本文關(guān)鍵詞：針刺不同經(jīng)穴對(duì)心肌缺血大鼠大腦皮質(zhì)區(qū)NGF、TrkA表達(dá)影響的研究

  更多相關(guān)文章： 心肌缺血 NGF Trk A 腦損傷 電針 心俞穴 神門穴 心主神明

【摘要】：目的:通過觀察電針心經(jīng)原穴“神門”、小腸經(jīng)絡(luò)穴“支正”和“心俞”穴對(duì)心肌缺血大鼠模型大腦皮質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)生長因子(NGF)及其受體酪氨酸激酶A(Trk A)表達(dá)的影響,比較針刺不同經(jīng)穴抗心肌缺血腦損傷的差異性,并探討針刺對(duì)心肌缺血腦保護(hù)作用的效應(yīng)機(jī)制。以期為“心主神明”理論及經(jīng)穴效應(yīng)的差異性提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),為臨床診治心功能不全引起的腦功能損傷探索新的治療途徑,并為臨床選穴提供參考依據(jù)。方法:選擇健康雄性SD大鼠80只,體重為220±20g,分籠飼養(yǎng),隨機(jī)選取其中10只作為假手術(shù)對(duì)照組,其余70只在乙醚麻醉狀態(tài)下采用左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎法復(fù)制急性心肌缺血大鼠模型,并采用Powerlab多導(dǎo)生理記錄儀記錄其心電圖的變化,最后將模型復(fù)制成功的大鼠隨機(jī)分為模型組、電針“神門”組和電針“支正”組,電針“心俞”組,每組15只。各電針組刺激電流為1 m A,頻率為2 Hz,每次刺激15 min,進(jìn)行電針治療。電針結(jié)束后,對(duì)各組大鼠行斷頭處死,開顱取出完整的腦組織,在冰塊上分離出大腦皮質(zhì)部分,分別對(duì)各組大鼠大腦皮質(zhì)采用免疫組化方法和熒光定量PCR技術(shù)檢測其皮質(zhì)中NGF及其受體Trk A的表達(dá)。采用Spass17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析,比較各組大鼠大腦皮質(zhì)NGF及其受體Trk A表達(dá)的差異。結(jié)果:(1)Powerlab心電圖與假手術(shù)組比較,造模后大鼠心率顯著性下降,ST段顯著性抬高,T波倒置,顯示心肌缺血模型復(fù)制成功。(2)免疫組化檢測電針“支正”、“神門”、“心俞”對(duì)大鼠大腦皮質(zhì)NGF及其受體Trk A的表達(dá)結(jié)果①與假手術(shù)組比較,模型組大鼠大腦皮質(zhì)NGF及其受體Trk A的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但陽性細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞數(shù)目高于假手術(shù)組;②與模型組比較:各針刺治療組的陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)目與模型組比較有顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,P0.01);③治療組組間比較:與支正組比較,神門組表達(dá)數(shù)目增多,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),心俞組與支正組比較表達(dá)數(shù)目增多,差異顯著(P0.01),心俞組與神門組比較表達(dá)增多,有顯著性差異(P0.05);(3)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測電針“支正”、“神門”、“心俞”對(duì)大鼠大腦皮質(zhì)中NGFm RNA、Trk Am RNA的基因表達(dá)的結(jié)果①樣本熔解曲線為單一峰,無非特異性熒光,樣本擴(kuò)增曲線整體平行性好,拐點(diǎn)清楚,指數(shù)期明顯、陡度大,基線平而無上揚(yáng)現(xiàn)象,表明反應(yīng)模板無污染,定量準(zhǔn)確,結(jié)果可信。②各組相對(duì)表達(dá)量比較總體與免疫組化檢測結(jié)果一致,與假手術(shù)組比較,模型組大鼠大腦皮質(zhì)NGFm RNA及其受體Trk Am RNA的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但陽性細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞數(shù)目高于假手術(shù)組;與模型組比較:各針刺治療組的陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)目與模型組比較有顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,P0.01);治療組組間比較:與支正組比較,神門組表達(dá)量高于支正組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),心俞組與支正組比較表達(dá)增多,差異顯著(P0.01),心俞組與神門組比較表達(dá)增多,有顯著性差異(P0.05);結(jié)論:⑴電針不同經(jīng)穴能夠提高急性心肌缺血大鼠大腦皮質(zhì)中神經(jīng)生長因子(NGF)及其受體酪氨酸激酶A(Trk A)的含量水平;并且對(duì)其調(diào)節(jié)作用具有相對(duì)特異性,電針“心俞”穴的調(diào)整作用明顯優(yōu)于心經(jīng)原穴“神門”和小腸經(jīng)絡(luò)穴“支正”,而電針“神門”穴優(yōu)于電針“支正”穴,但無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;⑵通過提高腦細(xì)胞中神經(jīng)生長因子(NGF)及其受體酪氨酸激酶A(Trk A)的含量,可能是針刺抗心肌缺血造成腦損傷的作用機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：心肌缺血 NGF Trk A 腦損傷 電針 心俞穴 神門穴 心主神明
【學(xué)位授予單位】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R245
【目錄】：

