力竭運(yùn)動(dòng)及鈍挫傷對(duì)大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞體外增殖及AMPK/TSC2/mTOR的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-05-09 03:32
目的:研究力竭運(yùn)動(dòng)及鈍挫傷對(duì)大鼠肌衛(wèi)星細(xì)胞及AMPK、TSC2、mTOR的影響,探究骨骼肌損傷修復(fù)過(guò)程,為骨骼肌損傷修復(fù)提供理論依據(jù)。方法:選取24只SD雄性大鼠,隨機(jī)分成4組,每組6只。分別是安靜對(duì)照組(Control,20C)6只;力竭運(yùn)動(dòng)組(Exhaustive20exercise20group)18只:力竭運(yùn)動(dòng)組進(jìn)行一次力竭性下坡跑運(yùn)動(dòng)達(dá)到力竭狀態(tài),并取即刻組(Exhaustive,20EO)、力竭后24h組(E24)、力竭后48h組(E48)。力竭組和安靜對(duì)照組分別于力竭運(yùn)動(dòng)后不同時(shí)間點(diǎn)和安靜狀態(tài)下麻醉,宰殺取血,并取下右側(cè)股四頭肌,股四頭肌一分為二,一份立即進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),一份-80。保存待檢測(cè)AMPK、TSC2、mTOR的含量及變化。鈍挫傷組:另選6只SD雄性大鼠,分為鈍挫傷即刻組(Contusion,20DO)、鈍挫傷24h組(D24)、鈍挫傷48h組(D48),進(jìn)行麻醉,摘取右側(cè)股四頭肌,立即進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。另取新生鼠3只,亦取股四頭肌進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果:1、根據(jù)肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示:安靜對(duì)照組無(wú)明顯肌衛(wèi)星細(xì)胞出現(xiàn);力竭組與鈍挫傷組相比肌衛(wèi)星細(xì)胞含量較少,增...
【文章來(lái)源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省
【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略詞表
前言
文獻(xiàn)綜述
1 骨骼肌損傷
1.1 骨骼肌的解剖生理概述
1.2 運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷
1.3 骨骼肌鈍挫傷
1.4 骨骼肌損傷機(jī)制
1.4.1 自由基損傷假說(shuō)
1.4.2 鈣離子超載學(xué)說(shuō)
1.4.3 急性炎癥反應(yīng)損傷學(xué)說(shuō)
1.4.4 機(jī)械損傷學(xué)說(shuō)
1.4.5 骨骼肌細(xì)胞凋亡
2 骨骼肌修復(fù)與肌衛(wèi)星細(xì)胞
2.1 骨骼肌修復(fù)機(jī)制
2.2 肌衛(wèi)星細(xì)胞的分離方法
2.2.1 酶消化法
2.2.2 組織塊法
2.2.3 單根肌纖維法
2.3 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的純化方法
2.3.1 差速貼壁法
2.3.2 Percoll液密度梯度離心法
2.4 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)
2.5 衛(wèi)星細(xì)胞的鑒定
2.6 肌衛(wèi)星細(xì)胞與骨骼肌修復(fù)
3 AMPK/TSC2/mTOR信號(hào)傳導(dǎo)通路與骨骼肌運(yùn)動(dòng)損傷及修復(fù)的關(guān)系
3.1 AMPK的結(jié)構(gòu)與功能
3.2 TSC
3.3 mTOR與骨骼肌運(yùn)動(dòng)損傷及修復(fù)
實(shí)驗(yàn)部分
1、實(shí)驗(yàn)對(duì)象與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
1.2 動(dòng)物分組
1.3 實(shí)驗(yàn)?zāi)P?br> 1.4 實(shí)驗(yàn)取材
2、材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)
3. 實(shí)驗(yàn)條件
3.1 肌衛(wèi)星細(xì)胞的培養(yǎng)條件
3.2 酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)的方法
3.3 蛋白含量測(cè)定
4 數(shù)據(jù)處理
5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
5.1 大鼠一般情況觀察
5.2 力竭運(yùn)動(dòng)及鈍挫傷后即刻、24h、48h組大鼠和新生鼠SC體外培養(yǎng)的結(jié)果
5.3 力竭運(yùn)動(dòng)即刻組、24h組、48h組大鼠骨骼肌AMPK、TSC2、mTOR的變化情況
6 討論與分析
6.1 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的培養(yǎng)
6.2 力竭運(yùn)動(dòng)、鈍挫傷和新生鼠SC體外培養(yǎng)增殖和分化的情況對(duì)比
6.3 力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌AMPK/TSC2/mTOR通路的影響
