本文關(guān)鍵詞：孕期睡眠剝奪對(duì)子代情感和認(rèn)知功能影響及機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分 孕期睡眠剝奪對(duì)子代情感和認(rèn)知功能的影響目的：研究妊娠不同階段睡眠剝奪后對(duì)其子代成年后情感和認(rèn)知功能的影響,采用輕輕觸摸法建立孕期睡眠剝奪大鼠模型,選用其子代大鼠(6-8周齡)為研究對(duì)象,觀察孕期不同階段睡眠剝奪對(duì)子代行為的影響,為孕期護(hù)理和神經(jīng)、精神疾病的治療提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。方法：實(shí)驗(yàn)采用Sprague-Dawley孕鼠,按隨機(jī)原則分為四個(gè)組,分別為正常對(duì)照組(CTR組)、妊娠早期睡眠剝奪組(ESD組)、妊娠中期睡眠剝奪組(MSD組)和妊娠晚期睡眠剝奪組(LSD組)。采用輕輕觸摸法對(duì)實(shí)驗(yàn)孕鼠每天進(jìn)行6個(gè)小時(shí)(12：00-18：00)的睡眠剝奪,持續(xù)一周時(shí)間,待其子代成年后(6-8周齡)進(jìn)行行為學(xué)檢測(cè)：1.用高架十字迷宮和新穎環(huán)境抑制攝食測(cè)試檢測(cè)子代大鼠的焦慮樣行為；2.用強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)檢測(cè)子代大鼠的抑郁狀態(tài)；3.用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力。結(jié)果：高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中,與對(duì)照組大鼠相比,經(jīng)歷不同階段孕期睡眠剝奪后出生的大鼠,它們進(jìn)入開放臂的時(shí)間和次數(shù)都明顯減少；新穎環(huán)境抑制攝食測(cè)試結(jié)果顯示睡眠剝奪組大鼠與對(duì)照組相比,進(jìn)食的潛伏期顯著延長(zhǎng)、攝食量明顯減少；這均說明孕期睡眠剝奪導(dǎo)致子代大鼠的焦慮樣行為；強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)睡眠剝奪組所產(chǎn)的大鼠,它們的不動(dòng)潛伏期和不動(dòng)時(shí)間都顯著性縮短,而且以妊娠早期、晚期睡眠剝奪更明顯,表明孕期睡眠剝奪后出生大鼠表現(xiàn)出明顯的抑郁樣行為；Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中,定位航行實(shí)驗(yàn)顯示,孕期睡眠剝奪組所產(chǎn)大鼠的平均逃離潛伏期比對(duì)照組較長(zhǎng),空間探索實(shí)驗(yàn)顯示,孕期睡眠剝奪組所產(chǎn)大鼠與對(duì)照組相比,在目標(biāo)象限游泳的時(shí)間顯著減少,而各組大鼠的游泳速度無顯著差異。結(jié)論：孕期不同階段的睡眠剝奪導(dǎo)致子代大鼠成年后情感障礙,產(chǎn)生焦慮、抑郁樣行為,并且損傷子代大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力。第二部分孕期睡眠剝奪對(duì)子代學(xué)習(xí)記憶影響機(jī)制探討目的：進(jìn)一步研究孕期睡眠剝奪對(duì)子代學(xué)習(xí)記憶影響的可能機(jī)制,從海馬神經(jīng)發(fā)生、突觸可塑性兩方面探討其機(jī)制。方法：模型建立及分組同第一部分。免疫熒光實(shí)驗(yàn)方法：1.孕期睡眠剝奪組和對(duì)照組出生的大鼠滿2周時(shí)通過腹腔注射5-溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU,50mg/kg,每天一次),連續(xù)注射7天,4周后將大鼠麻醉,用生理鹽水和4%的多聚甲醛進(jìn)行心臟灌流,然后取腦組織冰凍切片,運(yùn)用免疫熒光實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)海馬齒狀回區(qū)域神經(jīng)元存活的情況。用BrdU和NeuN(成熟神經(jīng)元特異性核蛋白標(biāo)志)抗體雙標(biāo)來檢測(cè)成熟神經(jīng)元的存活情況,用BrdU和GFAP (星行膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志)抗體雙標(biāo)來檢測(cè)星行膠質(zhì)細(xì)胞的存活情況。2.