目的:丹蛭降糖膠囊（DJC）是安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科的臨床經(jīng)驗(yàn)方,本課題在前期實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上,通過建立2型糖尿病血管病變大鼠模型,對丹蛭降糖膠囊主要藥效學(xué)指標(biāo)進(jìn)行考察;同時,運(yùn)用UPLC/QTOF-MS現(xiàn)代技術(shù)來研究丹蛭降糖膠囊干預(yù)4周后,大鼠尿液、血清代謝圖譜的變化,獲得相應(yīng)代謝譜并對其進(jìn)行模式識別和解析,鑒定可能的潛在生物標(biāo)志物,研究丹蛭降糖膠囊防治糖尿病血管病變的物質(zhì)基礎(chǔ)以及作用機(jī)制,為創(chuàng)新中藥復(fù)方制劑的研究方法進(jìn)行積極探索。方法:1、雄性SD大鼠,高脂飼料喂養(yǎng)4周,按35mg/kg劑量,腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）（0.1mmo L/L檸檬酸緩沖液溶解,p H=4.2）。3天后,以隨機(jī)血糖≥16.7mmo L/L為標(biāo)準(zhǔn),篩選2型糖尿病血管病變模型大鼠。造模成功后,灌胃給藥丹蛭降糖膠囊,連續(xù)給藥4周,每周尾靜脈取血檢測血糖。給藥2周時,各組隨機(jī)選擇大鼠6只,腹腔注射3.5%水合氯醛麻醉,腹主動脈取血5.0m L于肝素抗凝管中。給藥4周后,大鼠禁食12h,處死,麻醉腹主動脈取血。動態(tài)觀察給藥2周和4周時的指標(biāo)物質(zhì)的含量變化。采集得到的血液,靜置2h后,離心取血漿。用雙... 

【文章來源】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組HE染色切片結(jié)果（×400）

大小來衡量變量對分類的重要程度。VIP 值越大，對應(yīng)變量對分類的貢越大。本實(shí)驗(yàn)選擇 VIP 值>1 量及 P<0.05 對應(yīng)的成分作為差異性生物標(biāo)。通過 Human Metabolome Database 和 Kegg Compound Database 數(shù)據(jù)相應(yīng)標(biāo)記物的結(jié)構(gòu)鑒定。3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 系統(tǒng)穩(wěn)定性以確保保留時間、m/z 的穩(wěn)定性和質(zhì)量精度，在 UPLC/QTOF-MS 檢程中，隨行 QC 檢驗(yàn)，每檢測 6 個樣本，選擇進(jìn) 1 次混合樣本（混合樣指每個生物樣本中取出等份樣本混勻后制成的樣本，其與待測樣本代組成相近）[32]。圖 2 為正負(fù)離子模式下系統(tǒng)穩(wěn)定性檢測結(jié)果，如圖所示負(fù)離子模式下，系統(tǒng)在檢測過程中穩(wěn)定，得到的檢測數(shù)據(jù)可靠。

3.2 尿液樣品的 UPLC/QTOF-MS 分析所有采集的尿液樣本經(jīng)預(yù)處理后，用 UPLC/QTOF-MS 進(jìn)行分離和原始數(shù)據(jù)的采集，數(shù)據(jù)采集采用 Masslynx4.1 數(shù)據(jù)管理軟件。并對原始數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，包括峰挑選、峰對齊、去噪音、生成標(biāo)志物表過程。3.2.1 總離子流圖樣本用正負(fù)兩種離子模式進(jìn)行掃描，得到總離子流圖，圖 3 和圖 4 分別為正負(fù)離子模式下的總離子流圖。正常組大鼠的正離子模式下總離子流圖在峰的數(shù)量和峰面積方面與模型組大鼠不同。丹蛭降糖膠囊干預(yù)后，給藥組總離子流圖和模型組存在明顯差異，與正常組更加接近（見圖 3）。正常組、模型組和丹蛭降糖膠囊組的負(fù)離子模式下總離子流圖在 3 至 7 分鐘期間的峰形和峰數(shù)量方面存在一定差異（見圖 4），說明三組尿液中的內(nèi)源性代謝物存在顯著差異。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：2958635