本文關(guān)鍵詞：腹側(cè)海馬PCDH1在慢性束縛應(yīng)激誘導(dǎo)的焦慮抑郁樣行為中的作用

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【摘要】：研究背景：情感障礙是由多種因素誘發(fā)并以情感持續(xù)且顯著地高漲或低落為主要臨床特征的精神障礙。環(huán)境因素和遺傳因素是情感障礙產(chǎn)生的兩大主要因素,應(yīng)激作為環(huán)境因素,是情感障礙(如焦慮癥和抑郁癥)和學(xué)習(xí)記憶受損的一個(gè)重要誘發(fā)因素。研究表明慢性應(yīng)激可導(dǎo)致海馬和前額葉體積明顯減少以及神經(jīng)元樹突棘數(shù)目減少、樹突分支減少。慢性應(yīng)激可通過(guò)下丘腦-垂體-腎上腺軸(Hypothalamic-Pituitary-Adrenal, HPA)-.5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和去甲腎上腺素(Norepinephrine, NE)等系統(tǒng)改變神經(jīng)元中哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin, mTOR),神經(jīng)元型一氧化氮合酶(Neuronal nitric oxide synthase, nNOS)和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(Brai n-Derived Neurotrophic Factor, BDNF)等重要蛋白的表達(dá)最終導(dǎo)致突觸結(jié)構(gòu)和功能改變,那么是否還有其它分子和機(jī)制參與調(diào)節(jié)慢性應(yīng)激導(dǎo)致的突觸結(jié)構(gòu)和功能改變。細(xì)胞粘附分子(Cell Adhesion Molecules, CAMs)是突觸的重要構(gòu)成成分并且可以調(diào)控突觸活動(dòng)及突觸可塑性,在突觸形態(tài)構(gòu)建和精神疾病中發(fā)揮重要作用。文獻(xiàn)報(bào)道鈣黏蛋白是一種同型結(jié)合、鈣離子依賴的細(xì)胞粘附分子,在調(diào)節(jié)樹突棘形態(tài)和調(diào)控突觸功能中發(fā)揮重要作用。鈣黏蛋白超家族包括經(jīng)典鈣黏蛋白家族和原鈣黏蛋白家族。原鈣黏蛋白1(Protocadherin1, PCDH1)是原鈣黏蛋白家族的一員,在海馬和前額葉腦區(qū)高表達(dá),但PCDH1是否參與應(yīng)激誘導(dǎo)的焦慮或抑郁樣行為還不清楚。在本課題中,我們檢測(cè)慢性束縛應(yīng)激后腹側(cè)海馬PCDH1的表達(dá)。進(jìn)一步采用特異性干擾和過(guò)表達(dá)PCDH1的方法,研究PCDH1對(duì)小鼠焦慮樣或抑郁樣行為的作用,明確PCDH1是否參與慢性束縛應(yīng)激引起的焦慮樣或抑郁樣行為。目的：1.研究慢性束縛應(yīng)激后海馬PCDH1分子的表達(dá)變化。2.研究海馬PCDH1分子對(duì)慢性束縛應(yīng)激導(dǎo)致的焦慮抑郁樣行為的影響。方法：1.慢性束縛應(yīng)激(Chronic Restraint Stress, CRS)每天上午9點(diǎn)至11點(diǎn)小鼠束縛應(yīng)激2小時(shí),連續(xù)應(yīng)激21天。2.腦立體定位和病毒微量注射完全麻醉后,將小鼠頭部固定在腦立體定位儀上。在腹側(cè)海馬立體定位注射病毒,每側(cè)各1微升,注射定位坐標(biāo)如下：前后,-2.7毫米；左右,±2.2毫米；背腹側(cè),-2.2毫米。3.行為學(xué)測(cè)試應(yīng)用曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠的自主活動(dòng)能力和焦慮樣行為。應(yīng)用高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠的焦慮樣行為。應(yīng)用懸尾和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠的抑郁樣行為。4.實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)PCDH1 mRNA表達(dá)變化。5.