本文關(guān)鍵詞：TGF-β1和EGFP體外電轉(zhuǎn)化兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： TGF-β1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 電轉(zhuǎn)染 Ⅱ型膠原

【摘要】：目的:通過電轉(zhuǎn)化法介導(dǎo)轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)和EGFP基因轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs),觀察Ⅱ型膠原蛋白表達(dá)情況。方法:取3只1周齡清潔級(jí)健康新西蘭大白兔,麻醉后處死,無菌條件下取出脛骨及股骨,暴露髓腔沖出骨髓,應(yīng)用全骨髓細(xì)胞貼壁培養(yǎng)法分離、培養(yǎng)出兔的BMSCs;流式細(xì)胞儀法檢測(cè)細(xì)胞表型;將培養(yǎng)獲得的BMSCs分3組:TGF-β1+EGFP共轉(zhuǎn)染組,EGFP單獨(dú)轉(zhuǎn)染組,空白對(duì)照組。利用電轉(zhuǎn)化技術(shù)將TGF-β1和EGFP對(duì)BMSCs進(jìn)行轉(zhuǎn)染,熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效果,繼續(xù)培養(yǎng)至14d[1],應(yīng)用免疫組化法和western blot法分別檢測(cè)Ⅱ型膠原表達(dá)情況。結(jié)果:成功分離并培養(yǎng)出BMSCs,經(jīng)流式細(xì)胞儀鑒定其細(xì)胞表型CD90和CD44表達(dá)為陽性,CD31和CD45表達(dá)為陰性;成功轉(zhuǎn)染TGF-β1至BMSCs后;通過免疫組化檢測(cè)TGF-β1組細(xì)胞內(nèi)(0.4870±0.0181)Ⅱ型膠原有較強(qiáng)的表達(dá),與EGFP組(0.0858±0.0097)及空白對(duì)照組(0.0805±0.0098)相比較有顯著差異性(P0.05)。western blot檢測(cè)TGF-β1組細(xì)胞內(nèi)(0.320 0±0.006 7)Ⅱ型膠原有較強(qiáng)的表達(dá),與EGFP組(0.2012±0.007 4)及空白對(duì)照組(0.1964±0.0041)相比較有顯著差異性(P0.05)。結(jié)論:電轉(zhuǎn)TGF-β1質(zhì)粒至兔BMSCs,能促進(jìn)Ⅱ型膠原高效表達(dá),進(jìn)而可以為進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：TGF-β1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 電轉(zhuǎn)染 Ⅱ型膠原
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R681.53
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• ABSTRACT5-6
• 英漢縮略詞對(duì)照表6-7
• 前言7-10
• 1 材料與方法10-20
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物10
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑及材料10-12
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法12-19
• 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析19-20
• 2 結(jié)果20-24
• 3 討論24-30
• 4 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-36
• 綜述（TGF-β1 修復(fù)退變椎間盤相關(guān)研究進(jìn)展）36-44
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄44-45
• 致謝45-46

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 夏萬堯;王毅敏;劉偉;丁文龍;鐘梅芳;周廣東;崔磊;曹誼林;;重組hTGF-β1基因轉(zhuǎn)染的BMSCs在體內(nèi)成軟骨能力的初步研究[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2010年04期

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本文編號(hào)：816925