7 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]兔骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞成肌誘導(dǎo)分化及鑒定[J]. 代陽(yáng),王軼敏,劉新峰,周朋洋,郭宏,丁向彬. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2014(21)
[2]針刺對(duì)骨骼肌急性鈍挫傷模型形態(tài)學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)觀察[J]. 黃怡然,張茜,李文迅,董摩揚(yáng),李娜,丁婷婷,路問(wèn)天,嚴(yán)安,郭長(zhǎng)青. 世界中醫(yī)藥. 2014(04)
[3]不同運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌mTOR信號(hào)傳導(dǎo)通路影響的研究進(jìn)展[J]. 姜洋. 當(dāng)代體育科技. 2012(27)
[4]SD大鼠骨骼肌鈍挫傷早期的組織病理變化[J]. 劉樹(shù)坤,于曉華,吳耀義,徐明明,趙竹英,羅茜,馬傳雨. 中國(guó)組織工程研究. 2012(24)
[5]大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的原代培養(yǎng)和鑒定[J]. 陳思凡,李文學(xué),陳建玲,楊光宇,劉華章,朱偉. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2011(04)
[6]一次大強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌蛋白質(zhì)降解和AMPK活性變化的影響[J]. 馬延超,朱榮,許壽生,王瑞元. 體育學(xué)刊. 2011(02)
[7]運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷相關(guān)指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 宋衛(wèi)紅,湯長(zhǎng)發(fā),梁小文,廖艷萍. 首都體育學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(02)
[8]mTOR/S6K1信號(hào)通路與胰島素抵抗的關(guān)系及有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)其影響的研究[J]. 牛燕媚,苑紅,張寧,傅力. 中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2010(04)
[9]運(yùn)動(dòng)性骨骼肌微損傷和修復(fù)的機(jī)制研究[J]. 魏源,李良鳴,邢文華,楊則宜. 廣州體育學(xué)院學(xué)報(bào). 2010(05)
[10]黃柳菇多糖對(duì)運(yùn)動(dòng)大鼠部分抗氧化指標(biāo)的影響[J]. 王勇,吳鶴群,習(xí)雪峰. 衡水學(xué)院學(xué)報(bào). 2010(04)
博士論文
[1]高住低訓(xùn)對(duì)骨骼肌AMPK/TSC2/mTOR信號(hào)的調(diào)控[D]. 許猛.北京體育大學(xué) 2011
碩士論文
[1]LKB1,14-3-3γ和AMPK在肝癌發(fā)生過(guò)程中的表達(dá)規(guī)律及其相互關(guān)系的研究[D]. 孫韓艷.安徽大學(xué) 2012
[2]LKB1-AMPK-mTOR信號(hào)傳導(dǎo)通路在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系中的初步研究[D]. 張霞.天津醫(yī)科大學(xué) 2011
本文編號(hào):3176533
【文章來(lái)源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省
【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略詞表
前言
文獻(xiàn)綜述
1 骨骼肌損傷
1.1 骨骼肌的解剖生理概述
1.2 運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷
1.3 骨骼肌鈍挫傷
1.4 骨骼肌損傷機(jī)制
1.4.1 自由基損傷假說(shuō)
1.4.2 鈣離子超載學(xué)說(shuō)
1.4.3 急性炎癥反應(yīng)損傷學(xué)說(shuō)
1.4.4 機(jī)械損傷學(xué)說(shuō)
1.4.5 骨骼肌細(xì)胞凋亡
2 骨骼肌修復(fù)與肌衛(wèi)星細(xì)胞
2.1 骨骼肌修復(fù)機(jī)制
2.2 肌衛(wèi)星細(xì)胞的分離方法
2.2.1 酶消化法
2.2.2 組織塊法
2.2.3 單根肌纖維法
2.3 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的純化方法
2.3.1 差速貼壁法
2.3.2 Percoll液密度梯度離心法
2.4 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)
2.5 衛(wèi)星細(xì)胞的鑒定
2.6 肌衛(wèi)星細(xì)胞與骨骼肌修復(fù)
3 AMPK/TSC2/mTOR信號(hào)傳導(dǎo)通路與骨骼肌運(yùn)動(dòng)損傷及修復(fù)的關(guān)系
3.1 AMPK的結(jié)構(gòu)與功能
3.2 TSC
3.3 mTOR與骨骼肌運(yùn)動(dòng)損傷及修復(fù)
