本文關(guān)鍵詞：反式阿魏酸對(duì)大鼠離體冠狀動(dòng)脈的舒張作用及機(jī)制探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:(1)觀(guān)察反式阿魏酸(trans-Ferulic acid,1~3 mmol/L)對(duì)離體大鼠冠狀動(dòng)脈(rat coronary artery,RCA)靜息張力的影響。(2)在離體RCA上,觀(guān)察反式阿魏酸對(duì)KCl(60 mmol/L)、血栓素A2類(lèi)似物U46619(1μmol/L)、內(nèi)皮素-1(ET-1,0.01μmol/L)引起RCA收縮的抑制作用及舒張作用。(3)通過(guò)觀(guān)察血管內(nèi)皮、四種不同的選擇性鉀通道阻斷劑(4-AP、Gli、Ba Cl2和TEA)、NOS抑制劑(L-NAME)、COX-2環(huán)氧合酶抑制劑(Indo)對(duì)反式阿魏酸舒張離體RCA的影響,并探討其作用機(jī)制。(4)通過(guò)去鈣-復(fù)鈣的方法,探究反式阿魏酸舒張RCA與細(xì)胞外鈣內(nèi)流和內(nèi)鈣釋放的關(guān)系。方法:(1)離體RCA的制作方法:將SD雄性青年大鼠(200~250g)麻醉后立即斷頭、取出心臟,置于4℃、p H 7.40、O2飽和的生理鹽溶液(Physiological saline solution,PSS)中,并用若干大頭針固定。在解剖顯微鏡下迅速鈍性分離出冠狀動(dòng)脈的室間隔支、室壁支和前降支,剪成長(zhǎng)度約為2mm,內(nèi)徑200~300μm的血管環(huán),固定于微血管張力記錄儀(Multi Myograph System-610M,DMT)。采用Power Lab微血管環(huán)張力系統(tǒng)記錄不同濃度的反式阿魏酸(1,1.5,2,2.5,3 mmol/L)對(duì)離體RCA靜息張力的影響,以KCl(60 mmol/L)所致離體RCA的最大收縮幅度為100%,計(jì)算加入上述濃度的反式阿魏酸后離體RCA靜息張力的變化。(2)在DMT浴槽內(nèi)加入KCl、U46619或ET-1,使其浴槽內(nèi)終濃度分別為60mmol/L、1μmol/L、0.01μmol/L,預(yù)收縮離體RCA。當(dāng)收縮曲線(xiàn)再次回到基線(xiàn)時(shí),向浴槽中加入終濃度為1,1.5,2 mmol/L的反式阿魏酸,預(yù)孵15~20 min,分別以加入反式阿魏酸前KCl(60 mmol/L)、U46619(1μmol/L)或ET-1(0.01μmol/L)預(yù)收縮達(dá)到的最大收縮幅度為100%,計(jì)算加入上述濃度的反式阿魏酸后離體RCA的收縮百分比。(3)用KCl(60 mmol/L)、U46619(1μmol/L)或ET-1(0.01μmol/L)預(yù)收縮離體RCA達(dá)到坪臺(tái)后,向內(nèi)皮完整組和去內(nèi)皮組分別累積加入反式阿魏酸(1,1.5,2,2.5,3 mmol/L)。以預(yù)收縮達(dá)到坪臺(tái)時(shí)的收縮幅度為100%,計(jì)算加入上述濃度的反式阿魏酸后離體RCA的舒張百分比。(4)當(dāng)KCl(60 mmol/L)、U46619(1μmol/L)或ET-1(0.01μmol/L)預(yù)收縮離體RCA達(dá)到坪臺(tái)后,向浴槽中分別加入工具藥—鉀通道阻斷劑(TEA、Gli、Ba Cl2、4-AP)、NOS抑制劑(L-NAME)和COX-2環(huán)氧合酶抑制劑(Indo),預(yù)孵15min后血管再次收縮達(dá)到坪臺(tái),累積加入反式阿魏酸(1,1.5,2,2.5,3 mmol/L)。以預(yù)收縮達(dá)到坪臺(tái)時(shí)的收縮幅度為100%,觀(guān)察加入工具藥后反式阿魏酸對(duì)離體RCA舒張作用的變化,并計(jì)算其舒張百分比。(5)KCl(60 mmol/L)和U46619(1μmol/L)預(yù)收縮離體RCA達(dá)到坪臺(tái)后,采用去鈣-復(fù)鈣的實(shí)驗(yàn)方法,以預(yù)收縮達(dá)到坪臺(tái)時(shí)的收縮幅度為100%,記錄預(yù)孵反式阿魏酸前后無(wú)鈣液中KCl(60 mmol/L)和U46619(1μmol/L)的收縮幅度以及復(fù)鈣(Ca Cl2 2.5 mmol/L)后的幅度變化。結(jié)果:(1)在靜息狀態(tài)時(shí),反式阿魏酸(1,1.5,2,2.5,3 mmol/L)對(duì)離體RCA張力無(wú)明顯影響。以KCl(60 mmol/L)所致離體RCA收縮的最大幅度為100%,隨著浴槽內(nèi)反式阿魏酸濃度的不斷升高,血管環(huán)收縮百分比依次為(0.11±0.02)%、(0.14±0.09)%、(0.23±0.12)%、(0.37±0.15)%、(0.58±0.24)%,實(shí)驗(yàn)組與溶劑對(duì)照組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)KCl(60 mmol/L)、U46619(1μmol/L)、ET-1(0.01μmol/L)預(yù)收縮離體RCA,最大收縮幅度分別是(2.69±0.16)m N、(4.48±0.42)m N、(6.74±0.35)m N。