本文關鍵詞：海藻糖對吸入麻醉藥異氟醚誘導轉(zhuǎn)APP基因小鼠學習記憶功能損害的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 探討吸入性麻醉藥異氟醚對轉(zhuǎn)APP基因小鼠學習和記憶功能的影響，以及海藻糖的干預保護作用，進一步討論海藻糖對異氟醚誘導轉(zhuǎn)APP基因小鼠學習記憶功能保護作用的靶點。 方法： 選用健康12月齡轉(zhuǎn)APP基因小鼠60只，隨機分為3組（n=20）：空白對照組（Control組）、異氟醚麻醉組（Iso組）、海藻糖預處理組（Iso+Tre組）。麻醉前30min給予Iso+Tre組轉(zhuǎn)APP基因小鼠海藻糖（劑量為400μg/kg，稀釋于2ml生理鹽水中）腹腔注射，Iso組腹腔注射2ml生理鹽水，然后分別給予吸入兩組小鼠3%異氟醚誘導，翻正反應消失后（約10±2min），以1.4%異氟醚持續(xù)吸入2h，麻醉過程中吸入氧濃度60%，氧流量1L/min。Control組在對應時間內(nèi)吸入60%氧氣。麻醉結(jié)束后將小鼠隨機分為兩個部分。第一部分進行行為學檢測，每組隨機抽取8只小鼠，從麻醉后24h開始，進行持續(xù)6天的Morris水迷宮行為學觀察，觀察轉(zhuǎn)APP基因小鼠學習和記憶功能的變化。第二部分進行生化及組織學檢測，將剩余的轉(zhuǎn)APP基因小鼠（每組12只）在麻醉結(jié)束后6h和24h斷頸取腦，分離出海馬，制作海馬組織切片，應用TUNEL方法觀測各組小鼠海馬組織CA1區(qū)的神經(jīng)元凋亡。提取海馬組織總蛋白，應用ELISA法測定其Aβ含量，應用Western-blot法檢測Bcl-2、Bax、Caspase-3基因的表達量變化。 結(jié)果： 第一部分，吸入麻醉藥異氟醚對轉(zhuǎn)APP基因小鼠的行為學影響及海藻糖對小鼠學習記憶功能的保護作用。Morris水迷宮測試結(jié)果：在定位航行實驗中，第1天至第4天，Iso組轉(zhuǎn)APP基因小鼠的逃避潛伏期與Control組相比明顯延長（p0.01）；Iso+Tre組轉(zhuǎn)APP基因小鼠的逃避潛伏期與Iso組相比較顯著縮短（p0.05）；Iso+Tre組轉(zhuǎn)APP基因小鼠與Control組相比較，逃避潛伏期無明顯差異（p0.05）。第5天3組轉(zhuǎn)APP基因小鼠間逃避潛伏期均無明顯差異（p0.05）。第6天進行空間探索實驗，Iso組的小鼠其空間探索時間比Control組小鼠明顯縮短（p0.01），Iso+Tre組與Iso組相比較，，小鼠的空間探索時間明顯延長（p0.01），Iso+Tre組與對照組相比，小鼠在原平臺所在區(qū)域滯留的時間也有縮短的趨向，但并沒有顯著的差異（p0.05）。 第二部分，海藻糖對異氟醚誘導轉(zhuǎn)APP基因小鼠海馬神經(jīng)元凋亡和Aβ生成的影響。（1）TUNEL法檢測的結(jié)果表明，Iso組小鼠海馬CA1區(qū)的染色陽性細胞數(shù)目顯著增加，表明神經(jīng)元有廣泛凋亡，神經(jīng)元凋亡指數(shù)明顯高于Control組（p0.01），Iso+Tre組神經(jīng)元凋亡指數(shù)比Iso組明顯降低（p0.01），但與對照組比較仍有差異（p0.05）。(2) ELISA法檢測三組小鼠的海馬組織Aβ1-42蛋白含量，Iso組轉(zhuǎn)APP小鼠海馬的Aβ1-42含量明顯高于Control組（p0.01）；Iso+Tre組與Iso組相比較，Aβ1-42含量明顯下降（p0.01），與Control組轉(zhuǎn)APP小鼠的海馬Aβ1-42含量無明顯差異（p0.05）。（3）Western-blot檢測結(jié)果顯示：Iso組和Iso+Tre組轉(zhuǎn)APP基因小鼠與Control組相比較，海馬組織Bax和Caspase-3基因的表達均有顯著增強，Bcl-2基因的表達降低，Bax/Bcl-2的比值顯著增高（p0.01），Iso+Tre組與Iso組相比，Bax及Caspase-3基因表達顯著下降，Bcl-2基因表達增強，Bax/Bcl-2比值顯著下降（p0.01）。 結(jié)論：異氟醚能明顯損害轉(zhuǎn)APP基因小鼠的學習記憶功能，而海藻糖能夠阻止吸入麻醉藥異氟醚誘導轉(zhuǎn)APP基因小鼠的學習記憶功能損害，麻醉前給予給予海藻糖進行干預，能夠拮抗吸入麻醉藥異氟醚誘導轉(zhuǎn)APP基因小鼠海馬神經(jīng)元凋亡，減少Aβ的產(chǎn)生，海馬組織Bax和Caspase-3基因表達下降，從而抑制線粒體凋亡信號通路的活化。
【關鍵詞】：海藻糖 異氟醚 轉(zhuǎn)APP基因小鼠 學習記憶功能
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R614
【目錄】：

