本文關(guān)鍵詞：苦參素對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎大鼠軸索損傷的改善作用

  更多相關(guān)文章： 苦參素 實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎 多發(fā)性硬化癥 軸索損傷

【摘要】：目的:觀察苦參素(Matrine,MAT)對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠臨床癥狀、組織病理學(xué)的影響,分析大鼠發(fā)病過程中的β-淀粉樣蛋白(β-Amyloid,Aβ),β分泌酶(B-site APP cleaving enzyme 1,BACE-1),髓磷脂堿性蛋白(Myelin basic protein,MBP),S100B蛋白(S100B protein,S100B),神經(jīng)元特異烯醇化酶(neuron specificenolase,NSE),腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表達(dá)的變化,探究苦參素對EAE軸索損傷的防治效果及作用機(jī)制,旨在為多發(fā)性硬化癥新的用藥思路。方法:1建立EAE模型:在無菌條件下,完全弗氏佐劑(含6mg/ml卡介苗)與豚鼠的脊髓勻漿(guinea pig spinal cord homogenate,GPSCH),等體積混合,使用三通連接注射器,反復(fù)抽吸制備油包水型抗原乳劑作為抗原,給予30只雌性Wistar大鼠(6~8周齡)背部皮內(nèi)選取四點(diǎn)抗原乳劑誘導(dǎo)EAE模型。自免疫當(dāng)天起,觀察并記錄大鼠體重變化、活動能力變化、臨床癥狀及神經(jīng)功能學(xué)評分。2分組及給藥:選取40只Wistar大鼠,隨機(jī)分為四組,選取3組,分別標(biāo)記為:EAE組(EAE)、MAT組(MAT)、甲強(qiáng)龍組(MET),每組10只。同時(shí)有10只健康大鼠作為對照組(Normal)。從免疫當(dāng)天起,四組大鼠分別給予不同干預(yù)措施,其中MAT組每日腹腔注射注射苦參素3.3ml/kg(200mg/kg),MET組每日腹腔注射甲強(qiáng)龍3.3ml/kg(1mg/kg),正常對照組和模型組腹腔注射等量生理鹽水,四組大鼠均連續(xù)干預(yù)16天。3標(biāo)本采集:在免疫第17天,應(yīng)用10%水合氯醛麻醉后,眼眶后取血2ml,制血清備用;預(yù)冷生理鹽水全身灌流完全后,打開大鼠顱腔,取大鼠左腦標(biāo)本,用于制作石蠟切片,取右腦立即投入液氮留存?zhèn)溆谩?相關(guān)指標(biāo)檢測:皮爾蘇斯基氏染色(Bielschowsky staining)染色和蘇木素-伊紅(HE)染色和觀察炎性細(xì)胞浸潤及脫髓鞘情況,免疫組織化學(xué)法分析Aβ表達(dá),雙夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)檢測MBP表達(dá)、S100B表達(dá)、NSE表達(dá)水平,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR法)分析BACE-1 m RNA、BDNF m RNA含量。結(jié)果:1發(fā)病率情況:每組動物中,未觀察到正常組大鼠發(fā)病,觀察到模型組10只全部發(fā)病,觀察到MAT組有6只發(fā)病,MET組有4只發(fā)病。Fisher確切概率分析結(jié)果示:Normal組發(fā)病率顯著低于EAE組(P0.05);MAT組、MET組大鼠發(fā)病率均低于EAE組,且之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2體重變化情況:Normal組大鼠自免疫第2天起平均體重上升,其余三組平均體重總體上均呈現(xiàn)下降趨勢。MAT組體重降低幅度顯著低于模型組(P0.05),亦低于甲強(qiáng)龍組(P0.05)。3神經(jīng)功能學(xué)評分:本試驗(yàn)中Normal組神經(jīng)評分一直穩(wěn)定為0。免疫第17天,EAE組大鼠評分顯著高于MAT組和MET組(P0.05)。MAT組和MET組組間平均評分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4組織病理學(xué)檢查情況:EAE組平均炎癥浸潤評分較正常對照組明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。MAT組平均炎癥浸潤評分顯著低于EAE組(P0.05),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與MAT組相比,MET組平均炎癥浸潤評分顯著性降低(p0.05),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。EAE組平均軸索損傷評分較Normal組明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。MAT組均軸索損傷評分顯著低于EAE組(P0.05),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與MAT組相比,MET組均軸索損傷評分顯著性降低(p0.05)。5大腦中BACE-1,BDNF m RNA的表達(dá):與Normal組相比,EAE組BDNF,m RNA含量顯著性降低(P0.05)。MAT組BDNF m RNA表達(dá)均較EAE組明顯升高(P0.05),MAT組與MET組在BACE-1,BDNF m RNA表達(dá)方面均無顯著性差異(P0.05)。6大腦皮質(zhì)Aβ表達(dá):與正常對照組相比,EAE組Aβ含量顯著升高(P0.05);兩個藥物干預(yù)組Aβ表達(dá)均較模型組顯著性降低(P0.05),組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。7血清中MBP,S100B,NSE水平:與Normal組相比,EAE組大鼠血清中MBP,S100B,NSE含量明顯升高(P0.05)。MAT干預(yù)組MBP,S100B,NSE水平均較EAE組顯著性降低(P0.05),MET組在抑制S100B病理性升高方面優(yōu)于MAT組,差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:苦參素對Wistar大鼠EAE軸索損傷具有較好的改善作用。
【關(guān)鍵詞】：苦參素 實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎 多發(fā)性硬化癥 軸索損傷
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-11
• 英文縮略詞表11-12
• 1 前言12-14
• 2 材料和方法14-28
• 2.1 材料14-18
• 2.2 方法18-26
• 2.3 統(tǒng)計(jì)分析26-28
• 3 結(jié)果28-42
• 3.1 發(fā)病情況28-31
• 3.2 組織病理學(xué)結(jié)果31-34
• 3.3 MAT對EAE大鼠生化指標(biāo)的檢測34-42
• 4 討論42-46
• 4.1 苦參素對EAE大鼠的防治作用42-43
• 4.2 苦參素對EAE大鼠防治作用的機(jī)制探討43-45
• 4.3 苦參素與甲強(qiáng)龍治療EAE的比較45-46
• 5 結(jié)論46-47
• 參考文獻(xiàn)47-52
• 綜述52-63
• 參考文獻(xiàn)59-63
• 個人簡歷63-64
• 致謝64