當(dāng)預(yù)孵反式阿魏酸的濃度為1.5 mmol/L時(shí),KCl、U46619、ET-1組的收縮幅度與溶劑對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異(P0.05);預(yù)孵濃度為2 mmol/L時(shí),KCl、U46619、ET-1的最大收縮幅度分別降低了50.12%、43.38%和36.25%,與溶劑對(duì)照組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);預(yù)孵濃度為2.5 mmol/L時(shí),KCl、U46619、ET-1的最大收縮幅度分別降低了94.19%、95.97%和97.23%,與溶劑對(duì)照組相比,具有顯著性差異(P0.05)。(3)反式阿魏酸(1,1.5,2,2.5,3 mmol/L)能夠濃度依賴(lài)性地舒張內(nèi)皮完整組和去內(nèi)皮組離體RCA血管環(huán)。在內(nèi)皮完整組與去內(nèi)皮組之間,反式阿魏酸的舒張作用無(wú)顯著性差異(P0.05)。反式阿魏酸舒張KCl、U46619或ET-1預(yù)收縮的離體RCA,最大舒張率分別為(98.39±2.92)%;(95.03±2.86)%;(91.58±2.10)%。(4)預(yù)孵TEA、Gli、Ba Cl2、L-NAME或Indo對(duì)反式阿魏酸引起的離體RCA舒張作用均無(wú)顯著性影響(P0.05);但是預(yù)孵4-AP能使KCl(60 mmol/L)、U46619(1μmol/L)、ET-1(0.01μmol/L)預(yù)收縮離體RCA的最大舒張幅度分別降低了16.36%、20.46%和17.55%,與溶劑對(duì)照組相比,均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(5)預(yù)孵反式阿魏酸(1,1.5,2 mmol/L)能夠明顯抑制KCl(60 mmol/L)在無(wú)鈣PSS液中復(fù)鈣后誘導(dǎo)的外鈣依賴(lài)性血管收縮,收縮率分別為(58.35±1.61)%、(32.90±1.63)%、(2.95±0.59)%;能夠抑制U46619(1μmol/L)在無(wú)鈣PSS液中引起的一過(guò)性小幅度收縮(phasic收縮)以及復(fù)鈣后的收縮(tonic收縮),收縮率分別為(69.35±1.52)%、(40.10±1.02)%、(6.74±0.36)%;(40.89±0.91)%、(13.74±0.43)%、(5.43±0.17)%。結(jié)論:(1)反式阿魏酸對(duì)靜息狀態(tài)的離體RCA無(wú)作用,但能夠抑制KCl(60 mmol/L)、U46619(1μmol/L)、ET-1(0.01μmol/L)引起的收縮作用。(2)反式阿魏酸能夠濃度依賴(lài)性的舒張KCl(60 mmol/L)、U46619(1μmol/L)、ET-1(0.01μmol/L)預(yù)收縮的離體RCA,其RCA血管舒張作用與內(nèi)皮的完整性無(wú)關(guān),也與NO及PGI2合成途徑無(wú)關(guān)。(3)反式阿魏酸對(duì)離體RCA的舒張作用可能與激活血管平滑肌細(xì)胞上KV通道、抑制細(xì)胞內(nèi)鈣釋放和外Ca2+內(nèi)流有關(guān),與KCa通道、KATP通道、KIR通道無(wú)關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：反式阿魏酸 RCA 舒張作用 電壓依賴(lài)性鉀通道 鈣通道
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R285
【目錄】：

• 中文摘要5-9
• 英文摘要9-13
• 常用縮寫(xiě)詞中英文對(duì)照表13-14
• 前言14-16
• 1 材料與方法16-25
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料16-17
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法17-25
• 2 結(jié)果25-36
• 2.1 反式阿魏酸對(duì)離體大鼠冠狀動(dòng)脈靜息狀態(tài)及預(yù)收縮血管環(huán)張力的影響25-27
• 2.2 預(yù)孵反式阿魏酸對(duì)離體RCA收縮作用的影響27-29
• 2.3 內(nèi)皮對(duì)反式阿魏酸舒張預(yù)收縮冠脈血管作用的影響及L-NAME和Indo對(duì)其舒張作用的干預(yù)29-30
• 2.4 預(yù)孵反式阿魏酸對(duì)外鈣內(nèi)流和內(nèi)鈣釋放引起冠脈收縮的影響30-32
• 2.5 四種鉀通道阻斷劑對(duì)反式阿魏酸舒張KCl/U46619/ET-1 預(yù)收縮冠脈血管環(huán)作用的影響32-36
• 3 討論36-39
• 4 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 綜述43-53
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 致謝53-55
• 在學(xué)期間研究成果55-56
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷56

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