本文關(guān)鍵詞：EGCG對鉛暴露小鼠學(xué)習(xí)記憶能力及海馬組織RAGE蛋白表達的影響

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【摘要】：目的用表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)對鉛致阿爾茨海默病樣病變(Alzheimer’s disease,AD)小鼠進行干預(yù),觀察EGCG對小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力、海馬組織抗氧化酶活性、RAGE和Aβ蛋白表達的影響,探討EGCG對鉛致AD樣病變小鼠神經(jīng)保護作用機制。方法取21天斷乳的健康清潔級C57BL/6雄性小鼠50只,按照體重隨機分為5組:對照組、染鉛模型組、低(Pb+1.5 mg/kg EGCG)、中(Pb+3.0 mg/kg EGCG)、高(Pb+4.5 mg/kg EGCG)劑量干預(yù)組。染鉛模型組和干預(yù)組以自由飲水的形式飲用0.2%的醋酸鉛水溶液,對照組飲用去離子水,持續(xù)喂養(yǎng)8周進行鉛染毒。染毒結(jié)束后,采用不同濃度的EGCG溶液對干預(yù)組小鼠等體積灌胃4周用于實驗,而對照組和染鉛模型組采用生理鹽水進行灌胃,每4周測量小鼠體重。干預(yù)結(jié)束后,進行Morris水迷宮實驗。水迷宮結(jié)束后次日,將小鼠麻醉后以摘眼球法采集全血,在冰上迅速剝離腦組織并取出海馬。用石墨爐原子吸收光譜儀測定血鉛含量;用相應(yīng)試劑盒分別測定海馬組織抗氧化物酶活性和丙二醛(malondialdehvde,MDA)含量;采用Western blot分析海馬組織高級糖基化終末產(chǎn)物受體(the receptor for advanced glycation end products,RAGE)蛋白表達水平;ELISA試劑盒測定海馬組織Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量。結(jié)果體重結(jié)果顯示:在第7周齡和第11周齡,染鉛模型組、不同劑量干預(yù)組與對照組相比,體重明顯降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);用EGCG干預(yù)4周后,中、高劑量干預(yù)組體重高于染鉛模型組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。水迷宮結(jié)果:染鉛模型組平均逃避潛伏期高于對照組,中、高劑量干預(yù)組低于染鉛模型組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。第6天,染鉛模型組穿越平臺次數(shù)低于對照組;中、高劑量干預(yù)組高于染鉛模型組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。血鉛含量:染鉛模型組和不同劑量干預(yù)組高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),不同劑量干預(yù)組與染鉛模型組比較,血鉛含量降低,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)�？寡趸富钚越Y(jié)果顯示:染鉛模型組、低劑量干預(yù)組與對照組比較,總超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)抗氧化酶活性顯著降低,MDA含量明顯升高(P0.05),中、高劑量EGCG干預(yù)組酶活性高于染鉛模型組,MDA含量明顯降低(P0.05)。Western blot結(jié)果顯示:染鉛模型組RAGE蛋白表達最高,空白對照組最低,干預(yù)組中隨著干預(yù)劑量的增加,表達有下降趨勢;不同劑量干預(yù)組蛋白表達低于染鉛模型組,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。ELISA測量Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量結(jié)果顯示:染鉛模型組Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量最高,與對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);中、高劑量干預(yù)組低于染鉛模型組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1.鉛暴露可使小鼠血鉛含量升高,延緩體重增長,損傷小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力。鉛暴露還可降低海馬組織抗氧化酶活性,增加Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)蛋白含量和RAGE蛋白表達量。2.EGCG干預(yù)可拮抗鉛暴露引起的小鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降,Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)蛋白含量增多,這一保護作用可能是通過提高海馬組織抗氧化酶活性和降低RAGE蛋白表達量拮抗相關(guān)的氧化應(yīng)激途徑實現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：鉛 EGCG 氧化應(yīng)激 RAGE 學(xué)習(xí)記憶能力 小鼠
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-12
• 英文縮略語詞表12-13
• 1 引言13-17
• 2 材料和方法17-31
• 2.1 材料17-20
• 2.1.1 研究對象17
• 2.1.2 主要實驗試劑17-18
• 2.1.3 主要實驗儀器18
• 2.1.4 主要實驗試劑的配置18-20
• 2.2 實驗方法20-31
• 2.2.1 動物模型的建立與飼養(yǎng)條件20
• 2.2.2 小鼠體重的稱量20-21
• 2.2.3 Morris水迷宮行為學(xué)檢測21
• 2.2.4 血液和海馬組織標本的采集21
• 2.2.5 小鼠血鉛含量的測定21-22
• 2.2.6 海馬組織氧化應(yīng)激相關(guān)因子測定22-25
• 2.2.7 酶聯(lián)免疫法檢測海馬組織中Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量25-27
• 2.2.8 蛋白質(zhì)免疫印記法檢測海馬組織RAGE蛋白表達27-31
• 3 結(jié)果31-41
• 3.1 EGCG干預(yù)對小鼠體重變化的影響31-32
• 3.2 Morris水迷宮實驗結(jié)果32-34
• 3.3 血鉛含量測定結(jié)果34-35
• 3.4 EGCG干預(yù)對各實驗組小鼠海馬組織氧化應(yīng)激相關(guān)因子的影響35-37
• 3.5 ELISA法檢測各實驗組小鼠海馬組織Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量37
• 3.6 各實驗組小鼠海馬組織RAGE蛋白Western blot分析37-38
• 3.7 相關(guān)性分析38-41
• 4 討論41-49
• 4.1 動物模型的構(gòu)建及動物基本情況監(jiān)測41-42
• 4.2 小鼠血鉛含量42-43
• 4.3 Morris水迷宮實驗結(jié)果43-44
• 4.4 EGCG對鉛暴露小鼠氧化損傷的拮抗作用44-45
• 4.5 EGCG干預(yù)對鉛暴露小鼠海馬組織Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)含量的影響45-46
• 4.6 EGCG干預(yù)對鉛暴露小鼠RAGE蛋白表達的影響46-49
• 5 結(jié)論49-51
• 參考文獻51-57
• 綜述57-77
• 參考文獻71-77
• 個人簡歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果77-79
• 致謝79

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本文編號：594495