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳同度,張昌穎;素食大鼠的貧血現(xiàn)象[J];營養(yǎng)學(xué)報(bào);1957年04期

2 陳偉強(qiáng);趙善廣;;自制注射用大鼠固定裝置[J];上海實(shí)驗(yàn)動物科學(xué);1992年04期

3 肖柳英,林培英,馮昭明,張丹;不同周齡的SD大鼠生理、生化及體重的正常值測定[J];中藥新藥與臨床藥理;1996年03期

4 李淑云;簡易大鼠灌胃器的制作[J];錦州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2001年04期

5 楊明智,陳積圣;一種大鼠抓取與固定的新工具介紹[J];上海實(shí)驗(yàn)動物科學(xué);2001年03期

6 戴英,陸群;復(fù)方H_(505)對Wistar大鼠外周血的血液流變學(xué)指標(biāo)的影響[J];中國血液流變學(xué)雜志;2001年01期

7 韋應(yīng)波,孫喜慶,曹新生,姚永杰,馮岱雅,楊長斌;+Gz暴露時(shí)間對大鼠記憶功能和行為的影響[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2003年01期

8 呂學(xué)軍,郭俊生,李敏,周利梅,張永娟;暈船大鼠體內(nèi)鐵含量的變化[J];中國職業(yè)醫(yī)學(xué);2003年04期

9 湯仁仙,王迎偉,王慧,周峰;201A中藥合劑對大鼠抗腎小球基底膜腎炎病變的影響[J];徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年06期

10 孫同柱,付小兵,翁立新,梁雪梅,陳偉;介紹一種簡易的大鼠保定方法[J];上海實(shí)驗(yàn)動物科學(xué);2004年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 尹音;孫振宇;胡敏;李冬霞;;持續(xù)性高正加速度對大鼠顳頜關(guān)節(jié)損傷的作用[A];第八屆全國顳下頜關(guān)節(jié)病學(xué)及（牙合）學(xué)大會論文匯編[C];2011年

2 祝~=驤;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;，

本文編號：810534