本文關(guān)鍵詞：母體能量水平對梅山和約克夏胎豬及生后卵巢發(fā)育的影響

  更多相關(guān)文章： 梅山豬 約克夏豬 能量水平 卵巢 發(fā)育

【摘要】：卵巢發(fā)育與母豬的繁殖年限密切相關(guān),適當?shù)娘暭Z能量水平調(diào)控卵泡健康發(fā)育是保證母豬適時發(fā)情、受胎、并提高產(chǎn)仔數(shù)的基礎(chǔ)。原始卵泡作為卵巢發(fā)育的起點,在胎兒期已形成。為弄清胎兒期具有時間依賴性的功能蛋白對卵巢發(fā)育的作用及母體能量水平對胎豬卵巢發(fā)育的影響,本研究比較了梅山豬和約克夏豬胎兒卵巢發(fā)育以及其對母體飼糧能量水平敏感性的差異,并在此基礎(chǔ)上進一步研究了母體能量水平對后代(生前、生后)卵巢健康發(fā)育的影響,本研究包括以下三部分：試驗一梅山和約克夏胎豬卵巢發(fā)育的差異研究本試驗旨在比較梅山豬和約克夏豬胎兒卵巢發(fā)育過程中調(diào)控原始卵泡形成和轉(zhuǎn)化為次級卵泡時的關(guān)鍵蛋白表達。試驗分別選取日齡、體重相近的純種梅山(72.58±0.73kg)和約克夏(135.73±0.54kg)初產(chǎn)母豬各8頭,分別用同一頭純種梅山和約克夏公豬精液人工授精,配種后分別參照中國豬飼養(yǎng)標準(2004)和NRC(2012)配制梅山和約克夏母豬妊娠期飼糧。妊娠0-30天,每頭母豬每天飼喂2kg；31-90天,每天飼喂2.4kg。妊娠第55天每個品種隨機選擇4頭母豬深度麻醉后屠宰,剩余母豬于妊娠第90天屠宰,收集雌性胎豬卵巢,利用雙向熒光差異凝膠電泳結(jié)合質(zhì)譜分析的方法考察兩個品種卵巢蛋白表達差異。結(jié)果顯不：1.電泳結(jié)果：1)妊娠第55天,兩個品種胎兒卵巢有1551個差異蛋白點,約克夏較梅山胎豬卵巢共計14個蛋白上調(diào),13個蛋白下調(diào)(約克夏/梅山1.6,梅山/約克夏1.6,P0.05蛋白點27個)。2)妊娠第90天,兩個品種胎兒卵巢中存在1400個差異蛋白點,約克夏較梅山胎豬卵巢共計7個蛋白上調(diào),9個蛋白下調(diào)(約克夏/梅山1.6,梅山/約克夏1.6,P0.05蛋白點16個)。2.質(zhì)譜分析結(jié)果：1)妊娠第55天,約克夏胎豬卵巢表達上調(diào)蛋白主要參與原始卵泡組裝,如肌動蛋白、抗胰蛋白酶、波形蛋白；梅山胎豬卵巢表達上調(diào)蛋白為原始卵泡形成前的相關(guān)蛋白,如絲氨酸/蘇氨酸蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基1β、絲氨酸/蘇氨酸蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基1α等。2)妊娠第90天,約克夏胎豬卵巢表達上調(diào)的蛋白主要參與應激反應,如熱休克蛋白；梅山胎豬卵巢表達上調(diào)蛋白為調(diào)節(jié)原始卵泡向初級卵泡轉(zhuǎn)化相關(guān)的蛋白,如甲胎蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等。以上結(jié)果表明：梅山和約克夏胎豬卵巢發(fā)育過程中,梅山豬卵巢原始卵泡形成時間較晚,但是梅山胎豬于原始卵泡向初級卵泡轉(zhuǎn)化階段卵巢發(fā)育潛能優(yōu)于約克夏豬。試驗二母體能量水平對不同品種胎豬卵巢發(fā)育的影響本試驗旨在考察母體能量水平對約克夏豬和梅山豬胎兒卵巢發(fā)育的影響。試驗選取日齡、體重相近的純種約克夏(135.54±0.66kg)和梅山(72.84±0.66kg)初產(chǎn)母豬各16頭,分別用同一頭純種約克夏和梅山公豬精液人工授精,配種后約克夏母豬分別飼喂能量水平為3.4Mcal/kg、3.0Mcal/kg飼糧；梅山母豬飼喂能量水平為3.OMcal/kg、2.6Mcal/kg飼糧,飼喂量及飼喂方式同試驗一。妊娠第55,90天時,每組隨機選擇4頭母豬深度麻醉后屠宰,收集雌性胎豬卵巢,首先通過蛋白組學技術(shù),測定約克夏3.OMcal/kg組以及梅山2.6Mcal/kg組卵巢樣品,進而分析同一品種不同時間點卵巢發(fā)育差異蛋白,明確不同時間點特征性蛋白表達規(guī)律,并進一步考察能量水平對特征蛋白mRNA表達的影響。結(jié)果顯示：1.蛋白組學分析結(jié)果：1)約克夏豬妊娠第55天與妊娠第90天相比胎兒卵巢有1551個差異蛋白點,其中25個蛋白上調(diào),18個蛋白下調(diào)(55d/90d1.6,90d/55d1.6,P0.05的蛋白點43個)；質(zhì)譜分析結(jié)果顯示妊娠55天約克夏胎豬卵巢上調(diào)的蛋白主要有甲胎蛋白、抗胰蛋白酶、波形蛋白等,妊娠90天高表達的主要為凝溶膠蛋白、78葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白等。