本文關(guān)鍵詞：基于鐵調(diào)素探討左歸丸對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥的治療作用及機(jī)理，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的本研究以去卵巢大鼠為骨質(zhì)疏松癥模型,用補(bǔ)腎經(jīng)典方劑—左歸丸進(jìn)行干預(yù),采用骨密度檢測、Micro CT、免疫組化法、ELISA等實(shí)驗(yàn)技術(shù),從鐵調(diào)素對(duì)鐵過載調(diào)節(jié)作用的角度,部分揭示左歸丸對(duì)骨質(zhì)疏松癥的治療作用及其機(jī)理,并為闡明“腎主骨”的科學(xué)內(nèi)涵提供進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法先將60只SPF級(jí)雌性SD大鼠按體重隨機(jī)分為3組：空白對(duì)照組12只,假手術(shù)組12只,造模組36只。造模組大鼠用45mg/kg體重的戊巴比妥鈉麻醉后,施以雙側(cè)卵巢切除(OVX)手術(shù)。假手術(shù)組大鼠只切除卵巢周圍少許脂肪組織。術(shù)后3個(gè)月,再將造模組大鼠按體重隨機(jī)分為3組：模型組(OVX組)、OVX+戊酸雌二醇組(E2組)、OVX+左歸丸組(左歸丸組),每組各12只。分組后開始對(duì)各給藥組大鼠灌胃給藥：左歸丸組天鼠灌胃給予左歸丸水煎液,給藥濃度為0.968 g生藥/mL,給藥體積為1 mL/100g體重,給藥劑量為9.68 g生藥/kg體重；E2組大鼠灌胃給予戊酸雌二醇混 懸液,給藥濃度為0.018 mg/mL,給藥體積為1mL/100g體重,給藥劑量為0.18 mg/kg體重。以上給藥,一天一次,連續(xù)6天,休息1天后,再連續(xù)給藥6天,如此給藥3個(gè)月�？瞻讓�(duì)照組、假手術(shù)組和模型組大鼠按上法灌胃給予等體積的純凈水。灌胃期間,根據(jù)每周所稱取的體重調(diào)整給藥量。在末次給藥1h后,將大鼠麻醉,腹主動(dòng)脈取血,所取全血靜置1h后,以3000 r/min離心20 min,取血清,分裝后放在-80℃冰箱保存待測,用于外周血血清中鐵蛋白(Ferritin)、鐵調(diào)素(Hepcidin)、骨鈣素(BGP)、Ⅰ型膠原(COL Ⅰ)和抗酒石酸酸性磷酸酶5b (TRACP-5b)含量的檢測。然后,將大鼠迅速處死,取子宮并稱重,測定子宮系數(shù)；取脊椎骨,用于骨密度(BMD)檢測；取右側(cè)股骨,福爾馬林固定,Micro CT掃描,用于骨組織形態(tài)指標(biāo)檢測,包括骨體積分?jǐn)?shù)(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁數(shù)量(Tb.N)、骨小梁分離度(Tb.Sp)及結(jié)構(gòu)模型指數(shù)(SMI)；取右側(cè)脛骨,4%多聚甲醛(含1%oDEPC)固定,制作脫鈣骨冰凍切片,用于骨髓中膜轉(zhuǎn)鐵蛋白1(Fpn1)蛋白表達(dá)的檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果皆以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,均采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。先進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn),正態(tài)分布數(shù)據(jù)兩組以上的比較,采用單因素方差分析(ANOVA),組間兩兩比較,方差齊性的采用其項(xiàng)下的LSD檢驗(yàn)；方差不齊的則采用其項(xiàng)下的Dunnett's T3(3)檢驗(yàn)；若數(shù)據(jù)為非正態(tài)分布時(shí),采用非參數(shù)檢驗(yàn)Kruskal-Wallis單因素ANOVA (k樣本)(W),組間兩兩比較,采用其項(xiàng)下的Stepwise step-down檢驗(yàn)。結(jié)果1左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠子宮系數(shù)的影響與假手術(shù)組相比,OVX組、E2組和左歸丸組大鼠子宮系數(shù)皆明顯降低；與OVX組相比,E2組大鼠子宮系數(shù)明顯增高,而左歸丸組與OVX組無差異。2左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠腰椎BMD的影響OVX組大鼠腰椎BMD較之假手術(shù)組顯著降低；與OVX組相比,E2組和左歸丸組天鼠腰椎BMD顯著增高,但仍顯著低于假手術(shù)組。3左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠股骨骨形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響3.1左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠股骨BV/TV的影響與假手術(shù)組相比,OVX組大鼠股骨BV/TV顯著降低；E2組和左歸丸組大鼠BV/TV比OVX組明顯增高,但仍顯著低于假手術(shù)組。3.2左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠股骨Tb.N、Tb.Th及Tb.Sp的影響與假手術(shù)組相比,OVX組、E2組和左歸丸組大鼠Tb.N明顯降低,Tb.Sp則明顯增高；與OVX組相比,E2組和左歸丸組大鼠Tb.N均明顯增高,Tb.Sp則明顯降低。各組大鼠Tb.Th無明顯差異。3.3左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠股骨SMI的影響與假手術(shù)組相比,OVX組大鼠SMI明顯增高；E2組和左歸丸組大鼠SMI與OVX組相比明顯降低,但仍明顯高于假手術(shù)組。