大鼠雙肝移植后雙側(cè)移植物體積變化的研究
發(fā)布時(shí)間：2020-12-26 23:06
目的:探索大鼠雙肝移植后雙側(cè)移植物體積變化差異的原因及機(jī)制。方法:（1）建立大鼠雙供體肝移植模型:SPF級SD雄性大鼠96只,8-10周齡,體重（270g-300g）,隨機(jī)分為移植組（Transplantation group,n=72）和假手術(shù)組（對照組）（Sham group,n=24）,移植組隨機(jī)2只作為供體,1只作為受體。通過增加SD大鼠體重、獲取供體合適膽管長度、修剪Y型髂血管等技術(shù)建立并改進(jìn)大鼠雙肝移植模型,提高其穩(wěn)定性;（2）基于體重和蘇醒時(shí)間,測定雙肝移植大鼠的最適麻醉劑量;（3）通過核磁共振（MRI）連續(xù)動態(tài)觀察大鼠雙肝移植后雙側(cè)移植物的體積變化;（4）通過超聲連續(xù)觀察雙側(cè)移植物的門靜脈血流速（cm/s）度及血流量（cm3/s）;（5）血液標(biāo)本提取血清后使用全自動生化儀檢測移植后雙肝大鼠不同時(shí)間點(diǎn)的生化指標(biāo);（6）從形態(tài)學(xué)角度測量雙側(cè)移植物的體積和質(zhì)量,檢測雙移植物生長情況;（7）HE染色法在檢測移植后不同時(shí)間點(diǎn)雙側(cè)移植物的病理變化;（8）RT-PCR、western-blot法檢測雙側(cè)移植物caspase-3等凋亡蛋白在移植后不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)情...
【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：63 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
.2.1大鼠雙肝移植模型的建立及優(yōu)化實(shí)驗(yàn)的總體
蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文大鼠雙肝移植后雙側(cè)移植物體積變化的研究6圖1.1大鼠雙肝移植過程手術(shù)圖解Figure1.1Thediagrammaticdrawingofoperationprocessondual-graftslivingdonorlivertransplantationinrat供體的獲取大鼠均在4%水合氯醛麻醉下進(jìn)行，手術(shù)麻醉后剃腹部毛，取腹正中切口，用器械固定好大鼠，開腹游離肝臟周圍韌帶，仔細(xì)分離組織，結(jié)扎左膈下靜脈，左右肝管匯合處下5mm處切開膽總管前壁插管環(huán)扎，斷開遠(yuǎn)端。切斷不需要的肝葉保留需求肝，基于解剖位置門靜脈與大鼠肝臟右上葉相連，雙側(cè)移植物為肝右上葉（24.2%），仔細(xì)處理肝臟創(chuàng)面，避免出血。游離下腔靜脈和右腎靜脈并結(jié)扎。雙側(cè)移植物獲取用5-0絲線結(jié)扎離斷肝左外葉、左中葉、中葉、雙尾狀葉，剩余右上葉。供肝減體積后通過腹主動脈全身肝素化，再經(jīng)腹主動脈穿刺對肝臟進(jìn)行灌注。分離結(jié)扎并切斷幽門靜脈、脾靜脈、胃十二指腸靜脈，縫扎肝固有動脈，分別取下供肝，置于4℃生理鹽水中保存，待移植入受體。Y型血管獲取重建雙供體與受體間的門靜脈和膽道，取作為供體大鼠的下腔靜脈與髂血管之間Y型部分，進(jìn)行雙供體與受體間門靜脈重建，精細(xì)尋找髂血管周圍的分支小血管并離斷結(jié)扎，4～5根左右，Y型上端端口分別插入袖口（如果第一只供體髂血管由于各種原因破損，則可以取第二只供體髂血管）。供體的修剪和雙供體連接仔細(xì)檢查供體邊緣有否出血，避免移植后滲血，
蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文大鼠雙肝移植后雙側(cè)移植物體積變化的研究14第三章實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1大鼠雙供體肝移植模型的建立及優(yōu)化通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與Chen于2012的大鼠雙肝移植方法相比，通過增加大鼠體質(zhì)量、適度的膽管長度、修剪Y型血管、“三角形法”吻合的方法可以改進(jìn)該模型的穩(wěn)定性（圖1.2）；改進(jìn)后的模型生存率明顯提高，7天生存率由58.3%提高至87.5%，30天生存率為68.8%（圖1.3）。