不同劑量肝素對高糖誘導(dǎo)后的人腹膜間皮細(xì)胞水通道蛋白1表達(dá)的影響
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【摘要】:目的研究不同劑量肝素對高糖誘導(dǎo)后的人腹膜間皮細(xì)胞水通道蛋白1(AQP1)m RNA和蛋白表達(dá)水平的影響。方法分離并培養(yǎng)人腹膜間皮細(xì)胞,并用高糖(2.5%葡萄糖溶液)誘導(dǎo)4、8、12和24 h;采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測AQP1 mRNA的表達(dá)水平,從而確定表達(dá)量達(dá)峰值的誘導(dǎo)時(shí)間。將不同劑量的肝素添加至人腹膜間皮細(xì)胞培養(yǎng)液中,并經(jīng)2.5%高糖溶液誘導(dǎo)后,用RT-PCR及免疫組織化學(xué)法檢測實(shí)驗(yàn)組與對照組AQP1 m RNA和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果與對照組比較,實(shí)驗(yàn)組AQP1 m RNA和蛋白表達(dá)明顯增加,且mRNA表達(dá)呈時(shí)間依賴性,且在高糖誘導(dǎo)24 h時(shí)表達(dá)量達(dá)峰值,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);RT-PCR與免疫組織化學(xué)結(jié)果具有一致性,均提示AQP1 mRNA和蛋白表達(dá)水平在2.5%葡萄糖+1.5×10~(-2)mg/ml肝素組呈現(xiàn)明顯上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);免疫組織化學(xué)染色提示2.5%葡萄糖+1.5×10~(-2)mg/ml肝素組細(xì)胞可見胞核及胞漿有空泡樣改變。結(jié)論肝素在高糖環(huán)境中誘導(dǎo)24 h后可顯著增加人腹膜間皮細(xì)胞水通道蛋白AQP1 m RNA和蛋白的表達(dá),且大劑量的肝素能使胞漿及胞核出現(xiàn)明顯的空泡樣改變。
【作者單位】: 湖南省常德市第一人民醫(yī)院腎病內(nèi)科;大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院腎內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】: 肝素 人腹膜間皮細(xì)胞 水通道蛋白
【分類號】:R692.5
【正文快照】: 腹膜透析是終末期腎衰竭患者可供選擇的治療Biotech公司,水平電泳槽購自北京市六一儀器廠,方法之一,但臨床上腹膜透析患者常發(fā)生腹膜透析PCR儀購自美國Biometra公司。管堵塞,為解決該問題,體內(nèi)外抗凝劑肝素常添加于1.2人腹膜間皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定腹膜透析液中。有研究顯
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,本文編號:1092128
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