4左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠外周血血清中Ferritin、Hepcidin、BGP、 COL Ⅰ及TRACP-5b含量的影響4.1左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠外周血血清中Ferritin、Hepcidin含量的影響與假手術(shù)組相比,OVX組大鼠外周血中Ferritin含量明顯增高,Hepcidin含量則明顯下降；與OVX組相比,E2組和左歸丸組大鼠Ferritin含量均明顯減少,Hepcidin含量則明顯增高,但與假手術(shù)組相比仍有差異。4.2左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠外周血血清中BGP、COL I含量的影響與假手術(shù)組相比,OVX組大鼠外周血中BGP及COL I含量均明顯增高；E2組和左歸丸組大鼠BGP及COL I含量均明顯低于OVX組,但左歸丸組COL I含量仍明顯高于假手術(shù)組。4.3左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠外周血血清中TRACP-5b含量的影響與假手術(shù)組相比,OVX組大鼠外周血中TRACP-5b含量明顯增高；E2組、左歸丸組大鼠TRACP-5b含量與OVX組相比明顯降低。5左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠脛骨骨髓中Fpnl蛋白表達(dá)的影響OVX組大鼠脛骨骨髓中Fpnl蛋白表達(dá)IOD顯著高于假手術(shù)組：與OVX組相比,E2、左歸丸組Fpnl蛋白表達(dá)IOD顯著降低；但左歸丸組Fpnl蛋白表達(dá)IOD仍明顯高于假手術(shù)組,E2組則與假手術(shù)組無差異。結(jié)論(1)切除大鼠卵巢可使骨微細(xì)結(jié)構(gòu)破壞,骨密度降低,造成骨質(zhì)疏松癥；而左歸丸可改善骨微細(xì)結(jié)構(gòu),提高骨密度,對(duì)卵巢切除所致的骨質(zhì)疏松癥產(chǎn)生治療作用。(2)切除大鼠卵巢可使TRACP-5b以及BGP、COL I的水平增高,呈現(xiàn)出高轉(zhuǎn)換的骨丟失狀態(tài)；而左歸丸對(duì)其具有一定的抑制作用,使骨吸收和骨形成趨于平衡,從而達(dá)到治療骨質(zhì)疏松癥的作用。(3)切除大鼠卵巢可使Hepcidin水平降低,骨髓細(xì)胞上的Fpn1內(nèi)陷降解因而被抑制,使鐵離子過多轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞外,導(dǎo)致鐵過載,進(jìn)而使破骨細(xì)胞活性增強(qiáng)；而左歸丸能提高Hepcidin水平,改善卵巢切除所致的鐵過載。這是其能夠治療骨質(zhì)疏松癥的機(jī)理之一。以上結(jié)果提示：鐵調(diào)素對(duì)鐵過載的調(diào)節(jié)作用在“腎主骨”中起著一定作用。
【關(guān)鍵詞】：左歸丸 鐵調(diào)素 膜轉(zhuǎn)鐵蛋白1 骨質(zhì)疏松癥 腎主骨
【學(xué)位授予單位】：中國中醫(yī)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R259
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• Abstract9-14
• 縮略詞中英文對(duì)照表14-16
• 綜述16-38
• 參考文獻(xiàn)31-38
• 前言38-40
• 材料與方法40-46
• 1 材料40-41
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物40
• 1.2 藥物40
• 1.3 主要試劑40
• 1.4 主要儀器40-41
• 2 方法41-46
• 2.1 動(dòng)物分組及處理41
• 2.2 取材41-42
• 2.3 指標(biāo)檢測42-45
• 2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理45-46
• 結(jié)果46-58
• 1 左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠子宮系數(shù)的影響46-47
• 2 左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠腰椎BMD的影響47
• 3 左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠股骨骨形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響47-51
• 4 左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠外周血血清中Ferritin、Hepcidin、BGP、COLⅠ及TRACP-5b的影響51-55
• 5 左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠脛骨骨髓中Fpn1蛋白表達(dá)的影響55-58
• 討論58-66
• 結(jié)論66-67
• 參考文獻(xiàn)67-70
• 致謝70-72
• 個(gè)人簡介72-74
• 附圖74-81

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱鵬;;左歸丸加味治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥47例[J];實(shí)用中醫(yī)藥雜志;2006年10期

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3 朱玲;羅頌平;許麗綿;朱初良;;左歸丸對(duì)小鼠自身免疫性卵巢損傷的保護(hù)作用[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;2005年10期

4 張秋萬;;左歸丸加減治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥20例[J];中國民間療法;2007年12期

5 孫琳林;康廣盛;韓海榮;馬艷春;;左歸丸實(shí)驗(yàn)研究概況[J];中成藥;2010年03期

6 劉新蓮;晏雪生;高翔;李瀚e

本文編號(hào)：488599