忠;TIPE2蛋白調(diào)控細(xì)胞增殖和炎癥的機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

3 張瑜;DKK1抑制巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積及其相關(guān)分子機(jī)制[D];山東大學(xué);2015年

4 孟濤;異丙酚對(duì)心臟收縮功能的抑制作用及其對(duì)巨噬細(xì)胞分泌功能調(diào)節(jié)的機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

5 周興;基于酵母微囊構(gòu)建新型口服巨噬細(xì)胞靶向遞送系統(tǒng)的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 蔣興偉;Tim-3對(duì)巨噬細(xì)胞極化的調(diào)控機(jī)制研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

7 劉伯玉;清道夫受體A介導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬鉤端螺旋體研究[D];上海交通大學(xué);2013年

8 楊紹俊;miRNA-155介導(dǎo)ESAT-6誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制及其在結(jié)核診斷中的作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

9 翟光耀;單核/巨噬細(xì)胞Ly6C~(low)亞群在心肌梗死后瘢痕形成期的抗炎特性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

10 韓露;TRB3介導(dǎo)的脂肪組織巨噬細(xì)胞極化與糖尿病冠狀動(dòng)脈病變關(guān)系的研究[D];山東大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 馬春梅;AP0E~(-/-)小鼠TLR9介導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化效應(yīng)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化作用的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 張譯丹;鹽皮質(zhì)激素受體拮抗劑調(diào)控巨噬細(xì)胞表型對(duì)實(shí)驗(yàn)性矽肺的作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 盧文冉;HCV core蛋白作用的巨噬細(xì)胞培養(yǎng)上清對(duì)肝細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 李文建;載脂蛋白E影響巨噬細(xì)胞因子表達(dá)及分型的機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 曹爽;高糖對(duì)巨噬細(xì)胞TLR4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)節(jié)作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 寧程程;腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在子宮內(nèi)膜癌雌激素敏感性中的作用及機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

7 高龍;PLD4在腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞抑制結(jié)腸癌增殖中的作用研究[D];成都醫(yī)學(xué)院;2015年

8 任虹;感染期子宮頸癌U14細(xì)胞荷瘤小鼠抑制巨噬細(xì)胞CCL5分泌的機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 李美玲;雙酚A對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞極化影響的體外研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

10 劉瓊;黃芪多糖影響巨噬細(xì)胞向脂肪細(xì)胞趨化的作用及機(jī)制研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

，

本文編號(hào)：1519709