2)梅山豬妊娠第55天與妊娠第90天相比胎兒卵巢有1740個差異蛋白點,其中15個蛋白上調(diào),12個蛋白下調(diào)(55d/90d1.6,90d/55d1.6,P0.05的蛋白點27個)；質(zhì)譜分析結(jié)果顯示妊娠55天梅山胎豬卵巢顯著上調(diào)的蛋白主要包括甲胎蛋白、肽脯氨酰順反異構(gòu)酶等；妊娠90天胎豬顯著上調(diào)的蛋白主要為抗胰蛋白酶、凝溶膠蛋白等。2.基因表達結(jié)果：1)與低能量水平組相比,約克夏豬妊娠期母體飼喂高能量水平飼糧,顯著降低了妊娠55天胎兒卵巢中調(diào)控原始卵泡形成的關(guān)鍵蛋白抗胰蛋白酶、甲胎蛋白mRNA的表達量(P0.05),同時也降低了妊娠90天胎兒卵巢中調(diào)控細胞抗應激能力的關(guān)鍵蛋白78葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白以及調(diào)控原始卵泡向初級卵泡轉(zhuǎn)化的重要蛋白凝溶膠蛋白mRNA的表達量(P0.05)。2)妊娠55天,母體飼喂不同能量水平飼糧對梅山胎豬卵巢原始卵泡形成的關(guān)鍵蛋白如抗胰蛋白酶、甲胎蛋白等的表達量無顯著影響,而且妊娠90天母體飼喂不同能量水平飼糧對梅山胎豬卵巢中調(diào)控原始卵泡向初級卵泡轉(zhuǎn)化的凝溶膠蛋白以及參與機體炎癥反應的關(guān)鍵蛋白肽脯氨酰順反異構(gòu)酶的表達量也無顯著影響。本試驗結(jié)果表明：母體高能量水平通過影響調(diào)控原始卵泡形成、原始卵泡向初級卵泡轉(zhuǎn)化以及細胞抗應激能力等基因的表達,不利于約克夏胎豬卵巢發(fā)育；母體攝入不同能量水平飼糧不影響梅山豬胎兒卵巢發(fā)育。試驗三母體妊娠期飼糧能量水平對后代卵巢健康的影響本試驗旨在考察母體能量水平對約克夏豬后代卵巢發(fā)育過程中氧化應激、卵泡發(fā)育的影響。24頭約克夏妊娠母豬高、低能量水平飼喂,前期處理(妊娠0-90天)與試驗二相同,妊娠第90天屠宰后,各處理組余下4頭母豬飼喂至分娩,每天飼喂3kg。泌乳期均采食相同飼糧,仔豬斷奶后每窩選擇6頭雌性仔豬,按豬場后備母豬常規(guī)飼養(yǎng)管理方式飼養(yǎng)。母豬妊娠第55天、90天每組隨機選擇4頭母豬屠宰并分別收集胎兒卵巢,子代母豬160天和初情時,每窩均選擇平均體重的1頭母豬屠宰并分別收集子代母豬卵巢樣品,測定相關(guān)指標。結(jié)果顯示：1.母體妊娠期高能量水平降低子代160天時大卵泡數(shù)目、肝臟重量以及初情階段小卵泡數(shù)目(P0.05)。2.與妊娠期低能量水平組相比,母體高能量水平提高了妊娠90天胎豬卵巢丙二醛含量(P0.05),降低了總超氧化物歧化酶(P0.01)、CuZn-超氧化物歧化酶(P0.05)、谷胱甘肽還原酶(P=0.05)、谷胱甘肽過氧化物酶(P0.05)以及總抗氧化能力(P0.05)的酶活；妊娠期母體高能量水平降低子代后備母豬160天階段時卵巢中總超氧化物歧化酶活力(P0.05)、谷胱甘肽過氧化物酶(P0.05)以及總抗氧化能力(P0.05)。3.母體妊娠期高能量水平導致妊娠90天胎豬卵巢中B細胞淋巴瘤因子2 (B-cell lymphoma-2, BCL2)等促凋亡相關(guān)因子mRNA相對表達量高于低能組(P0.05),程序性死亡調(diào)節(jié)因子(Bcl-2 Assaciated X protein, BAX)等凋亡抑制因子低于低能組(P0.05)。后備母豬160天時BAX的mRNA相對表達量低能組高于高能組(P0.05),同時,BCL2的mRNA相對表達量在160天和初情時低能組均低于高能組(P0.05)。本試驗結(jié)果表明：妊娠期母體攝入高能量水平飼糧加劇了子代卵巢氧化應激和細胞凋亡,降低卵泡數(shù)目,不利于后代卵巢健康。綜上所述,梅山胎豬原始卵泡形成時間晚于約克夏豬,但是梅山胎豬卵巢發(fā)育潛能優(yōu)于約克夏豬,有利于原始卵泡向初級卵泡轉(zhuǎn)化。母體妊娠期高能量水平對梅山胎豬卵巢發(fā)育無影響；母體妊娠期高能量水平加劇了約克夏胎豬和生后卵巢氧化應激水平和細胞凋亡,不利于其胎兒卵巢發(fā)育并影響后代卵巢健康。由此表明梅山豬和約克夏豬卵巢發(fā)育對飼糧能量具有不同的敏感性。
【關(guān)鍵詞】：梅山豬 約克夏豬 能量水平 卵巢 發(fā)育
【學位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S828
【目錄】：