蛋白提取和蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)小鼠腦組織提取總蛋白后用免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PCDH1蛋白量,用Quantity one軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并分析。6.免疫組織化學(xué)染色小鼠經(jīng)4%的多聚甲醛(PFA)灌注固定后,冰凍切片,厚度40微米,進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,熒光顯微鏡拍照,觀察病毒表達(dá)時(shí)程。結(jié)果：1.CRS導(dǎo)致小鼠腹側(cè)海馬PCDH1的表達(dá)降低。應(yīng)激組和對(duì)照組小鼠相比腹側(cè)海馬PCDH1 mRNA表達(dá)明顯降低,而同亞家族PCDH7,9,11 mRNA表達(dá)無(wú)明顯變化。背側(cè)海馬PCDH1 mRNA表達(dá)也降低,但只降低12%。兩組小鼠在杏仁體腦區(qū)PCDH1 mRNA表達(dá)無(wú)差異。應(yīng)激組和對(duì)照組小鼠相比腹側(cè)海馬PCDH1的蛋白表達(dá)有明顯降低,但在背側(cè)海馬和杏仁體腦區(qū)PCDH1的蛋白表達(dá)無(wú)差異,以上結(jié)果提示應(yīng)激特異性的導(dǎo)致腹側(cè)海馬PCDH1表達(dá)降低。2.干擾腹側(cè)海馬PCDH1的表達(dá)能夠模擬CRS誘導(dǎo)的焦慮樣和抑郁樣行為。干擾PCDH1組與對(duì)照組小鼠相比進(jìn)入曠場(chǎng)中央?yún)^(qū)時(shí)間明顯減少,進(jìn)入高架十字迷宮開臂時(shí)間和次數(shù)明顯減少,在懸尾和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中不動(dòng)時(shí)間均明顯增加,表明干擾PCDH1能夠?qū)е滦∈蠼箲]樣和抑郁樣行為增加。3.腹側(cè)海馬過(guò)表達(dá)PCDH1能夠糾正CRS誘導(dǎo)的焦慮樣和抑郁樣行為。CRS后,過(guò)表達(dá)PCDH1組與對(duì)照組小鼠相比,進(jìn)入曠場(chǎng)中央?yún)^(qū)的時(shí)間增加和進(jìn)入高架十字開臂的時(shí)間和次數(shù)增加,懸尾和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中不動(dòng)時(shí)間減少,表明過(guò)表達(dá)PCDH1能夠糾正CRS誘導(dǎo)的焦慮樣和抑郁樣行為。結(jié)論：1.CRS特異性的導(dǎo)致腹側(cè)海馬PCDH1 mRNA和蛋白表達(dá)降低。2.腹側(cè)海馬中PCDH1參與CRS引起的焦慮抑郁樣行為。意義：本課題中,我們發(fā)現(xiàn)PCDH1分子參與CRS導(dǎo)致焦慮抑郁樣行為的依據(jù),為將來(lái)焦慮癥、抑郁癥的臨床治療提供了新靶點(diǎn)和新思路。
【關(guān)鍵詞】：慢性束縛應(yīng)激 PCDH1 腹側(cè)海馬 焦慮 抑郁
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R749
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 符號(hào)說(shuō)明13-14
• 前言14-18
• 材料與方法18-29
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-39
• 討論39-42
• 附圖42-49
• 參考文獻(xiàn)49-54
• 致謝54-56
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文56-57
• 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表57

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 姜春玲,王有偉,張萬(wàn)琴,洪昭雄;癲癇研究中背腹側(cè)海馬在功能上的差異[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè));1999年03期

2 王靜 ,李藝影,李小勇,張萬(wàn)琴;腹側(cè)海馬強(qiáng)啡肽在癲癇敏感性增強(qiáng)形成中的表達(dá)[J];首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2001年04期

3 張開~，

本文編號(hào)：633682