本文關(guān)鍵詞：結(jié)締組織生長因子對創(chuàng)面再生和瘢痕愈合中Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白表達的影響

  更多相關(guān)文章： CTGF 膠原蛋白 再生 瘢痕愈合

【摘要】：目的皮膚損傷后主要由再生和瘢痕愈合兩種方式。CTGF、I型和Ⅲ型膠原蛋白的含量在不同愈合方式具有差異性。然而,CTGF、I型和Ⅲ型膠原蛋白在皮膚再生及瘢痕愈合過程中序貫性表達,CTGF直接應用于創(chuàng)面對于創(chuàng)面愈合及Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白表達影響的報道較少。本研究旨在檢測CTGFⅠ型、Ⅲ型膠原蛋白在皮膚再生及瘢痕愈合過程中序貫性表達差異,應用CTGF對于創(chuàng)面愈合及創(chuàng)面中Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白表達的影響。方法1、50只日本大耳白兔,雌雄不拘,體重均為2.5—3.0Kg,單只單籠適應性飼養(yǎng)7天后。隨機分為兩組：CTGF組、CTGF抗體組,每組25只兔子,組內(nèi)設空白對照,視為正常對照(NS)組。5%硫化鈉行兔耳腹側(cè)脫毛。以2%戊巴比妥鈉(1.5ml/kg)行耳緣靜脈麻醉后,分別于每只兔耳腹側(cè)用取皮刀切取大小均為10.0mm×10.0mm楔形創(chuàng)面,由淺及深的方向隨機選取為耳尖向耳根或耳根向耳尖,最深至軟骨層。于創(chuàng)面耳緣平行于淺層傷口起始處做小切口標記。術(shù)后常規(guī)抗感染治療,自由進食。2、CTGF組自傷后當日起,每只兔左耳創(chuàng)周以30G針頭注射濃度為100.0ng/ml的rhCTGF0.1ml,隔日一次,直至創(chuàng)面愈合；右耳所有創(chuàng)面注射等量生理鹽水作為空白對照。CTGF抗體組自傷后當日起,每只兔左耳創(chuàng)周以30G針頭注射濃度為5.0μg/ml的CTGF抗體0.1ml,隔日一次,直至創(chuàng)面愈合；右耳所有創(chuàng)面注射等量生理鹽水作為對照。所有創(chuàng)面均以無菌輔料包扎并卷耳固定。3、各組分別于傷后第0天、4天、8天、12天、30天隨機選取5只兔子,記錄創(chuàng)面愈合及瘢痕情況并拍照保存。每次取材分別切取兩組兔子左耳創(chuàng)面,各5個創(chuàng)面,另外兩組所有右耳創(chuàng)面作為正常對照組。所有標本均以10%中性甲醛固定,24h后脫水,常規(guī)石蠟包埋、切片。行HE染色及CTGF、Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白免疫組化染色。4、以顯微鏡觀察創(chuàng)面深側(cè)及淺層面愈合過程中的組織形態(tài)變化和CTGF、Ⅰ型膠原蛋白、Ⅲ型膠原蛋白的表達差異。將切片創(chuàng)面由深到淺分為10段,每段1.0mm,深側(cè)邊緣內(nèi)4.0mmm范圍視為深側(cè)創(chuàng)面,淺側(cè)邊緣內(nèi)4.0mmm視為淺側(cè)創(chuàng)面,兩側(cè)創(chuàng)面分別任取5個視野進行觀察并采圖,以Image-Pro-plus 6.0軟件測量每個視野的平均光密度值。創(chuàng)面愈合情況照片用Image-Pro-plus 6.0軟件計算創(chuàng)面面積,并計算創(chuàng)面愈合率。以spss19.0軟件分析數(shù)據(jù),方差齊時多組間均數(shù)比較采用方差分析,當方差不齊時采用秩和檢驗,P0.05時差異具有統(tǒng)計學意義。結(jié)果1、淺側(cè)創(chuàng)面(距淺側(cè)創(chuàng)緣內(nèi)0-4mm為淺側(cè)創(chuàng)面)于8天內(nèi)實現(xiàn)再生,深側(cè)創(chuàng)面(距淺側(cè)創(chuàng)緣內(nèi)約6-10mm為深側(cè)創(chuàng)面)12天時創(chuàng)面明顯縮小,瘢痕形成,第30天時瘢痕增生仍然明顯。創(chuàng)面應用rhCTGF創(chuàng)面愈合率第4天為(36.4±6.3)%、8天為(81.6±5.8)%、12天為(92.2±5.3)%,分別高于對照組的(30.3±5.6)%、 (69.8±4.7)%和(85.3±5.2)%(P0.05)。應用CTGF抗體創(chuàng)面愈合率第8天和12天時分別為(58.6±6.9)%和(76.8±6.9)%,低于對照組(P0.05),但第4天時與對照組相同(P0.05)。2、深側(cè)創(chuàng)面各時間點CTGF的表達均高于淺側(cè)創(chuàng)面(P0.05)。淺深兩側(cè)創(chuàng)面CTGF表達規(guī)律基本相同：第4天升高(P0.05),第8天達高峰(P0.05),第12天時開始下降,但深側(cè)創(chuàng)面仍高于正常組織(P0.05),而淺側(cè)創(chuàng)面則恢復正常。至第30天時創(chuàng)面中CTGF含量與正常皮膚組織相同(P0.05)。3、深側(cè)創(chuàng)面各時間點Ⅰ型膠原蛋白的表達均高于淺側(cè)創(chuàng)面(P0.05)。淺深兩側(cè)創(chuàng)面Ⅰ型膠原蛋白12天內(nèi)表達規(guī)律基本相同：第4天升高(P0.05),第8天達高峰(P0.05),第12天時開始下降,但第30天時深側(cè)創(chuàng)面表達再次升高(P0.05),但淺側(cè)創(chuàng)面卻未升高(P0.05)。創(chuàng)面應用rhCTGF后各時間點Ⅰ型膠原蛋白表達分別高于對照組(P0.05),而創(chuàng)面應用CTGF抗體后各時間點Ⅰ型膠原蛋白表達分別低于對照組(P0.05)4、深側(cè)創(chuàng)面各時間點Ⅲ型膠原蛋白的表達均低于淺側(cè)創(chuàng)面(P0.05)。淺側(cè)創(chuàng)面Ⅲ型膠原蛋白自傷后第4天起持續(xù)升高(P0.05)；深側(cè)創(chuàng)面Ⅲ型膠原蛋白表達：第4天升高(P0.05),第8天達高峰(P0.05),此后逐漸下降(P0.05),但第30天時仍高于正常皮膚(P0.05)。創(chuàng)面應用rhCTGF后各時間點Ⅲ型膠原蛋白表達分別高于對照組(P0.05),而創(chuàng)面應用CTGF抗體后各時間點Ⅲ型膠原蛋白表達分別低于對照組(P0.05)。5、深側(cè)創(chuàng)面各時間點Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白比例均高于淺側(cè)創(chuàng)面(P0.05)。淺深兩側(cè)創(chuàng)面Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白比例12天內(nèi)表達規(guī)律基本相同：第4天升高(P0.05),第8天達高峰(P0.05),第12天時開始下降(P0.05),但第30天時深側(cè)創(chuàng)面表達再次升高(P0.05),而淺側(cè)創(chuàng)面卻未升高(P0.05)。創(chuàng)面應用rhCTGF后各時間點Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白比例分別高于對照組(P0.05),而創(chuàng)面應用CTGF抗體后各時間點Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白比例分別低于對照組(P0.05)結(jié)論1、瘢痕愈合的兔耳深側(cè)創(chuàng)面CTGF、Ⅰ型膠原蛋白的表達和Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白比例高于再生愈合的淺側(cè)創(chuàng)面,而Ⅲ型膠原蛋白的表達則深側(cè)創(chuàng)面低于淺側(cè)創(chuàng)面；2、CTGF可促進兔耳皮膚創(chuàng)面愈合并上調(diào)Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白的表達和Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白比例升高。
【關(guān)鍵詞】：CTGF 膠原蛋白 再生 瘢痕愈合
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R622
【目錄】：

