目的:探討心肌內(nèi)向整流鉀通道(K_ir)激動劑zacopride缺血后適應(yīng)對大鼠缺血/再灌注性心律失常的影響及可能的電生理學(xué)機(jī)制。方法:SD大鼠Langendorff離體灌流心臟和在體麻醉大鼠冠狀動脈左前降支結(jié)扎15 min后松扎15 min誘發(fā)缺血/再灌注性心律失常。在冠狀動脈左前降支松扎前3 min給予zacopride,觀察缺血后適應(yīng)對再灌注性心律失常的影響。膠原酶法分離大鼠單個心室肌細(xì)胞,應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)觀察zacopride對心室肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧致延遲后除極的影響和對細(xì)胞膜表面ATP敏感性鉀通道（KATP）的影響。結(jié)果:大鼠離體心臟再灌注時預(yù)先給予0.1¹0μmol/L zacopride可有效抑制再灌注性心律失常的發(fā)生。其中0.1μmol/L zacopride為最大效應(yīng)濃度,可使期前收縮數(shù)減少,室速和室顫發(fā)生率均下降,持續(xù)時間均縮短;再灌前3 min將1μmol/L BaCl₂和0.1μmol/L zacopride同時灌流心臟,BaCl₂可部分逆轉(zhuǎn)zacopride的保護(hù)效應(yīng)（P&... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2016,32(11)北大核心CSCD

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Zacopride對缺氧/復(fù)氧誘發(fā)DADs的影響Current(nA)

Figure3．Theeffectofzacopride(Zaco)onKATPinisolatedratventricularmyocytes．A:thecurrent-voltagerelationofbackgroundcurrentorKATPcurrent;B:inatypicalexperiment(at20mVcommandpotential)，Zacoat1μmol/LhadnosignificanteffectonKATPcurrent．圖3Zacopride對KATP的影響心肌缺血/再灌注時，細(xì)胞內(nèi)鈣超載誘發(fā)的DADs被認(rèn)為是再灌注誘發(fā)心律失常的主要原因之一［4-6］。同時，再灌注導(dǎo)致的酸中毒、溶血磷脂和兒茶酚胺釋放均能抑制IK1。Pogwizd等［11］指出，促進(jìn)DADs的3個因素是肌漿網(wǎng)自發(fā)的Ca2+釋放、Na/Ca交換活性加強，后鈣瞬變引發(fā)較強的INCX和IK1被抑制，膜電導(dǎo)降低，使內(nèi)向的INCX引發(fā)膜電位較強地去極化。如能適當(dāng)激動IK1以恢復(fù)降低的膜電導(dǎo)，理論上將有助于消除DADs。再者，提出增強Kir而抗心律失常的思路是考慮到適度增強IK1會使靜息電位增大，這對消除任何因素引發(fā)的異常自律活動都是有益的。本研究中，zacopride作為Kir選擇性激動劑，其抗心律失常效應(yīng)可被Kir阻斷劑BaCl2所拮抗，表明zacopride的抗缺血/再灌注性心律失常是由Kir介導(dǎo)的。通過激動Kir，zacopride使心肌細(xì)胞膜超極化，并適度縮短動作電位時程，減少Ca2+內(nèi)流和Ca2+超載，有效消除DADs和由此觸發(fā)的心律失常。在離體心臟灌流實驗中，我們還發(fā)現(xiàn)，zacopride抗心律失常的最大效應(yīng)濃度為0．1μmol/L，而在正常條件下，zacopride激動Kir的最大效應(yīng)濃度為1μmol/L，兩者相差10倍。分析其可能的原因，一是再灌注早期，缺血區(qū)心肌細(xì)胞外蓄積的K+被沖洗而濃度降低，以及細(xì)胞膜上Na+-K+pump激活，細(xì)胞重吸收K+，排出Na+，產(chǎn)生了凈外向離子流，引起膜?

ts．*P＜0．05，＊＊P＜0．01vsI/Ｒ;#P＜0．05vslidocaine．2Zacopride可抑制缺氧/復(fù)氧誘發(fā)的延遲后除極如圖2所示分離的大鼠心室肌細(xì)胞缺氧30min后復(fù)氧，有80．0%(12/15)的細(xì)胞出現(xiàn)DADs，而灌流液中預(yù)先給予0.1μmol/Lzacopride可縮短動作電位時程，有效抑制DADs的發(fā)生，發(fā)生率降至26.7%(4/15)。Figure2．Theeffectofzacoprideonhypoxia/reoxygenation-induceddelayedafterdepolarizations(DADs)．0.1μmol/Lzacoprideat-tenuatedtheincidenceofDADs．Mean±SEM．n=15．＊＊P＜0.01vsreoxygenation．圖2Zacopride對缺氧/復(fù)氧誘發(fā)DADs的影響Current(nA)3Zacopride不激活KATP圖3示KATP電流的記錄方法。鉗制細(xì)胞從－40mV斜坡電位快速去極化至60mV以失活鈉通道，之后以20mV/s速度逐漸超極化至－140mV，記錄背景電流。Pinacidil是已知的KATP開放劑，glibenclamide為KATP阻斷劑。在去極化電位時，10μmol/Lpinaci-dil可誘導(dǎo)背景外向電流明顯增大，該電流可被10μmol/Lglibenclamide所抑制，此即KATP電流。相同條件下，將細(xì)胞始終鉗制于+20mV，在此電位下Kir不激活。應(yīng)用1μmol/Lzacopride對背景電流無明顯影響，給藥后電流密度(2．85±0．17)pA/pF，與給藥前［(2．84±0．21)pA/pF］和應(yīng)用glibenclamide后［(2．85±0．26)pA/pF］相比，差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性，表明zacopride不能激活KATP。討論鑒于臨床應(yīng)用的抗心律失常藥物幾乎都是各種離子通道或受體的阻斷劑，很多學(xué)者傾向于抑制IK1而發(fā)揮抗心律失常效應(yīng)。例如，Warren等［9］在豚鼠應(yīng)用Kir阻斷劑BaCl2可以有效終止室顫。但事實上，IK1在心律失常發(fā)生發(fā)展中的作用很復(fù)雜，應(yīng)根據(jù)不同病理原因、不同機(jī)制所致的不同類型

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大鼠活體心肌缺血再灌注損傷模型的建立與綜合評估[J]. 鄧宇珺,符永恒,譚寧,曾紅科,單志新,林秋雄,李曉紅,董小莉,余細(xì)勇,楊敏,譚衛(wèi)萍,蘇健.  中國病理生理雜志. 2011(02)



本文編號：3534865