• 中文摘要5-9
• Abstract9-14
• 縮寫詞符號14-18
• 前言18-19
• 第一部分 文獻綜述19-26
• 1 豬卵巢發(fā)育和功能19-20
• 1.1 豬卵巢發(fā)育歷程19-20
• 1.2 不同品種豬卵巢發(fā)育歷程比較20
• 1.3 豬卵巢的功能20
• 2 營養(yǎng)水平對梅山和約克夏母豬卵巢發(fā)育的影響20-22
• 2.1 蛋白水平對梅山和約克夏母豬卵巢發(fā)育的影響21
• 2.2 飼喂水平對梅山和約克夏母豬卵巢發(fā)育的影響21-22
• 2.3 能量水平對梅山和約克夏母豬卵巢發(fā)育的影響22
• 3 母體營養(yǎng)對后代卵巢發(fā)育的影響22-24
• 4 營養(yǎng)水平通過氧化應激影響卵巢發(fā)育的機制24-25
• 4.1 氧化應激的發(fā)生及其危害24
• 4.2 營養(yǎng)水平對氧化應激的影響24
• 4.3 氧化應激對卵巢發(fā)育的影響24-25
• 5 有待研究的問題25-26
• 第二部分 研究目的、意義、內(nèi)容和技術(shù)路線26-28
• 1 研究目的26
• 2 研究意義26
• 3 研究內(nèi)容26-27
• 4 技術(shù)路線27-28
• 第三部分 試驗研究28-71
• 試驗一 梅山和約克夏胎豬卵巢發(fā)育的差異研究28-41
• 1 材料和方法28-31
• 1.1 主要儀器設(shè)備28-29
• 1.2 主要試劑29
• 1.3 試驗設(shè)計29
• 1.4 飼養(yǎng)管理29
• 1.5 樣品收集29
• 1.6 蛋白組學分析29-31
• 2 結(jié)果與分析31-37
• 2.1 差異蛋白表達31-35
• 2.2 差異蛋白功能分類35-37
• 3 討論37-40
• 4 小結(jié)40-41
• 試驗二 母體能量水平對不同品種胎豬卵巢發(fā)育的影響41-56
• 1 材料和方法41-45
• 1.1 試驗設(shè)計41-42
• 1.2 試驗飼糧42-43
• 1.3 飼養(yǎng)管理43
• 1.4 樣品收集43
• 1.5 指標測定及方法43-45
• 1.5.1 蛋白組學分析43
• 1.5.2 卵巢組織基因表達分析43-45
• 1.6 數(shù)據(jù)分析45
• 2 結(jié)果與分析45-52
• 2.1 品種內(nèi)不同時間點差異蛋白的表達45-50
• 2.2 母體能量水平對胎豬卵巢中基因mRNA表達量影響50-52
• 3 討論52-55
• 4 小結(jié)55-56
• 試驗三 母體能量水平對后代卵巢發(fā)育的影響56-71
• 1 材料與方法56-59
• 1.1 試驗設(shè)計56-57
• 1.2 飼養(yǎng)管理57
• 1.3 樣品收集57
• 1.4 指標測定及方法57-59
• 1.4.1 生產(chǎn)性能57
• 1.4.2 卵巢形態(tài)觀察57-58
• 1.4.3 卵巢中氧化應激指標測定58
• 1.4.4 卵巢中基因mRNA的表達量檢測58-59
• 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計59
• 2 結(jié)果與分析59-68
• 2.1 母體能量水平對后代卵泡發(fā)育和生長性能的影響59-61
• 2.2 母體能量水平對后代卵巢形態(tài)學的影響61-63
• 2.3 母體能量水平后代卵巢氧化應激的影響63-66
• 2.4 母體能量水平對后代卵巢中基因mRNA表達量影響66-68
• 3 討論68-70
• 4 小結(jié)70-71
• 第四部分 全文總體討論和結(jié)論71-73
• 1 總體討論71-72
• 2 結(jié)論72
• 3 本研究的創(chuàng)新點72
• 4 有待進一步研究的問題72-73
• 參考文獻73-86
• 致謝86-87
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文87

