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大鼠視神經(jīng)挫傷后NO/NOS系統(tǒng)對(duì)RGCs凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-02-14 23:54
  [目的]建立損傷后不同時(shí)間點(diǎn)大鼠視神經(jīng)挫傷模型;研究一氧化氮在損傷不同時(shí)間點(diǎn)含量的變化及其與RGCs凋亡的關(guān)系,探討一氧化氮三種限速酶在NO含量變化過程中所發(fā)揮的作用,以期為臨床治療外傷性視神經(jīng)損傷提供新的思路和方法。[方法]1)建立大鼠視神經(jīng)夾挫傷動(dòng)物模型,將雙眼正常的成年SPF級(jí)SD雌性大鼠170只隨機(jī)分為三組,即正常組2只,手術(shù)組84只,假手術(shù)組84只,在相同條件下進(jìn)行飼養(yǎng),手術(shù)組每只大鼠左眼為手術(shù)眼,做視神經(jīng)夾挫傷模型,用夾持力為50g的夾持鑷在球后約2mm處鉗夾視神經(jīng)10s,右眼不做處理。假手術(shù)左眼僅分離視神經(jīng),不對(duì)視神經(jīng)進(jìn)行夾持,右眼不做處理。正常組雙眼不做任何處理。2)正常組2只左右眼做石蠟包埋切片;再將手術(shù)組與假手術(shù)組按損傷后時(shí)間點(diǎn)分為7個(gè)亞組,分別為6h組(12只,損傷后6小時(shí))、12h組(12只,損傷后12小時(shí))、24h組(12只,損傷后24小時(shí))、3d組(12只,損傷后3天)、5d組(12只,損傷后5天)、7d組(12只,損傷后7天)、14d組(12只,損傷后14天),在損傷后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)取下大鼠眼球,取材前先用水合氯醛麻醉大鼠,然后采用顯微有齒鑷及角鞏膜剪小心取下... 

【文章來(lái)源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

大鼠視神經(jīng)挫傷后NO/NOS系統(tǒng)對(duì)RGCs凋亡的影響


圖1視神經(jīng)夾持傷部位HE染色結(jié)果:A.正常組視神經(jīng)(X200)?;?B.正常組視神經(jīng)(X400);??C.手術(shù)組視神經(jīng)(X200)?;?D.手術(shù)組視神經(jīng)(X400)??1.2視網(wǎng)膜HE染色結(jié)果??

含量變化圖,視神經(jīng)損傷,含量變化,合酶


control?化?1?化?24h?3d?5d?7d?14d??圖5視神經(jīng)損傷后不同時(shí)間點(diǎn)NO含量變化與假手術(shù)狙相比P<0.0氮合酶iNOS、eNOS及nNOSmRNA檢測(cè)??氮合酶iNOS?mRNA檢測(cè)結(jié)果??民eal-time?PC民方法來(lái)檢測(cè)視神經(jīng)損傷后不同時(shí)間點(diǎn)視

均勻分布,視神經(jīng),夾持,視網(wǎng)膜


取各細(xì)視神經(jīng)作矢狀位切片并做HE染色,觀察夾持損傷部位的變化:正常姐大??鼠視神經(jīng)縱切片正常的神經(jīng)纖維呈線狀,向遠(yuǎn)端延伸,神經(jīng)纖維排列密集、規(guī)則,??染色均勻,膠質(zhì)細(xì)胞均勻分布(圖1A、1B);假手術(shù)組與正常組相比無(wú)明顯差??異;觀察夾持損傷部位,與未夾持部位相比,視神經(jīng)纖維稀疏扭曲,膠質(zhì)細(xì)胞排??列奈亂,視神經(jīng)纖淮出現(xiàn)明顯水腫和空泡變性,神經(jīng)纖維及膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊,??出現(xiàn)潰變(圖1C、1D)。??、睽中辛巧巧坦汾知‘??:舞/巧J?/,????。巧拓巧40化./??每??參瞬婦m??麵'.擔(dān)S,;/?,巧,a??b?觀鄉(xiāng)立!??ill?iiil??朵備;‘近,'.少!心..稱銷.汽??圖1視神經(jīng)夾持傷部位HE染色結(jié)果:A.正常組視神經(jīng)(X200)?;?B.正常組視神經(jīng)(X400);??C.手術(shù)組視神經(jīng)(X200)?;?D.手術(shù)組視神經(jīng)(X400)??1.2視網(wǎng)膜HE染色結(jié)果??對(duì)正常姐及各時(shí)點(diǎn)手術(shù)組及假手術(shù)組大鼠視網(wǎng)膜進(jìn)行HE染色后發(fā)現(xiàn);正常??大鼠視網(wǎng)膜HE染色可見H層細(xì)胞核,從玻璃體腔向鞏膜依次為神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、??雙極細(xì)胞層、感光細(xì)胞層,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層的細(xì)胞呈單層排列,內(nèi)核層及外核層清??晰


本文編號(hào):3034064

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