本文關(guān)鍵詞：BCG誘導(dǎo)形成的NETs在膀胱癌治療中作用機(jī)制的相關(guān)研究

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【摘要】：目的:探討中性粒細(xì)胞胞外捕獲網(wǎng)(neutrophil extracelluar traps,NETs)對膀胱癌T24細(xì)胞遷移、侵襲的影響及NETs對外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)增殖、細(xì)胞因子表達(dá)的影響;探討NETs對小鼠膀胱腫瘤生長及膀胱腫瘤中CD3表達(dá)的影響。方法:將卡介苗(BCG)與中性粒細(xì)胞共同培養(yǎng)4小時(shí)誘導(dǎo)NETs形成,制備NETs懸液;取不同濃度NETs與膀胱癌T24細(xì)胞共同培養(yǎng),通過劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)方法,分析NETs對膀胱癌T24細(xì)胞遷移、侵襲的影響;取不同濃度NETs與PBMCs共同培養(yǎng),通過CCK-8、流式細(xì)胞術(shù)及ELISA法,分析NETs對PBMCs增殖、PBMCs細(xì)胞表面CD4、CD8的表達(dá)和PBMCs分泌Th1型細(xì)胞因子TNF-α及IFN-γ的水平。建立Balb/c小鼠皮下膀胱腫瘤模型,將BCG誘導(dǎo)形成的NETs懸液皮下注射,同時(shí)設(shè)立陰性對照組,觀察小鼠的一般狀況和腫瘤生長情況;摘取腫瘤,對腫瘤組織標(biāo)本行HE染色,觀察腫瘤病理情況;進(jìn)行CD3免疫組織化學(xué)染色,檢測膀胱腫瘤中免疫細(xì)胞的分布情況。結(jié)果:1.劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:不同濃度NETs與膀胱癌T24細(xì)胞共同培養(yǎng)后,實(shí)驗(yàn)組(1×NETs組和2×NETs組)與對照組相比,膀胱癌T24細(xì)胞遷移能力明顯減弱,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:不同濃度NETs與膀胱癌T24細(xì)胞共同培養(yǎng)后,實(shí)驗(yàn)組(1×NETs組和2×NETs組)與對照組相比,膀胱癌T24細(xì)胞侵襲穿過小室的細(xì)胞數(shù)量明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.不同濃度的NETs作用于PBMCs細(xì)胞后,NETs能夠明顯促進(jìn)PBMCs細(xì)胞增殖,隨著NETs濃度增加,PBMCs細(xì)胞增殖作用逐漸減弱。4.流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組(0.5×NETs組及2×NETs組)PBMCs細(xì)胞CD4表達(dá)量與對照組相比明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),0.5×NETs組與2×NETs組相比無明顯差異;PBMCs細(xì)胞CD8表達(dá)量各組之間均無明顯差異。5.不同濃度NETs與PBMCs共同培養(yǎng)后,PBMCs細(xì)胞在不同時(shí)間點(diǎn)(24h、48h、72h)分泌TNF-α及IFN-γ的水平與對照組相比明顯增加,隨著NETs濃度增加,PBMCs細(xì)胞分泌TNF-α及IFN-γ的水平逐漸降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。6.在小鼠皮下注射NETs懸液14天后,摘除腫瘤,NETs組小鼠皮下腫瘤體積和腫瘤重量均明顯小于陰性對照組;另外,HE染色病理結(jié)果顯示均為惡性腫瘤細(xì)胞;7.免疫組化檢測結(jié)果顯示:NETs組腫瘤組織中CD3細(xì)胞陽性數(shù)較陰性對照組明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。結(jié)論:1.BCG誘導(dǎo)形成的NETs在體外能夠抑制膀胱癌細(xì)胞遷移和侵襲作用。2.NETs可以促進(jìn)PBMCs細(xì)胞的增殖作用,并能促進(jìn)PBMCs細(xì)胞表面CD4的表達(dá)和Th1型細(xì)胞因子表達(dá)的上調(diào),從而通過發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用,促進(jìn)NETs的抗腫瘤作用。3.在小鼠皮下膀胱腫瘤模型中,NETs能夠抑制腫瘤生長,并能夠活化腫瘤組織中淋巴細(xì)胞,發(fā)揮免疫活化作用。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.14

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1 青云;英國科學(xué)家辨別出與膀胱癌有關(guān)的基因[J];中國處方藥;2004年08期

2 ;特殊激素可導(dǎo)致男性患膀胱癌幾率升高[J];中國社區(qū)醫(yī)師(綜合版);2007年11期

3 肖建利;張麗芳;劉巧莉;;白花蛇舌草治療膀胱癌1例[J];臨床合理用藥雜志;2009年08期

4 丁虹彬，，余雪軒;培養(yǎng)膀胱癌細(xì)胞的新方法[J];南京醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1994年01期

5 張曉峰;劉訓(xùn)勤;;一種新型膀胱癌快速診斷裝置[J];醫(yī)療衛(wèi)生裝備;2013年10期

6 孫宏志,凡杰,唐孝達(dá);自穩(wěn)定反義IGF1R基因片段對膀胱癌細(xì)胞的影響[J];中華泌尿外科雜志;2000年05期

7 章小平,楊紅枚,魯功成;膀胱癌穩(wěn)定表達(dá)多藥耐受相關(guān)蛋白亞克隆的生物學(xué)特征[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2000年03期

8 漆少廷,徐錫坤,王心如;膀胱癌的分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).泌尿系統(tǒng)分冊;2000年04期

9 章小平,楊紅枚,魯功成;流式細(xì)胞儀在膀胱癌多藥耐受研究中的應(yīng)用[J];臨床泌尿外科雜志;2000年09期

10 楊莉,汪少娟,楊業(yè)金,陳忠,吳燕麗;抗腫瘤藥對膀胱癌細(xì)胞產(chǎn)生的免疫抑制因子作用的影響[J];藥物流行病學(xué)雜志;2000年03期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張永春;谷江;孫發(fā);石家齊;;傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)在膀胱癌治療中的意義[A];2010年貴州省泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

2 潘春武;沈周俊;唐小瑩;王e

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