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宮領(lǐng)芳;許柳雄;管衛(wèi)兵;朱國平;李瑩春;;中西太平洋鰹卵巢發(fā)育特征[J];水產(chǎn)學報;2011年04期

2 李鳳真;李紅巖;張士璀;;調(diào)節(jié)硬骨魚卵巢發(fā)育和排卵的基因分析[J];魯東大學學報(自然科學版);2011年03期

3 利翠英,李文盛;食物中幾種氨基酸對家蠅卵巢發(fā)育的影響[J];昆蟲學報;1964年06期

4 夏邦穎,郭郛;東亞飛蝗生殖的研究:雌蝗成蟲卵巢發(fā)育過程中核酸和蛋白質(zhì)的代謝與激素調(diào)節(jié)[J];昆蟲學報;1974年02期

5 徐漢濤;全耳毛兔卵巢發(fā)育的初步研究[J];毛皮動物飼養(yǎng);1983年01期

6 黃龍全,張劍楙;植源性蛻皮激素對家蠶結(jié)扎蛹卵巢發(fā)育的誘導[J];蠶業(yè)科學;1992年01期

7 袁春營,崔青曼;蟹類卵巢發(fā)育調(diào)控技術(shù)研究進展[J];水利漁業(yè);2005年02期

8 林浩然;齊鑫;周雯伊;尹紹武;黃海;張勇;劉曉春;陳國華;;人工誘導花鰻鱺卵巢發(fā)育成熟及相關(guān)激素和組織的作用[J];水產(chǎn)學報;2010年07期

9 胡元亮;宋大魯;徐福南;張寶康;陳小慧;;中藥促孕灌注液作用機理研究——中藥促孕灌注液及其對小白鼠卵巢發(fā)育的影響[J];中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志;1993年02期

10 黃道明,林永泰,萬成炎,江鴻舒;魴成熟卵巢發(fā)育的組織學觀察[J];水利漁業(yè);1997年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張敏智;鄧思平;朱春華;李廣麗;;溫度對金錢魚(Scatophagus argus)卵巢發(fā)育的影響[A];2012年中國水產(chǎn)學會學術(shù)年會論文摘要集[C];2012年

2 康現(xiàn)江;郭志峰;藺志強;李彥芹;劉龍;;餌料對日本沼蝦卵巢發(fā)育過程中脂肪酸變化的影響[A];甲殼動物學分會成立20周年暨劉瑞玉院士從事海洋科教工作55周年學術(shù)研討會論文（摘要）集[C];2002年

3 李富花;于奎杰;李詩豪;謝玉素;相建海;;對蝦性別控制和卵巢發(fā)育分子機制初探[A];中國甲殼動物學會第十一屆年會暨學術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

4 譚俊;許強華;;日本文昌魚transcription factor AP-1基因的克隆和表達[A];漁業(yè)科技創(chuàng)新與發(fā)展方式轉(zhuǎn)變——2011年中國水產(chǎn)學會學術(shù)年會論文摘要集[C];2011年

5 吳旭干;成永旭;沈z，

本文編號：808075