• 一．中文摘要7-9
• 二、ABSTRACT9-12
• 三．縮略詞中英文對(duì)照表12-13
• 四．前言13-16
• 五．實(shí)驗(yàn)研究16-41
• 1 材料16-17
• 1.1 動(dòng)物16
• 1.2 試劑16
• 1.3 儀器與材料16-17
• 2 方法17-22
• 2.1 動(dòng)物選擇及分組17-18
• 2.2 動(dòng)物模型的復(fù)制18
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法18-19
• 2.3.1 穴位的選取與定位18
• 2.3.2 電針方法18-19
• 2.3.3 各組動(dòng)物處理19
• 2.3.4 標(biāo)本采集19
• 2.6 觀察指標(biāo)及檢測方法19-21
• 2.6.1 免疫組化染色觀察分析NGF、TRKA的表達(dá)19
• 2.6.2 熒光定量PCR檢測NGF、、TRKA基因的表達(dá)19-21
• 2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法21-22
• 2.8 技術(shù)路線圖22
• 3 結(jié)果22-29
• 3.1 POWERLAB心電圖結(jié)果22-24
• 3.2 各組大鼠免疫組化檢測結(jié)果24-25
• 3.4 各組大鼠熒光定量定量PCR檢測結(jié)果25-29
• 3.4.1 擴(kuò)增曲線25-27
• 3.4.2 溶解曲線27-28
• 3.4.3 相對(duì)表達(dá)量28-29
• 4 討論29-38
• 4.1 對(duì)心肌缺血的相關(guān)認(rèn)識(shí)29-31
• 4.1.1 祖國醫(yī)學(xué)對(duì)心肌缺血的認(rèn)識(shí)29-30
• 4.1.2 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)心肌缺血的認(rèn)識(shí)30-31
• 4.2 心肌缺血與腦損傷31-32
• 4.3 針灸治療心肌缺血的研究概況32-33
• 4.4 穴位特異性研究進(jìn)展33-34
• 4.5 神經(jīng)生長因子NGF的研究背景34-35
• 4.6 熒光定量PCR檢測技術(shù)簡介35-36
• 4.7 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)依據(jù)36-37
• 4.7.1 心肌缺血的動(dòng)物模型的選取36
• 4.7.2 穴位選取依據(jù)36-37
• 4.7.3 觀察指標(biāo)的選取37
• 4.8 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析37-38
• 4.8.1 電針“支正”、“神門”、“心俞”對(duì)大鼠大腦皮質(zhì)NGF及其受體TRKA的影響37
• 4.8.2 電針“支正”、“神門”、“心俞”對(duì)大鼠大腦皮質(zhì)中NGF、TRKA的基因表達(dá)的影響37-38
• 5 結(jié)論38
• 6 啟示與展望38-41
• 6.1 啟示與展望38-39
• 6.2 創(chuàng)新39-41
• 六．參考文獻(xiàn)41-48
• 七．綜述48-55
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 八．個(gè)人簡介55-56
• 九．攻讀學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文和參與課題情況56-57
• 十．致謝57

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：864065