本文關(guān)鍵詞：兔脛骨延長對半月板病理組織學影響的實驗研究

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【摘要】：目的使用自行設(shè)計的微型外固定架行兔脛骨截骨肢體延長,觀察在不同延長長度和不同礦化時間對半月板的病理組織學的影響,為認識及預防肢體延長過程中的半月板的并發(fā)癥提供理論基礎(chǔ)。方法40只成年實驗用白兔,重量2.5-3.0Kg,隨機挑選入組,對照組4只,實驗組36只。A組為對照組(僅截骨不延長,截骨后延長開始前進行取材);實驗組按照不同延長長度隨機分為B組(延長1cm,約為肢體長度10%),C組(延長2cm組,約為肢體長度20%),D組(延長3cm組,約為肢體長度30%);各組內(nèi)根據(jù)礦化期不同時間各分為3個亞組,即延長終止日(礦化期0天),延長終止后30日(礦化期30天),和延長終止后60日(礦化期60天),共3個時間點,每組各4只動物。兔麻醉下行右脛骨近端截骨自制外固定架固定術(shù)。術(shù)后自由活動,抗生素使用3-5天。截骨后第6日進行延長,以1mm/2-3次/天的速度均勻延長兔脛骨,根據(jù)分組相應延長1、2、3cm。相應時間點分別取材內(nèi)側(cè)半月板,取材前拍攝實驗側(cè)正位X片,觀察脛骨延長區(qū)的骨痂生成及重塑愈合、骨延長長度、膝關(guān)節(jié)間隙及關(guān)節(jié)是否脫位等。取材的組織放入盛有10%福爾馬林液的封閉容器內(nèi),制備石蠟包埋切片進行甲苯胺藍染色、蘇木精-伊紅(HE)染色和Ⅱ型膠原的免疫組化染色,觀察半月板的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化、軟骨細胞組織學改變及蛋白多糖分泌情況,檢測半月板內(nèi)Ⅱ型膠原在延長期、礦化期不同時相的表達情況。結(jié)果1、順利完成兔脛骨截骨延長步驟。X線示截骨端之間的距離隨著延長期進展而增大;延長區(qū)的骨痂影響隨礦化期延長逐漸密度增高,后期可見骨痂愈合,肢體整體力線正常;各組均達到相應的延長長度、延長幅度越大關(guān)節(jié)間隙減小越明顯,其余未見異常。2、大體觀察:A組(正常對照組):正常膝關(guān)節(jié)半月板為白色半透明狀,質(zhì)韌有彈性,表面光滑。B組半月板與對照組相比無明顯改變,半月板向周邊輕微位移,C組半月板外觀稍蒼白,游離緣可見輕微磨損,彈性變差,表面可見輕微壓縮痕跡和劃痕,光澤欠均勻,與脛骨平臺關(guān)節(jié)軟骨無明顯粘連,向脛骨平臺周圍明顯移動。D組半月板顏色灰白,表面有劃痕,明顯向周邊移動,邊緣毛糙且厚度變薄,滑膜輕度增生及粘連,半月板與脛骨平臺無明顯粘連。3、隨著延長幅度增加,半月板內(nèi)的陷窩中細胞失去正常形態(tài)、軟骨陷窩減小,半月板的膠原纖維排列松散紊亂,并有部分纖維發(fā)生中斷。在延長1、2cm組,隨礦化時間延長,軟骨的形態(tài)有一定恢復,半月板內(nèi)纖維排列無明顯變化。延長3cm組,軟骨細胞退化更加明顯,隨礦化時間延長,軟骨細胞未見恢復跡象,半月板內(nèi)纖維排列更加松散,纖維中斷現(xiàn)象增加且無明顯恢復跡象。4、甲苯胺藍染色及Ⅱ型膠原免疫組化染色:各組半月板內(nèi)軟骨細胞周圍的甲苯胺藍染色及Ⅱ型膠原免疫組織化學染色均呈現(xiàn)隨著延長幅度增加染色范圍減小,染色程度降低,在延長停止后隨礦化期延長均逐步加深,延長1、2cm組在礦化期時染色范圍逐步擴大,深染程度增加,甚至高于正常,染色程度逐步恢復;延長3cm組,染色范圍及深染程度持續(xù)處于低水平并且恢復較慢。結(jié)論1、使用自行設(shè)計的單臂外固定架輔助延長兔肢體的模型,能很好的模擬臨床中人體肢體延長的過程,其膝關(guān)節(jié)生物力學與人體相似,可獲得可靠實驗數(shù)據(jù)。