本試驗以雄性Wistar大鼠為研究對象,給予噻拉嗪麻醉,通過測定大鼠不同腦區(qū)不同麻醉時期的PKA、ERK1/2/CREB/BDNF信號通路中的相關蛋白及基因表達的變化,探討噻拉嗪麻醉的作用機理。試驗選取35只雄性Wistar大鼠,分成對照組（C）和麻醉組（X）,麻醉組又被隨機分為6組（n=5）:誘導組（X1）、翻正反射消失0 min組（X2）、翻正反射消失30 min組（X3）、翻正反射消失60 min組（X4）、翻正反射恢復0 min組（X5）和翻正反射恢復30 min組（X6）。對照組大鼠在注射生理鹽水8 min后,麻醉組在注射噻拉嗪（70 mg/kg）各個時間點之后,立即斷頭處死大鼠并取腦組織,利用RT-PCR方法檢測GluR1、GluR2、ERK1/2、PKC、PKA、CREB、c-jun、c-fos、fos-B和BDNF的mRNA表達;Western blot方法檢測GluR1、GluR2、ERK1/2/p-ERK1/2、PKA/p-PKA、PKC/p-PKC、CREB/p-CREB和BDNF的蛋白表達。利用ATP酶試劑盒測定ATP酶的活性,通過ELISA試劑盒測定cAMP的... 