子代大鼠滿6周時(shí)給予腹腔注射BrdU (100mg/kg,每天一次)連續(xù)三天,24小時(shí)后將大鼠麻醉,用生理鹽水和4%的多聚甲醛進(jìn)行心臟灌流,然后取腦組織冰凍切片,用免疫熒光實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)其海馬齒狀回區(qū)域的神經(jīng)細(xì)胞增殖情況。用DCX(雙皮質(zhì)素)抗體來檢測(cè)未成熟神經(jīng)元的變化,用BrdU和NeuN抗體雙標(biāo)來檢測(cè)成熟神經(jīng)元的增殖變化,用BrdU和GFAP抗體雙標(biāo)來檢測(cè)星行膠質(zhì)細(xì)胞的增殖情況。電生理實(shí)驗(yàn)方法：1.在體電生理實(shí)驗(yàn)：通過誘導(dǎo)大鼠海馬CA3-CA1通路的LTP和LTD,來檢測(cè)子代大鼠的突觸可塑性變化。LTP/LTD的大小是用高頻／低頻刺激之后的fEPSP的斜率與基線fEPSP的斜率進(jìn)行比較。2.離體腦片膜片鉗實(shí)驗(yàn)：成年大鼠海馬腦片制備：大鼠(6-8周齡)用30%的水合氯醛麻醉,心臟灌流氧飽和的NMDG人工腦脊液(NMDG ACSF),然后迅速取腦組織進(jìn)行切片(400μm),腦片移入HEPES ACSF孵育槽里30℃孵育1小時(shí)后,轉(zhuǎn)入實(shí)驗(yàn)記錄槽內(nèi),采用離體腦片膜片鉗技術(shù)來檢測(cè)大鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元微小興奮性突觸后電流(mEPSC)的頻率及幅度。結(jié)果：免疫熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1.孕期不同階段睡眠剝奪后出生大鼠成年后其海馬齒狀回區(qū)域神經(jīng)元存活明顯減少。孕期SD組所產(chǎn)大鼠與對(duì)照組相比,BrdU/NeuN雙陽性細(xì)胞數(shù)明顯減少,而BrdU/GFAP雙陽性細(xì)胞數(shù)無明顯差異。2.孕期不同階段睡眠剝奪后出生大鼠成年后其海馬齒狀回區(qū)域神經(jīng)細(xì)胞增殖減少。孕期SD組所產(chǎn)大鼠與對(duì)照組相比,BrdU和NeuN共表達(dá)的神經(jīng)細(xì)胞明顯減少,DCX陽性細(xì)胞與對(duì)照組相比顯著減少,而BrdU和GFAP共表達(dá)的星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)無顯著差異。電生理實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1.在體電生理實(shí)驗(yàn)：妊娠不同階段睡眠剝奪損傷子代大鼠海馬的LTP/LTD。與CTR組相比,ESD、MSD、LSD組的LTP幅度顯著降低,而LTD幅度增加；2.腦片膜片鉗實(shí)驗(yàn)：妊娠不同階段睡眠剝奪抑制了子代大鼠海馬的興奮性突觸傳遞,SD組mEPSC的頻率和幅度與CTR組相比較明顯減少。結(jié)論：妊娠不同階段睡眠剝奪損害子代學(xué)習(xí)記憶的機(jī)制,可能與海馬神經(jīng)發(fā)生受抑和突觸可塑性降低有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：孕期睡眠剝奪 情感障礙 空間學(xué)習(xí)記憶 孕期睡眠剝奪 神經(jīng)發(fā)生 突觸可塑性
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R740
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對(duì)照5-6
• 中文摘要6-10
• 英文摘要10-15
• 前言15-17
• 第一部分 孕期睡眠剝奪對(duì)子代情感和認(rèn)知功能的影響17-31
• 前言17
• 1 材料和方法17-21
• 2 結(jié)果21-25
• 3 討論25-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 第二部分 孕期睡眠剝奪對(duì)子代學(xué)習(xí)記憶影響的機(jī)制探討31-45
• 前言31
• 1 材料和方法31-36
• 2 結(jié)果36-41
• 3 討論41-43
• 參考文獻(xiàn)43-45
• 全文總結(jié)45-46
• 文獻(xiàn)綜述46-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 致謝52-53
• 攻讀碩士期間的研究成果及發(fā)表的論文53

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本文編號(hào)：435837