本文關(guān)鍵詞：還少丹對雌、雄老齡大鼠抗衰老作用的探究

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【摘要】：中醫(yī)學(xué)因其獨特的理論體系,在抗衰老領(lǐng)域占重要位置。很多學(xué)者開始對中醫(yī)抗衰老古方進行研究和重新利用。但中藥復(fù)方的抗氧化、抗衰老機制研究仍然欠深刻,有很多未知需要探討。本文試圖以復(fù)方中藥“還少丹”為試驗藥物,分別在細胞和動物水平探究還少丹抗氧化、抗衰老的作用。細胞水平:取4月齡SPF級(Specific pathogen Free,SPF)SD大鼠(Sprague Dawley)14只(雌、雄各半),制備大鼠血清,即載還少丹血清(載藥血清)和大鼠空白血清;載藥血清、空白血清、胎牛血清以及含有維生素C(VC)的載藥血清和胎牛血清分別用于配制相應(yīng)的培養(yǎng)基,用于體外培養(yǎng)成骨細胞(Rat osteoblast,ROBs);分別檢測不同培養(yǎng)環(huán)境中ROBs的增殖、周期及mTOR(Mammalian target of rapamyein)的表達量,以期探討還少丹對ROBs的作用。動物水平:取20月齡SPF級SD大鼠28只(雌、雄各半),隨機分為雄性對照組(MC)、雄性還少丹組(MH)、雌性對照組(FC)、雌性還少丹組(FH);給還少丹組灌胃還少丹水溶液,對照組灌胃等量的無菌水,每天灌胃一次,每7天稱重一次,并記錄;第60天,一次灌兩倍劑量的還少丹,末次灌胃1.5-2 h后,腹腔注射戊巴比妥鈉,等深度麻醉時:(1)從心臟取血制備血清,檢測血清中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase SOD)的活性和丙二醛(Malondialdehyde MDA)的含量;(2)依次打開胸腔、腹腔和顱腔,依次取出心、肝、脾、肺、腎、胃、胰、腦等,迅速放入冰生理鹽水中清洗,用濾紙吸干生理鹽水后稱重、記錄,以大鼠臟器重(g)/體重(100 g),計算各臟器系數(shù);(3)分別稱取大鼠肝臟和大腦0.1 g(5份),按10%(W:V)加入生理鹽水,超聲破碎肝和腦組織,制備10%組織勻漿,然后離心并取上清檢測肝臟及腦中SOD的活性和MDA的含量;(4)把心、肝、脾、腎、胃、腦組織置于4%甲醛中固定,做石蠟切片并HE染色(hematoxylin-eosin staining),光學(xué)顯微鏡下觀察臟器形態(tài)。實驗結(jié)果表明:在細胞水平,還少丹有促進ROBs增殖、增加mTOR表達量、調(diào)控細胞周期的作用。在動物水平,還少丹對老齡SD大鼠的體重沒有影響;還少丹能顯著提高雄性的臟器系數(shù)而對雌性臟器系數(shù)作用不明顯;還少丹顯著增強了雄性血清、肝臟及腦中SOD的活性并同時降低MDA的含量;但對于雌性,SOD的活性在血清、肝臟和腦勻漿中均沒有顯著變化,也僅在血清中檢測到MDA含量的顯著降低;從組織切片染色的結(jié)果可以看出,還少丹有保持臟器處于年輕形態(tài)的趨勢�？傮w地,還少丹有抗氧化、抗衰老的作用,而且存在性別差異。因此建議,在中藥抗衰老的研究中應(yīng)把性別因素列為考察內(nèi)容。
【關(guān)鍵詞】：成骨細胞 老齡SD大鼠 還少丹 抗衰老 性別
【學(xué)位授予單位】：重慶大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• 英文摘要5-7
• 主要縮略詞7-11
• 1 緒論11-19
• 1.1 問題的提出11-13
• 1.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀13-16
• 1.2.1 古方還少丹配方13-14
• 1.2.2 中藥的研究現(xiàn)狀14
• 1.2.3 抗衰老的研究現(xiàn)狀14-16
• 1.3 研究思路及主要研究內(nèi)容16-17
• 1.3.1 研究思路16-17
• 1.3.2 主要內(nèi)容17
• 1.4 本文的創(chuàng)新點17-19
• 2 大鼠顱骨成骨細胞的分離、純化、培養(yǎng)及鑒定19-24
• 2.1 引言19
• 2.2 實驗部分19-21
• 2.2.1 實驗試劑和儀器19-20
• 2.2.2 成骨細胞的分離、培養(yǎng)及純化20
• 2.2.3 成骨細胞形態(tài)觀察20
• 2.2.4 茜素紅染色法鑒定成骨細胞20-21
• 2.3 實驗結(jié)果21-22
• 2.3.1 成骨細胞形態(tài)觀察21-22
• 2.3.2 茜素紅染色22
• 2.4 討論22-23
• 2.5 本章小結(jié)23-24
• 3 載藥血清的制備24-30
• 3.1 引言24
• 3.2 實驗部分24-26
• 3.2.1 實驗試劑和儀器24-25
• 3.2.2 灌胃條件的選擇25
• 3.2.3 載藥血清的制備25-26
• 3.3 實驗結(jié)果26-28
• 3.4 討論28-29
• 3.5 本章小結(jié)29-30
• 4 載藥血清對SD大鼠乳鼠成骨細胞的生物學(xué)效應(yīng)30-40
• 4.1 引言30
• 4.2 實驗部分30-34
• 4.2.1 實驗材料30-31
• 4.2.2 還少丹對成骨細胞增殖能力的影響31-32
• 4.2.3 還少丹對體外培養(yǎng)細胞mTOR表達量的影響32-33
• 4.2.4 還少丹對細胞周期影響的研究33-34
• 4.3 實驗結(jié)果34-37
• 4.3.1 還少丹對成骨細胞增殖能力影響的結(jié)果34-35
• 4.3.2 胞內(nèi)mTOR的western blot檢測結(jié)果35-36
• 4.3.3 不同培養(yǎng)環(huán)境中細胞周期的變化36-37
• 4.4 討論37-38
• 4.5 本章小結(jié)38-40
• 5 還少丹對老齡SD大鼠抗衰老作用的研究40-51
• 5.1 引言40-41
• 5.2 實驗部分41-44
• 5.2.1 實驗材料41
• 5.2.2 SD大鼠稱重41-42
• 5.2.3 計算老齡SD大鼠的臟器系數(shù)42
• 5.2.4 血清、肝和大腦組織勻漿中的SOD、MDA含量42-43
• 5.2.5 切片43-44
• 5.3 實驗結(jié)果44-49
• 5.3.1 還少丹對老齡SD大鼠體重的影響44-45
• 5.3.2 還少丹對大鼠臟器系數(shù)的影響45
• 5.3.3 HSD對老齡SD大鼠血清、肝臟和腦中SOD活力及MDA含量的影響45-46
• 5.3.4 還少丹對器官組織形態(tài)學(xué)的影響46-49
• 5.4 討論49-50
• 5.5 本章小結(jié)50-51
• 6 結(jié)論及后續(xù)工作建議51-54
• 6.1 結(jié)論51-52
• 6.2 未來工作的展望52-54
• 致謝54-55
• 參考文獻55-63
• 附錄63
• A 作者在攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文63
• B 作者在攻讀學(xué)位期間參加的科研項目63

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1 俞中元;返老回春還少丹[J];養(yǎng)生月刊;2003年03期

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1 王S茍

本文編號：816267