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 噻拉嗪的概述
        1.1.1 噻拉嗪的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用
        1.1.2 噻拉嗪的麻醉作用
        1.1.3 噻拉嗪復合麻醉劑的應用
    1.2 動物全身麻醉
        1.2.1 全身麻醉概念
        1.2.2 全身麻醉的研究進展
        1.2.3 全身麻醉對神經(jīng)系統(tǒng)的作用
        1.2.4 全麻藥與相關信號通路的關系
    1.3 CREB信號通路與麻醉
        1.3.1 GluR1、GluR2與麻醉的關系
        1.3.2 ATP酶與麻醉的關系
        1.3.3 cAMP與麻醉的關系
        1.3.4 ERK1/2與麻醉的關系
        1.3.5 PKC與麻醉的關系
        1.3.6 PKA與麻醉的關系
        1.3.7 CREB與麻醉的關系
        1.3.8 c-fos、c-jun和fos-B與麻醉的關系
        1.3.9 BDNF與麻醉的關系
    1.4 試驗目的及意義
2 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 試驗動物
        2.1.2 試驗儀器設備
        2.1.3 試驗試劑和藥品
    2.2 試驗方法
        2.2.1 試驗技術路線圖
        2.2.2 噻拉嗪麻醉劑量的確定
        2.2.3 試驗動物分組
        2.2.4 腦組織采集
        2.2.5 PC12細胞的培養(yǎng)
        2.2.6 細胞中噻拉嗪給藥劑量的測定
        2.2.7 細胞轉染
        2.2.8 ATP酶活性檢測
        2.2.9 cAMP含量的測定
        2.2.10 實時定量PCR
        2.2.11 蛋白免疫印跡技術
        2.2.12 數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計
3 結果
    3.1 噻拉嗪麻醉大鼠最佳劑量的篩選
    3.2 細胞中噻拉嗪給藥劑量的篩選
    3.3 噻拉嗪麻醉對大鼠不同腦區(qū)內(nèi)ATP酶活性的影響
        3.3.1 對大鼠不同腦區(qū)Na~+-K~+-ATP酶活性的影響
        3.3.2 對大鼠不同腦區(qū)Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的影響
    3.4 噻拉嗪麻醉對大鼠不同腦區(qū)內(nèi)cAMP含量的影響
    3.5 噻拉嗪對大鼠同腦區(qū)基因表不達的影響
        3.5.1 對大腦內(nèi)基因表達水平的影響
        3.5.2 對小腦內(nèi)基因表達水平的影響
        3.5.3 對海馬內(nèi)基因表達水平的影響
        3.5.4 對丘腦內(nèi)基因表達水平的影響
        3.5.5 對腦干內(nèi)基因表達水平的影響
    3.6 對PC12細胞內(nèi)基因表達水平的影響
    3.7 噻拉嗪麻醉對大鼠不同腦區(qū)內(nèi)蛋白表達的影響
        3.7.1 對大腦內(nèi)蛋白表達水平的影響
        3.7.2 對小腦內(nèi)蛋白表達水平的影響
        3.7.3 對海馬內(nèi)蛋白表達水平的影響
        3.7.4 對丘腦內(nèi)蛋白表達水平的影響
        3.7.5 對腦干內(nèi)蛋白表達水平的影響
    3.8 對PC12細胞內(nèi)相關蛋白表達的影響
4 討論
    4.1 噻拉嗪麻醉對ATP酶活性的影響
        4.1.1 對大鼠不同腦區(qū)內(nèi)Na~+-K~+-ATP酶活性的影響
        4.1.2 對大鼠不同腦區(qū)內(nèi)Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的影響
    4.2 噻拉嗪麻醉對大鼠不同腦區(qū)內(nèi)cAMP含量的影響
    4.3 噻拉嗪麻醉對相關信號通路的影響
        4.3.1 對GluR1和GluR2的影響
        4.3.2 對ERK1/2的影響
        4.3.3 對PKA的影響
        4.3.4 對PKC的影響
        4.3.5 對CREB的影響
        4.3.6 對c-jun、c-fos和fos-B的影響
        4.3.7 對BDNF的影響
5 結論
致謝
參考文獻
附錄
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]七氟醚對老齡大鼠海馬CaMKⅡ/CREB信號通路的影響[J]. 王瑩,王曉冬,王彩霞,邱頤.  中華麻醉學雜志. 2017 (02)
[2]p-ERK1/2在17β雌二醇抑制丙泊酚致新生大鼠海馬神經(jīng)細胞凋亡中的作用[J]. 吳曉倩,李建立,容俊芳.  中華麻醉學雜志. 2017 (02)
[3]有氧運動調(diào)節(jié)APP/PS1小鼠海馬CaMKⅡα、AMPAR活性,增加突觸可塑性[J]. 於來康,顧博雅,李巖,趙麗.  北京體育大學學報. 2017(01)
[4]氯胺酮與咪達唑侖對巴馬豬腦組織cAMP信號通路的影響[J]. 陳蕊,師銘咸,郭岑,曹馨方,張宇,周彤,李欣然,于東旭,魏成威,高利.  中國獸醫(yī)雜志. 2016(10)
[5]Anesthesia-induced neurotoxicity in an animal model of the developing brain:mechanism and therapies[J]. Maiko Satomoto,Koshi Makita.  Neural Regeneration Research. 2016(09)
[6]鹿復合麻醉劑對大鼠小腦和海馬突觸體Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影響[J]. 李虹瑾,付連軍,王秋竹,沙萬里,李雨航,鄭洪娟,尹柏雙.  畜牧與獸醫(yī). 2016(06)
[7]鹿特異性復合麻醉劑對大鼠大腦皮層Na+-K+-ATP酶活性的影響[J]. 馮雪,付連軍,林博,常乃元,李京乘,李聞軒,尹柏雙.  湖北農(nóng)業(yè)科學. 2016(04)
[8]間隔聯(lián)合應用BAM8-22增強慢性嗎啡抑制c-Fos表達的作用[J]. 江劍平,付艷,胡粉娟.  福建師范大學學報(自然科學版). 2015(04)
[9]溫膽湯含藥血清對谷氨酸條件下原代星形膠質(zhì)細胞P38MAPK及PKC的影響[J]. 劉丹丹,魏妍妍,熊懷亮,戎文娟,朱金華,萬紅嬌.  中藥藥理與臨床. 2015(01)
[10]噻拉嗪對山羊不同腦區(qū)ATP酶活性的影響[J]. 高利,張宇,魏成威,劉子睿,吳越,于東序,劉沫,姜仁禮,李欣然,王冠穎.  中國獸醫(yī)雜志. 2014(11)

博士論文
[1]SIRT1-p53、cAMP/CREB信號通路參與老年大鼠吸入麻醉致學習與記憶損害的機制研究[D]. 熊萬霞.復旦大學 2014
[2]采用遺傳藥理學方法激活中腦多巴胺神經(jīng)元導致DAT-Cre小鼠高活動性的研究[D]. 王淑杰.吉林大學 2013

碩士論文
[1]小鼠腦缺血后血腦屏障通透性的改變對小膠質(zhì)細胞的影響[D]. 成曉峰.蘭州大學 2017
[2]丁香酚對鯉魚中樞神經(jīng)NO-cGMP等信號轉導影響的研究[D]. 孫文淵.貴州大學 2015
[3]氯氮平與利培酮對精神分裂癥患者社會認知的影響[D]. 趙彩榮.安徽醫(yī)科大學 2013
[4]右美托咪定在高血壓腦出血術后鎮(zhèn)靜的應用[D]. 閻龍.吉林大學 2013
[5]山羊用隆朋合劑研制及其藥代動力學的研究[D]. 韓光.東北農(nóng)業(yè)大學 2011
[6]山羊復合麻醉劑對山羊中樞NO信號轉導通路的影響[D]. 賈冰.東北農(nóng)業(yè)大學 2011



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