目的：明確電針傍刺促進(jìn)小鼠皮肽創(chuàng)傷組織愈合的作用；闡明電針傍刺對皮膚創(chuàng)傷修復(fù)促進(jìn)作用的調(diào)控機(jī)制。方法：本研究采用小鼠背部皮膚切除傷模型,將C57BL／6小鼠隨機(jī)分為正常組,模型組、電針傍刺組、電針抑制劑組,抑制劑組五組。每組干預(yù)前,先給予碘伏消毒。模型組只給予碘伏常規(guī)治療；電針治療組,模型處理后即開始給予電針傍刺治療；電針方法：造模后當(dāng)日即開始針刺；針刺前稍給異氟烷吸入麻醉,然后將動物固定于針刺操作臺上,選取創(chuàng)面中心和正常皮肽距離創(chuàng)面邊緣0.5cm處各一點給予毫針（0.20mm×13mm）針刺并連接微電流電刺激儀（MICRO PlUSTM,BioMedical Life Systems,Inc）,正極在外,負(fù)極在內(nèi),采用電流500 1a A,頻率0.5Hz,持續(xù)30分鐘,每日1次。電針抑制劑組和抑制劑組,造模前及每次電針治療前,給予腹腔注射PI3K特異性阻斷劑WOrtmannin 1.4mg.kg-1[1-4].實驗一,我們用求積儀透繪法檢測了模型組、電針傍刺組、電針抑制劑組皮膚創(chuàng)傷小鼠在1d,3d,7d,10d,14d時的愈合率；并記錄、比較了創(chuàng)面愈合時間；實驗二,對五組皮膚創(chuàng)傷小鼠... 

【文章來源】：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
ABSTRACT
前言
文獻(xiàn)綜述
    1 皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的研究進(jìn)展
        1.1 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)關(guān)于皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的研究進(jìn)展
            1.1.1 皮膚的構(gòu)造及功能
            1.1.2 皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的病理生理學(xué)
            1.1.3 皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的分子生物學(xué)
            1.1.4 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對創(chuàng)傷的治療
        1.2 中醫(yī)學(xué)對于皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的研究進(jìn)展
            1.2.1 中醫(yī)學(xué)關(guān)于皮膚創(chuàng)傷修復(fù)認(rèn)識的歷史沿革
            1.2.2 皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的中醫(yī)治療研究進(jìn)展
    2 PI3K/AKT信號通路的研究進(jìn)展
        2.1 PI3K/AKT信號通路總述
        2.2 PI3K/AKT信號通路各信號分子的結(jié)構(gòu)與作用
        2.3 PI3K/AKT信號通路抑制劑
        2.4 PI3K/AKT信號通路與損傷修復(fù)血管再生的關(guān)系
實驗一 電針對皮膚創(chuàng)傷愈合率和愈合時間的觀察
    1 實驗材料
        1.1 主要材料及試劑
            1.1.1 實驗動物
            1.1.2 主要實驗試劑
        1.2 主要儀器設(shè)備
    2 實驗方法
        2.1 動物分組情況
        2.2 動物造模方法
        2.3 動物電針傍刺治療方法
        2.4 透繪法求積儀測定皮膚創(chuàng)傷愈合率
        2.5 皮膚創(chuàng)傷愈合時間的測定
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
    4 實驗結(jié)果
        4.1 皮膚創(chuàng)傷愈合率變化
        4.2 皮膚創(chuàng)傷愈合時間變化
    5 實驗小結(jié)
實驗二 電針影響皮膚損傷組織eNOS,p-caspase-9表達(dá)的免疫組化實驗
    1 材料
        1.1 主要材料及試劑
            1.1.1 實驗動物
            1.1.2 實驗試劑
        1.2 主要儀器設(shè)備
    2 實驗方法
        2.1 動物造模方法
        2.2 實驗動物分組及取材
        2.3 PV兩步法免疫組化法檢測
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
    4 實驗結(jié)果
        4.1 小鼠皮膚創(chuàng)緣組織中eNOS的表達(dá)
        4.2 小鼠皮膚創(chuàng)緣組織中p-caspase-9的表達(dá)
    5 實驗小結(jié)
實驗三 電針傍刺對皮膚創(chuàng)傷組織Akt,eNOS,caspase-9mRNA表達(dá)的影響
    1 實驗材料
        1.1 主要材料及試劑
            1.1.1 實驗動物
            1.1.2 實驗試劑
        1.2 主要儀器設(shè)備
    2 實驗方法
        2.1 實驗動物造模方法
        2.2 實驗動物分組情況
        2.3 提取總RNA
        2.4 引物設(shè)計
        2.5 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
        2.6 Real-time PCR反應(yīng)
    3 數(shù)據(jù)處理
    4 統(tǒng)計分析
    5 實驗結(jié)果
        5.1 小鼠皮膚創(chuàng)緣組織中Akt mRNA的表達(dá)
        5.2 小鼠皮膚創(chuàng)緣組織中eNOS mRNA的表達(dá)
        5.3 小鼠皮膚創(chuàng)緣組織中caspase9 mRNA的表達(dá)
    6 實驗小結(jié)
實驗四 電針傍刺對皮膚創(chuàng)傷組織Akt,p-Akt,eNOS,p-CASPASE9蛋白表達(dá)的影響
    1 實驗材料
        1.1 主要材料及試劑
            1.1.1 實驗動物
            1.1.2 實驗試劑
        1.2 主要儀器設(shè)備
    2 實驗方法
        2.1 動物造模
        2.2 分組情況
        2.3 溶液的配置
        2.4 提取蛋白樣品
        2.5 檢測樣品蛋白濃度
        2.6 SDS-PAGE電泳
        2.7 轉(zhuǎn)膜
        2.8 免疫反應(yīng)
        2.9 化學(xué)發(fā)光壓片曝光
        2.10 數(shù)據(jù)處理
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
    4 實驗結(jié)果
        4.1 小鼠皮肽創(chuàng)緣組織中p-Akt,Akt蛋白的表達(dá)
        4.2 小鼠皮膚創(chuàng)緣組織中eNOS蛋白的表達(dá)
        4.3 小鼠皮膚創(chuàng)緣組織中p-caspase9蛋白的表達(dá)
    5 實驗小結(jié)
討論
    1. 選題依據(jù)
    2. 傍刺法對皮膚創(chuàng)傷愈合的影響
    3. 電刺激參數(shù)的選擇
    4. 實驗動物及造模方法的選擇
    5. 研究成果
    6. 不足與展望
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
個人簡歷
致謝



本文編號：2963792