本文關(guān)鍵詞：維吾爾族IgA腎病尿液糖基化蛋白質(zhì)組學(xué)的觀察研究

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【摘要】：目的:研究初次診斷為維吾爾族Ig A腎病的尿液糖基化蛋白質(zhì)質(zhì)譜特點(diǎn),并與維吾爾族健康人尿液糖基化蛋白質(zhì)譜進(jìn)行對(duì)比,觀察維吾爾族Ig A腎病中差異表達(dá)的蛋白質(zhì),探討液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)該疾病的臨床診斷價(jià)值。方法:選擇2013年12月至2014年8月期間經(jīng)腎活檢診斷為原發(fā)性Ig A腎病的維吾爾族患者20例及同期體檢的健康人10例,留取清晨空腹清潔中段尿標(biāo)本,并立即加入鹽酸防腐。為避免細(xì)菌污染和蛋白酶解于2小時(shí)內(nèi)在4℃下以4000g×10min離心去除細(xì)胞碎片及相關(guān)成分,留取上清液,置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆�。隨后取出30份尿標(biāo)本,待常溫下完全溶解后,按照標(biāo)本體積:丙酮體積為3:1的比例迅速加入-20℃預(yù)冷丙酮進(jìn)行蛋白沉淀,將樣品再次以4℃14000g×30min離心沉淀,丟棄上清液,將含尿液蛋白質(zhì)的沉淀物真空干燥濃縮并存于-80℃中待用。將真空干燥后的尿蛋白沉淀物用PBS溶液充分溶解后,用Bradford法測(cè)定每份樣品中尿蛋白濃度。應(yīng)用肼化學(xué)富集糖蛋白后PNGase F去糖鏈酶切,真空離心干燥后進(jìn)行二維液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對(duì)樣品進(jìn)行系統(tǒng)分析。所獲得的蛋白質(zhì)多肽序列結(jié)果應(yīng)用Mascot軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)檢索,將獲得的尿蛋白序列號(hào)在Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行檢索,查詢所表達(dá)的蛋白質(zhì)名稱、分子質(zhì)量、細(xì)胞學(xué)定位、等電點(diǎn)等相關(guān)信息。結(jié)果:1.10份維吾爾族健康人的尿液標(biāo)本中共鑒定出121種糖蛋白,經(jīng)驗(yàn)證后,所有健康人的尿液標(biāo)本共同表達(dá)23種蛋白質(zhì)。2.20份維吾爾族Ig A腎病患者的尿液標(biāo)本中共鑒定出218種糖蛋白,所有標(biāo)本共同表達(dá)17種蛋白質(zhì),與健康人尿液表達(dá)的蛋白質(zhì)進(jìn)行分析比較,在Ig A腎病中特異性表達(dá)6種蛋白,它們分別是:α-1抗胰蛋白酶、銅藍(lán)蛋白、血清轉(zhuǎn)鐵蛋白、維生素D結(jié)合蛋白、α1-微球蛋白、α淀粉酶1。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)利用二維液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)研究了維吾爾族Ig A腎病患者的尿液糖基化蛋白質(zhì)譜特點(diǎn),成功獲得了該疾病的多肽序列質(zhì)譜圖,共得到218種糖蛋白。其中α-1抗胰蛋白酶、銅藍(lán)蛋白、血清轉(zhuǎn)鐵蛋白、維生素D結(jié)合蛋白、α1-微球蛋白、α淀粉酶1,這6種蛋白可能成為維吾爾族lg A腎病的診斷標(biāo)志物。
【關(guān)鍵詞】：維吾爾族 IgA腎病 糖蛋白質(zhì)組學(xué) 液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R692.3
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• Abstract6-9
• 英文縮略詞表9-10
• 引言10-12
• 材料與方法12-16
• （一）研究對(duì)象12
• 1.病例組入組標(biāo)準(zhǔn)12
• 2.對(duì)照組入組標(biāo)準(zhǔn)12
• 3.標(biāo)本的采集12
• （二）實(shí)驗(yàn)材料12-13
• 1.試劑12-13
• 2.儀器設(shè)備13
• 3.相關(guān)輔料13
• （三）實(shí)驗(yàn)步驟13-15
• 1.標(biāo)本采集13
• 2.標(biāo)本處理13-14
• 3.數(shù)據(jù)分析14-15
• （四）技術(shù)路線圖15-16
• 結(jié)果16-22
• 1.兩組入選者的臨床資料16
• 2.健康對(duì)照組結(jié)果16-18
• 3.IgA腎病組結(jié)果18-19
• 4.質(zhì)譜圖19-22
• 討論22-26
• 小結(jié)與瞻望26-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-32
• 文獻(xiàn)綜述32-45
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 致謝45-46
• 作者簡(jiǎn)歷46-47
• 導(dǎo)師評(píng)閱表47

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 賈雄飛;賀偉峰;羅高興;甘成軍;黃正根;袁順宗;王小娟;彭旭;程文廣;譚江琳;胡婕;吳軍;;腎移植急性排斥反應(yīng)早期診斷尿液蛋白質(zhì)組學(xué)研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2008年24期

2 張宏;;IgA腎病診斷治療進(jìn)展[J];北京醫(yī)學(xué);2012年04期

3 周華;趙靜芳;孫彬;錢(qián)軍;趙秀芬;潘家榮;邢昌贏;;臨床輕癥IgA腎病尿蛋白質(zhì)組學(xué)研究[J];中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志;2010年10期

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本文編號(hào)：1075452