圖1.2改進(jìn)的手術(shù)操作技巧(A)供體膽管插管；(B)右側(cè)移植物增加右外葉；(C)修剪Y型髂血管；(D)三角形法吻合肝上下腔靜脈Figure1.2.Theimprovedoperationtechniques(A)Bileductintubation:theoptimumlengthwas5mmundertheliver.(B)Addingrightlaterallobetotherightgraft.(C)TrimmingY-shapedveinsandsuturingofsmallbranchesofbloodvessels.(D)Reconstructionoftheinferiorvenacavaby“trianglepullingmethod”
本文編號：2940608
【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：63 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
.2.1大鼠雙肝移植模型的建立及優(yōu)化實(shí)驗(yàn)的總體
蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文大鼠雙肝移植后雙側(cè)移植物體積變化的研究6圖1.1大鼠雙肝移植過程手術(shù)圖解Figure1.1Thediagrammaticdrawingofoperationprocessondual-graftslivingdonorlivertransplantationinrat供體的獲取大鼠均在4%水合氯醛麻醉下進(jìn)行，手術(shù)麻醉后剃腹部毛，取腹正中切口，用器械固定好大鼠，開腹游離肝臟周圍韌帶，仔細(xì)分離組織，結(jié)扎左膈下靜脈，左右肝管匯合處下5mm處切開膽總管前壁插管環(huán)扎，斷開遠(yuǎn)端。切斷不需要的肝葉保留需求肝，基于解剖位置門靜脈與大鼠肝臟右上葉相連，雙側(cè)移植物為肝右上葉（24.2%），仔細(xì)處理肝臟創(chuàng)面，避免出血。游離下腔靜脈和右腎靜脈并結(jié)扎。雙側(cè)移植物獲取用5-0絲線結(jié)扎離斷肝左外葉、左中葉、中葉、雙尾狀葉，剩余右上葉。供肝減體積后通過腹主動脈全身肝素化，再經(jīng)腹主動脈穿刺對肝臟進(jìn)行灌注。分離結(jié)扎并切斷幽門靜脈、脾靜脈、胃十二指腸靜脈，縫扎肝固有動脈，分別取下供肝，置于4℃生理鹽水中保存，待移植入受體。Y型血管獲取重建雙供體與受體間的門靜脈和膽道，取作為供體大鼠的下腔靜脈與髂血管之間Y型部分，進(jìn)行雙供體與受體間門靜脈重建，精細(xì)尋找髂血管周圍的分支小血管并離斷結(jié)扎，4～5根左右，Y型上端端口分別插入袖口（如果第一只供體髂血管由于各種原因破損，則可以取第二只供體髂血管）。供體的修剪和雙供體連接仔細(xì)檢查供體邊緣有否出血，避免移植后滲血，
蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文大鼠雙肝移植后雙側(cè)移植物體積變化的研究14第三章實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1大鼠雙供體肝移植模型的建立及優(yōu)化通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與Chen于2012的大鼠雙肝移植方法相比，通過增加大鼠體質(zhì)量、適度的膽管長度、修剪Y型血管、“三角形法”吻合的方法可以改進(jìn)該模型的穩(wěn)定性（圖1.2）；改進(jìn)后的模型生存率明顯提高，7天生存率由58.3%提高至87.5%，30天生存率為68.8%（圖1.3）。圖1.2改進(jìn)的手術(shù)操作技巧(A)供體膽管插管；(B)右側(cè)移植物增加右外葉；(C)修剪Y型髂血管；(D)三角形法吻合肝上下腔靜脈Figure1.2.Theimprovedoperationtechniques(A)Bileductintubation:theoptimumlengthwas5mmundertheliver.(B)Addingrightlaterallobetotherightgraft.(C)TrimmingY-shapedveinsandsuturingofsmallbranchesofbloodvessels.(D)Reconstructionoftheinferiorvenacavaby“trianglepullingmethod”
本文編號：2940608
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