• 中文摘要3-6
• Abstract6-11
• 英文縮略詞11-12
• 前言12-15
• 材料和方法15-21
• 1. 實驗材料15-16
• 1.1. 實驗動物15
• 1.2 實驗材料15
• 1.3 實驗主要試劑15
• 1.4 實驗主要儀器15-16
• 1.5 實驗配制16
• 2 實驗方法16-21
• 2.1 兔耳瘢痕再生一體化模型建立16-17
• 2.2 創(chuàng)面干預17
• 2.3 標本收集17-18
• 2.4 病理切片制作18-19
• 2.5 HE染色19
• 2.6 免疫組化19-20
• 2.7 圖像分析20
• 2.8 統(tǒng)計學分析20-21
• 結(jié)果21-40
• 1 一般情況21
• 2 創(chuàng)面愈合形態(tài)學觀察21-23
• 3 組織學觀察23-25
• 4 創(chuàng)面CTGF、Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白的表達25-40
• 4.1 CTGF表達深側(cè)創(chuàng)面高于淺側(cè)創(chuàng)面25-26
• 4.2 Ⅰ型膠原蛋白表達深側(cè)創(chuàng)面高于淺側(cè)創(chuàng)面26-28
• 4.3 Ⅲ型膠原蛋白表達深側(cè)創(chuàng)面低于淺側(cè)創(chuàng)面28-31
• 4.4 Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白表達深側(cè)創(chuàng)面低于淺側(cè)創(chuàng)面31
• 4.5 創(chuàng)面愈合率：CTGF組>對照組〉CTGF抗體組31-40
• 討論40-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻44-47
• 綜述47-53
• 參考文獻50-53
• 在學期間的研究成果53-54
• 致謝54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 向小燕,岑瑛;結(jié)締組織生長因子與病理性瘢痕[J];西部醫(yī)學;2005年02期

，

本文編號：942654