• 前言4-7
• 中文摘要7-9
• Abstract9-13
• 英漢縮略語名詞對照13-15
• 第1章 材料與方法 115-19
• 1.1 實驗動物15-16
• 1.1.1 篩選方法15
• 1.1.2 實驗分組15-16
• 1.2 主要試劑及儀器16
• 1.3 實驗方法16-18
• 1.3.1 轉(zhuǎn) APP 基因小鼠異氟醚吸入麻醉動物模型的建立16
• 1.3.2 Morris 水迷宮實驗16-18
• 1.4 統(tǒng)計學處理18-19
• 第2章 結(jié)果 119-21
• 2.1 定位航行實驗——平均逃避潛伏期19-20
• 2.2 空間探索實驗——原平臺所在區(qū)域的滯留時間20-21
• 第3章 討論 121-24
• 3.1 APPswe 轉(zhuǎn)基因小鼠 AD 模型的選擇21
• 3.2 Morris 水迷宮與學習記憶功能21-22
• 3.3 吸入麻醉藥異氟醚與學習記憶功能22-23
• 3.4 海藻糖與學習記憶功能23-24
• 第4章 結(jié)論 124-25
• 第5章 材料與方法 225-32
• 5.1 實驗動物25
• 5.2 主要試劑及儀器25-27
• 5.2.1 主要試劑25-27
• 5.2.2 主要儀器27
• 5.3 實驗方法27-31
• 5.3.1 轉(zhuǎn) APP 基因小鼠異氟醚吸入麻醉動物模型的建立27
• 5.3.2 TUNEL 法檢測海馬神經(jīng)元凋亡27-29
• 5.3.3 ELISA 法檢測海馬 Aβ含量29-30
• 5.3.4 Western Blot 法檢測凋亡基因的表達30-31
• 5.4 統(tǒng)計學分析31-32
• 第6章 結(jié)果 232-37
• 6.1 TUNEL 法檢測轉(zhuǎn) APP 基因小鼠海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元凋亡32-33
• 6.2 ELISA 法檢測海馬 Aβ含量33-34
• 6.3 Wesern Blot 法檢測 Bcl-2、Bax、Caspase-3 的表達34-37
• 6.3.1 Bcl-2 蛋白表達34-35
• 6.3.2 Bax 蛋白表達35-36
• 6.3.3 Bax/ Bcl-2 的比值36
• 6.3.4 Caspase-3 蛋白表達36-37
• 第7章 討論 237-41
• 7.1 海藻糖對異氟醚誘導轉(zhuǎn) APP 基因小鼠海馬神經(jīng)元凋亡的影響37-41
• 第8章 結(jié)論 241-42
• 參考文獻42-47
• 附錄47-59
• 作者簡介及在學期間所取得的科研成果59-60
• 致謝60

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 彭明清;夏佐中;;異氟醚預處理與腦保護作用[J];重慶醫(yī)學;2007年14期

2 楊淵,張?zhí)K明,方思羽,張e

本文編號：502199