本試驗以雄性Wistar大鼠為研究對象,給予噻拉嗪麻醉,通過測定大鼠不同腦區(qū)不同麻醉時期的PKA、ERK1/2/CREB/BDNF信號通路中的相關(guān)蛋白及基因表達(dá)的變化,探討噻拉嗪麻醉的作用機(jī)理。試驗選取35只雄性Wistar大鼠,分成對照組（C）和麻醉組（X）,麻醉組又被隨機(jī)分為6組（n=5）:誘導(dǎo)組（X1）、翻正反射消失0 min組（X2）、翻正反射消失30 min組（X3）、翻正反射消失60 min組（X4）、翻正反射恢復(fù)0 min組（X5）和翻正反射恢復(fù)30 min組（X6）。對照組大鼠在注射生理鹽水8 min后,麻醉組在注射噻拉嗪（70 mg/kg）各個時間點之后,立即斷頭處死大鼠并取腦組織,利用RT-PCR方法檢測GluR1、GluR2、ERK1/2、PKC、PKA、CREB、c-jun、c-fos、fos-B和BDNF的mRNA表達(dá);Western blot方法檢測GluR1、GluR2、ERK1/2/p-ERK1/2、PKA/p-PKA、PKC/p-PKC、CREB/p-CREB和BDNF的蛋白表達(dá)。利用ATP酶試劑盒測定ATP酶的活性,通過ELISA試劑盒測定cAMP的... 

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 噻拉嗪的概述
        1.1.1 噻拉嗪的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用
        1.1.2 噻拉嗪的麻醉作用
        1.1.3 噻拉嗪復(fù)合麻醉劑的應(yīng)用
    1.2 動物全身麻醉
        1.2.1 全身麻醉概念
        1.2.2 全身麻醉的研究進(jìn)展
        1.2.3 全身麻醉對神經(jīng)系統(tǒng)的作用
        1.2.4 全麻藥與相關(guān)信號通路的關(guān)系
    1.3 CREB信號通路與麻醉
        1.3.1 GluR1、GluR2與麻醉的關(guān)系
        1.3.2 ATP酶與麻醉的關(guān)系
        1.3.3 cAMP與麻醉的關(guān)系
        1.3.4 ERK1/2與麻醉的關(guān)系
        1.3.5 PKC與麻醉的關(guān)系
        1.3.6 PKA與麻醉的關(guān)系
        1.3.7 CREB與麻醉的關(guān)系
        1.3.8 c-fos、c-jun和fos-B與麻醉的關(guān)系
        1.3.9 BDNF與麻醉的關(guān)系
    1.4 試驗?zāi)康募耙饬x
2 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 試驗動物
        2.1.2 試驗儀器設(shè)備
        2.1.3 試驗試劑和藥品
    2.2 試驗方法
        2.2.1 試驗技術(shù)路線圖
        2.2.2 噻拉嗪麻醉劑量的確定
        2.2.3 試驗動物分組
        2.2.4 腦組織采集
        2.2.5 PC12細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2.6 細(xì)胞中噻拉嗪給藥劑量的測定
        2.2.7 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.2.8 ATP酶活性檢測
        2.2.9 cAMP含量的測定
        2.2.10 實時定量PCR
        2.2.11 蛋白免疫印跡技術(shù)
        2.2.12 數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計
3 結(jié)果
    3.1 噻拉嗪麻醉大鼠最佳劑量的篩選
    3.2 細(xì)胞中噻拉嗪給藥劑量的篩選
    3.3 噻拉嗪麻醉對大鼠不同腦區(qū)內(nèi)ATP酶活性的影響
        3.3.1 對大鼠不同腦區(qū)Na~+-K~+-ATP酶活性的影響
        3.3.2 對大鼠不同腦區(qū)Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的影響
    3.4 噻拉嗪麻醉對大鼠不同腦區(qū)內(nèi)cAMP含量的影響
    3.5 噻拉嗪對大鼠同腦區(qū)基因表不達(dá)的影響
        3.5.1 對大腦內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
        3.5.2 對小腦內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
        3.5.3 對海馬內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
        3.5.4 對丘腦內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
        3.5.5 對腦干內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
    3.6 對PC12細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)水平的影響
    3.7 噻拉嗪麻醉對大鼠不同腦區(qū)內(nèi)蛋白表達(dá)的影響
        3.7.1 對大腦內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
        3.7.2 對小腦內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
        3.7.3 對海馬內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
        3.7.4 對丘腦內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
        3.7.5 對腦干內(nèi)蛋白表達(dá)水平的影響
    3.8 對PC12細(xì)胞內(nèi)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
4 討論
    4.1 噻拉嗪麻醉對ATP酶活性的影響
        4.1.1 對大鼠不同腦區(qū)內(nèi)Na~+-K~+-ATP酶活性的影響
        4.1.2 對大鼠不同腦區(qū)內(nèi)Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性的影響
    4.2 噻拉嗪麻醉對大鼠不同腦區(qū)內(nèi)cAMP含量的影響
    4.3 噻拉嗪麻醉對相關(guān)信號通路的影響
        4.3.1 對GluR1和GluR2的影響
        4.3.2 對ERK1/2的影響
        4.3.3 對PKA的影響
        4.3.4 對PKC的影響
        4.3.5 對CREB的影響
        4.3.6 對c-jun、c-fos和fos-B的影響
        4.3.7 對BDNF的影響
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]小鼠腦缺血后血腦屏障通透性的改變對小膠質(zhì)細(xì)胞的影響[D]. 成曉峰.蘭州大學(xué) 2017
[2]丁香酚對鯉魚中樞神經(jīng)NO-cGMP等信號轉(zhuǎn)導(dǎo)影響的研究[D]. 孫文淵.貴州大學(xué) 2015
[3]氯氮平與利培酮對精神分裂癥患者社會認(rèn)知的影響[D]. 趙彩榮.安徽醫(yī)科大學(xué) 2013
[4]右美托咪定在高血壓腦出血術(shù)后鎮(zhèn)靜的應(yīng)用[D]. 閻龍.吉林大學(xué) 2013
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[6]山羊復(fù)合麻醉劑對山羊中樞NO信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響[D]. 賈冰.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011



本文編號：3685537