2、半月板在肢體延長過程中現(xiàn)不同程度的病理組織學改變,低幅度肢體延長時,半月板損傷較小,軟骨細胞退化不明顯,纖維排列較緊密。隨著延長幅度增加半月板形態(tài)結(jié)構(gòu)損傷明顯加重,軟骨細胞退化明顯,膠原排列更加紊亂。3、在適當長度內(nèi)緩慢肢體延長導致膝關(guān)節(jié)內(nèi)半月板的損害是暫時而可逆的,停止損傷行為后,損傷的半月板可通過軟骨細胞自身分泌調(diào)節(jié)得到一定程度的修復;而當延長幅度較大,損傷較重時半月板病理組織學損傷恢復困難。
【關(guān)鍵詞】：牽拉成骨 兔脛骨 肢體延長 半月板 病理改變
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R687.3
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語/符號說明11-12
• 前言12-14
• 研究現(xiàn)狀、成果12
• 研究目的、方法12-14
• 1. 對象和方法14-24
• 1.1 實驗模型的選擇及分組14
• 1.1.1 實驗動物選擇14
• 1.1.2 實驗分組14
• 1.2 主要實驗材料14-17
• 1.2.1 實驗動物及主要試劑14-15
• 1.2.2 試劑的配制方法15
• 1.2.3 主要的設(shè)備15-16
• 1.2.4 實驗器械16-17
• 1.3 實驗模型的制備17-20
• 1.3.1 實驗術(shù)前準備17
• 1.3.2 手術(shù)過程17-19
• 1.3.3 術(shù)后處理19
• 1.3.4 注意事項19-20
• 1.4 取材20-21
• 1.5 觀察指標21-24
• 1.5.1 X線觀察21
• 1.5.2 大體觀察21
• 1.5.3 切片的制作和觀察21-24
• 2.結(jié)果24-33
• 2.1 術(shù)后結(jié)果和并發(fā)癥24
• 2.2 大體觀察結(jié)果24-25
• 2.3 Ｘ線檢查結(jié)果25-26
• 2.4 光鏡結(jié)果26-29
• 2.4.1 HE染色26-29
• 2.4.2 甲苯胺藍染色29
• 2.5 II型膠原免疫組化染色結(jié)果29-33
• 3.討論33-41
• 3.1 肢體延長實驗動物和實驗器械的選擇及建造33-35
• 3.2 兔半月板的基本結(jié)構(gòu)和功能35
• 3.3 半月板的組織學特征35-37
• 3.4 肢體延長中半月板的病理變化37-41
• 結(jié)論41-42
• 參考文獻42-46
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明46-47
• 綜述 應用牽張成骨技術(shù)延長下肢過程中對膝關(guān)節(jié)影響的研究進展47-63
• 綜述參考文獻56-63
• 致謝63

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張東龍,高順生,章曉霜;膝關(guān)節(jié)半月板的形態(tài)學研究進展及其臨床意義[J];北京體育師范學院學報;1999年02期

2 毛賓堯;劉洪濤;;脛、股骨內(nèi)壓與膝關(guān)節(jié)疼痛關(guān)系的研究和治療方法探討[J];骨與關(guān)節(jié)損傷雜志;1992年04期

3 張新,王宇,吳其常,王春禹;變速肢體延長與肌肉損傷[J];中國矯形外科雜志;2002年12期

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本文編號：908955