本文關(guān)鍵詞：黃芪、冬蟲夏草對新生鼠腎積水梗阻解除后腎損害恢復(fù)的影響

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【摘要】：目的:探討黃芪、冬蟲夏草在新生鼠腎積水梗阻解除后,能否促進(jìn)腎損害更快、更有效地恢復(fù),以便為臨床更好地治療先天性腎積水患兒,提供可靠的實(shí)驗(yàn)及理論依據(jù)。方法:1、建立動(dòng)物模型選取出生后48h內(nèi)的Wistar鼠96只,隨機(jī)分為8組,每組12只。隨機(jī)選擇1組行假手術(shù),術(shù)后3周再次行假手術(shù)后以1.0ml/kg/d生理鹽水皮下注射(2次/周),建立對照組;余7組應(yīng)用腰大肌壓迫輸尿管上段建立不全梗阻的新生鼠腎積水動(dòng)物模型,隨機(jī)選擇1組為模型組,其余各組再隨機(jī)分為干預(yù)組1(黃芪低劑量組)、干預(yù)組2(黃芪高劑量組)、干預(yù)組3(冬蟲夏草低劑量組)、干預(yù)組4(冬蟲夏草高劑量組)、干預(yù)組5(黃芪+冬蟲夏草低劑量組)、干預(yù)組6(黃芪+冬蟲夏草高劑量組),并在建立腎積水動(dòng)物模型后3周,再次行手術(shù)解除輸尿管不全梗阻,并分別在皮下注射生理鹽水(1.0ml/kg/d)、低劑量黃芪注射液(1.0ml/kg/d)、高劑量黃芪注射液(3.0ml/kg/d)、低劑量冬蟲夏草提取液(0.5ml/kg/d)、高劑量冬蟲夏草提取液(2.0ml/kg/d)、低劑量黃芪注射液(1.0ml/kg/d)+低劑量冬蟲夏草提取液(0.5ml/kg/d)、高劑量黃芪注射液(3.0ml/kg/d)+高劑量冬蟲夏草提取液(2.0ml/kg/d),2次/周,干預(yù)9周后標(biāo)本取材,處死動(dòng)物。2、檢測指標(biāo):采集對照組、模型組、干預(yù)組1~6的病腎組織標(biāo)本,部分制成石蠟標(biāo)本,部分放-80℃冰箱凍存;并收集病腎尿液,-80℃冰箱凍存、待檢。①、石蠟標(biāo)本切片后行HE染色,觀察組織結(jié)構(gòu)的變化;②、石蠟標(biāo)本切片后,通過免疫組織化學(xué)PV法檢測胰島素樣生長因子-1(IGF-1)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)的表達(dá),應(yīng)用Image-Pro Plus圖像分析軟件測量平均光密度值;③、應(yīng)用蛋白印跡(Western blot)法檢測各組病腎組織內(nèi)胰島素樣生長因子-1(IGF-1)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)蛋白的表達(dá)情況;④、應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(q RT-PCR)技術(shù)檢測病腎組織內(nèi)IGF-1 m RNA、TGF-β1 m RNA水平的變化;⑤、用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測腎盂尿IGF-1、TGF-β1水平。結(jié)果:1、實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物的存活情況:Wistar新生小鼠共96只,建立不全梗阻腎積水模型及飼養(yǎng)期間死亡5只(麻醉過深致死1只、術(shù)中死亡2只、飼養(yǎng)期間死亡2只),存活91只(94.79%),并根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況適量增補(bǔ)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。2、病腎組織形態(tài)學(xué)的變化(1)、肉眼觀:對照組雙側(cè)腎臟大小、形態(tài)一致,包膜光滑,腎實(shí)質(zhì)質(zhì)地均一;模型組病腎增大,腎包膜張力高,腎包膜與實(shí)質(zhì)粘連、不易分離,腎實(shí)質(zhì)薄,腎盂擴(kuò)張、積水明顯;干預(yù)組病腎增大,但較模型組病腎小,腎實(shí)質(zhì)稍薄,腎盂擴(kuò)張、積水。(2)、光鏡下病腎組織結(jié)構(gòu)的變化:對照組雙側(cè)腎臟腎小球、腎小管發(fā)育正常,腎小囊未見擴(kuò)張;模型組病腎腎小球形態(tài)異常,腎小球鮑曼氏囊及腎小管擴(kuò)張;干預(yù)組病腎腎小球形態(tài)異常,腎小球鮑曼氏囊輕度擴(kuò)張,腎小管擴(kuò)張,但腎小球、腎小管的損害較模型組減輕,隨藥物劑量的增大、以及聯(lián)合用藥,病腎組織結(jié)構(gòu)的損害程度逐漸減輕。3、病腎組織IGF-1、TGF-β1蛋白及其m RNA表達(dá)情況IGF-1蛋白及其m RNA在對照組腎組織中高表達(dá),在模型組病腎組織中低表達(dá),在各干預(yù)組病腎組織中均有不同程度的表達(dá),低劑量組較高劑量組、聯(lián)合用藥組表達(dá)減低,但明顯高于模型組;TGF-β1蛋白及其m RNA在對照組腎組織中低表達(dá),在模型組病腎組織中高表達(dá),在各干預(yù)組病腎組織中也有不同程度的表達(dá),低劑量組較高劑量組、聯(lián)合用藥組表達(dá)增多,但明顯低于模型組。對照組與模型組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),對照組與各干預(yù)組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),模型組與各干預(yù)組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各干預(yù)組組間相比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);隨藥物劑量增大、以及聯(lián)合用藥,IGF-1蛋白表達(dá)量增高,TGF-β1蛋白表達(dá)量減低。4、病腎腎盂尿IGF-1、TGF-β1水平變化對照組腎盂尿IGF-1含量高,模型組病腎尿IGF-1含量低,在各干預(yù)組病腎尿IGF-1水平不同程度的表達(dá),低劑量組較高劑量組、聯(lián)合用藥組表達(dá)減低,但明顯高于模型組;對照組腎盂尿TGF-β1含量低,模型組病腎尿TGF-β1含量高,在各干預(yù)組病腎尿TGF-β1也有不同程度的表達(dá),低劑量組較高劑量組、聯(lián)合用藥組表達(dá)增多,但明顯低于模型組。對照組與模型組間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),對照組與各干預(yù)組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),模型組與各干預(yù)組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各干預(yù)組組間比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、先天性腎積水在解除梗阻后,應(yīng)用黃芪、冬蟲夏草對其皮下注射表明:黃芪、冬蟲夏草可促進(jìn)腎積水梗阻解除后病腎損害的有效恢復(fù)。2、黃芪、冬蟲夏草促進(jìn)腎積水梗阻解除后,病腎損害有效恢復(fù)的可能機(jī)制是:通過上調(diào)病腎組織內(nèi)IGF-1的表達(dá)、和/或下調(diào)TGF-β1的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：Wistar鼠 腎積水 胰島素樣生長因子-1 轉(zhuǎn)化生長因子-β1
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R726.9
【目錄】：

• 中英縮略詞對照表4-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-12
• 前言12-14
• 實(shí)驗(yàn)材料14-17
• 實(shí)驗(yàn)方法17-26
• 結(jié)果26-33
• 討論33-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-40
• 綜述一40-46
• 參考文獻(xiàn)44-46
• 綜述（二）46-55
• 參考文獻(xiàn)53-55
• 致謝55-56
• 作者簡介56

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：594980