依托咪酯對(duì)新生大鼠離體脊髓腹角神經(jīng)元電生理特性及nAChR的影響
發(fā)布時(shí)間:2022-07-15 10:48
目的:脊髓是人體運(yùn)動(dòng)控制的初級(jí)中樞,存在復(fù)雜的膽堿能神經(jīng)系統(tǒng),能直接或間接地參與脊髓的運(yùn)動(dòng)控制。煙堿型乙酰膽堿受體(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)在脊髓腹角有廣泛分布,對(duì)于脊髓運(yùn)動(dòng)控制具有重要的調(diào)制功能。探討依托咪酯(etomidate,ET)對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元電生理特性及nAChR的影響,這不僅有助于深化理解ET發(fā)揮麻醉作用的脊髓機(jī)制,也將為指導(dǎo)臨床用藥提供新的理論依據(jù)。方法:選用7?12 d新生Sprague Dawley(SD)大鼠,麻醉后,將其含有腰骶膨大的脊髓游離并切片,用木瓜蛋白酶(Papain,0.18 g/30 ml人工腦脊液)對(duì)脊髓切片進(jìn)行恒溫消化20-25 min后孵育40-50 min,在體視顯微鏡下選出切片的腹角,用經(jīng)火拋光的不同口徑的巴斯德吸管對(duì)神經(jīng)細(xì)胞進(jìn)行急性機(jī)械分離,對(duì)貼壁的狀態(tài)良好的神經(jīng)細(xì)胞結(jié)合藥理學(xué)方法實(shí)施穿孔膜片鉗記錄實(shí)驗(yàn)。在電流鉗模式下,先記錄脊髓腹角神經(jīng)元自發(fā)動(dòng)作電位(Action Potential,AP),然后結(jié)合預(yù)處理給藥方式,分別記錄不同濃度的依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元自發(fā)AP的影響。在電壓鉗模...
【文章頁數(shù)】:83 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中英文縮略詞對(duì)照表
摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
1 材料
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備、儀器與軟件
1.3 實(shí)驗(yàn)溶液與藥品
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線
2.2 脊髓切片制備
2.2.1 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
2.2.2 游離脊髓
2.2.3 脊髓切片
2.3 急性機(jī)械分離脊髓腹角神經(jīng)元
2.3.1 酶消化脊髓切片
2.3.2 機(jī)械吹打脊髓腹角切片
2.4 快速給藥系統(tǒng)結(jié)合重力給藥
2.5 穿孔膜片鉗記錄
2.5.1 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
2.5.2 實(shí)驗(yàn)操作
2.5.3 實(shí)驗(yàn)?zāi)J?br> 2.6 數(shù)據(jù)采集與分析
結(jié)果
1 脊髓腹角神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)觀察
2 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元電生理特性的影響
3 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的作用
4 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的抑制具有濃度依賴性
5 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的抑制具有電壓依賴性
6 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的抑制具有使用依賴性
討論
1 脊髓切片及實(shí)驗(yàn)結(jié)果評(píng)估
2 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元AP的影響及可能機(jī)制
3 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元放電頻率的抑制
4 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的抑制
4.1 依托咪酯濃度依賴性地抑制脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流
4.2 依托咪酯電壓依賴性地抑制脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流
4.3 依托咪酯使用依賴性地抑制脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及讀研期間主要科研成果
致謝
本文編號(hào):3661898
【文章頁數(shù)】:83 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中英文縮略詞對(duì)照表
摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
1 材料
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備、儀器與軟件
1.3 實(shí)驗(yàn)溶液與藥品
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線
2.2 脊髓切片制備
2.2.1 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
2.2.2 游離脊髓
2.2.3 脊髓切片
2.3 急性機(jī)械分離脊髓腹角神經(jīng)元
2.3.1 酶消化脊髓切片
2.3.2 機(jī)械吹打脊髓腹角切片
2.4 快速給藥系統(tǒng)結(jié)合重力給藥
2.5 穿孔膜片鉗記錄
2.5.1 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
2.5.2 實(shí)驗(yàn)操作
2.5.3 實(shí)驗(yàn)?zāi)J?br> 2.6 數(shù)據(jù)采集與分析
結(jié)果
1 脊髓腹角神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)觀察
2 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元電生理特性的影響
3 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的作用
4 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的抑制具有濃度依賴性
5 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的抑制具有電壓依賴性
6 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的抑制具有使用依賴性
討論
1 脊髓切片及實(shí)驗(yàn)結(jié)果評(píng)估
2 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元AP的影響及可能機(jī)制
3 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元放電頻率的抑制
4 依托咪酯對(duì)脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流的抑制
4.1 依托咪酯濃度依賴性地抑制脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流
4.2 依托咪酯電壓依賴性地抑制脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流
4.3 依托咪酯使用依賴性地抑制脊髓腹角神經(jīng)元尼古丁電流
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及讀研期間主要科研成果
致謝
本文編號(hào):3661898
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