實(shí)驗(yàn)部分
1、實(shí)驗(yàn)對(duì)象與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
1.2 動(dòng)物分組
1.3 實(shí)驗(yàn)?zāi)P?br> 1.4 實(shí)驗(yàn)取材
2、材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)
3. 實(shí)驗(yàn)條件
3.1 肌衛(wèi)星細(xì)胞的培養(yǎng)條件
3.2 酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)的方法
3.3 蛋白含量測(cè)定
4 數(shù)據(jù)處理
5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
5.1 大鼠一般情況觀察
5.2 力竭運(yùn)動(dòng)及鈍挫傷后即刻、24h、48h組大鼠和新生鼠SC體外培養(yǎng)的結(jié)果
5.3 力竭運(yùn)動(dòng)即刻組、24h組、48h組大鼠骨骼肌AMPK、TSC2、mTOR的變化情況
6 討論與分析
6.1 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的培養(yǎng)
6.2 力竭運(yùn)動(dòng)、鈍挫傷和新生鼠SC體外培養(yǎng)增殖和分化的情況對(duì)比
6.3 力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌AMPK/TSC2/mTOR通路的影響
7 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]兔骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞成肌誘導(dǎo)分化及鑒定[J]. 代陽(yáng),王軼敏,劉新峰,周朋洋,郭宏,丁向彬. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2014(21)
[2]針刺對(duì)骨骼肌急性鈍挫傷模型形態(tài)學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)觀察[J]. 黃怡然,張茜,李文迅,董摩揚(yáng),李娜,丁婷婷,路問(wèn)天,嚴(yán)安,郭長(zhǎng)青. 世界中醫(yī)藥. 2014(04)
[3]不同運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌mTOR信號(hào)傳導(dǎo)通路影響的研究進(jìn)展[J]. 姜洋. 當(dāng)代體育科技. 2012(27)
[4]SD大鼠骨骼肌鈍挫傷早期的組織病理變化[J]. 劉樹(shù)坤,于曉華,吳耀義,徐明明,趙竹英,羅茜,馬傳雨. 中國(guó)組織工程研究. 2012(24)
[5]大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的原代培養(yǎng)和鑒定[J]. 陳思凡,李文學(xué),陳建玲,楊光宇,劉華章,朱偉. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2011(04)
[6]一次大強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌蛋白質(zhì)降解和AMPK活性變化的影響[J]. 馬延超,朱榮,許壽生,王瑞元. 體育學(xué)刊. 2011(02)
[7]運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷相關(guān)指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 宋衛(wèi)紅,湯長(zhǎng)發(fā),梁小文,廖艷萍. 首都體育學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(02)
[8]mTOR/S6K1信號(hào)通路與胰島素抵抗的關(guān)系及有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)其影響的研究[J]. 牛燕媚,苑紅,張寧,傅力. 中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2010(04)
[9]運(yùn)動(dòng)性骨骼肌微損傷和修復(fù)的機(jī)制研究[J]. 魏源,李良鳴,邢文華,楊則宜. 廣州體育學(xué)院學(xué)報(bào). 2010(05)
[10]黃柳菇多糖對(duì)運(yùn)動(dòng)大鼠部分抗氧化指標(biāo)的影響[J]. 王勇,吳鶴群,習(xí)雪峰. 衡水學(xué)院學(xué)報(bào). 2010(04)
博士論文
[1]高住低訓(xùn)對(duì)骨骼肌AMPK/TSC2/mTOR信號(hào)的調(diào)控[D]. 許猛.北京體育大學(xué) 2011
碩士論文
[1]LKB1,14-3-3γ和AMPK在肝癌發(fā)生過(guò)程中的表達(dá)規(guī)律及其相互關(guān)系的研究[D]. 孫韓艷.安徽大學(xué) 2012
[2]LKB1-AMPK-mTOR信號(hào)傳導(dǎo)通路在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系中的初步研究[D]. 張霞.天津醫(yī)科大學(xué) 2011
本文編號(hào):3176533
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